第十二章 厌氧性细菌（ Anaerobic bacteria）缺乏完善的呼吸酶系统，必须在无氧环境下才能生长繁殖根据能否形成芽胞，可分为：厌氧芽胞梭菌属：（ 重点讲 ）破伤风梭菌、产气荚膜梭菌、肉毒梭菌、艰难梭菌无芽胞厌氧菌：（自学）概述共同特征：大多为严格厌氧菌，革兰染色 阳性 ；芽胞直径多比菌体粗 ，使菌体膨大呈 梭状 ；形成芽胞后 抵抗力强 ；侵袭力不强，产生外毒素 ，引起特定的症状第一节 厌氧芽胞梭菌属 (Clostridium)1. 形态与染色 菌体细长，有周身鞭毛、无荚膜； 革兰染色 阳性 ； 芽胞 正圆形，位于菌体 顶端 ， 大于菌体 ，使细菌 呈鼓槌状 一、破伤风梭菌 (C. tetani)（一）生物学性状2. 培养特性和生化反应 严格厌氧 ； 血平板上，有 β溶血， 羽毛状菌落 ； 不发酵糖类，不分解蛋白质； 在疱肉培养基中，肉渣变黑，腐败恶臭味3. 抵抗力 芽胞抵抗力很强； 在干燥的土壤和尘埃中可存活数年羽毛状菌落庖肉培养基一、破伤风梭菌 (C. tetani)1. 致病条件伤口需形成 厌氧微环境伤口窄而深（如刺伤），有泥土或异物污染；大面积创伤、烧伤，坏死组织多，局部组织缺血；同时伴有需氧菌或兼性厌氧菌混合感染。
该菌 无侵袭力 ，仅在局部繁殖，其致病作用依赖于病菌所产生的 外毒素 二）致病性与免疫性一、破伤风梭菌 (C. tetani)2. 致病物质对氧敏感的破伤风溶血毒素 (tetanolysin)质粒编码的 破伤风痉挛毒素 (tetanospasmin)—— 引起破伤风的主要致病物质（ 1） 属 神经毒素 ，毒性极强 (小鼠 LD50为 0.015ng，对人致死量 <1µg，仅次于肉毒毒素）；（ 2） 为蛋白质 ， 不耐热；可被蛋白酶破坏 3） 作用机制：对 脑干神经细胞 和 脊髓前角神经细胞 有高度的亲和力 阻止抑制性神经介质甘氨酸和 γ-氨基丁酸的释放 ， 屈肌 、 伸肌同时强烈收缩 ， 造成骨骼肌强制性痉挛 一、破伤风梭菌 (C. tetani)破伤风痉挛毒素作用机制阻止抑制性神经介质甘氨酸和 γ-氨基丁酸的释放淋巴、血菌（芽胞）在局部生长繁殖产生 破伤风痉挛毒素沿着运动神经末梢逆行 脊髓前角、脑干阻止抑制性神经介质的释放屈肌和伸肌同时强烈收缩（骨骼肌强直痉挛）角弓反张牙关紧闭（脐带风 /七日风）致病过程3. 所致疾病：破伤风，脐带风 /七日风潜伏期：可从几天至几周典型的症状：苦笑面容牙关紧闭角弓反张等一、破伤风梭菌 (C. tetani)4. 免疫性破伤风免疫属外毒素免疫，主要是 抗毒素发挥中和作用 ；一般病后不会获得牢固免疫力 ；毒素释放量少，不足以引起免疫应答毒素与神经组织结合牢固、迅速获得有效抗毒素的途径是人工免疫 。
不能有效刺激免疫系统一、破伤风梭菌 (C. tetani)一般不进行涂片镜检和分离培养；典型的症状和病史即可作出诊断三）微生物学检查一、破伤风梭菌 (C. tetani) 防止创口厌氧微环境的形成：正确及时的 清 /扩创处理 ； 可疑外伤病人 ：立即注射破伤风 抗毒素 (tetanus antitoxin，TAT)（皮试），可同时注射破伤风类毒素； 已发病者 的特异性治疗：早期足量使用 抗毒素以及抗生素 ； 预防 ：破伤风 类毒素 ，白百破三联疫苗（百日咳死菌苗有免疫佐剂的作用，提高另外两个类毒素的免疫效果）（四）防治原则一、破伤风梭菌 (C. tetani)1. 形态与染色革兰 阳性 粗大杆菌；芽胞 呈椭圆形，位于 次极端；无鞭毛；在 体内 有明显的 荚膜 二、 产气荚膜梭菌 (C. perfringens)（一）生物学性状2. 培养特性厌氧，但不十分严格；血平板上 双层溶血环 （靶样溶血）： θ毒素 引起的 透明 溶血 内 环； α毒素 引起的 不完全 溶血 外 环；蛋黄琼脂平板上，菌落周围出现乳白色浑浊圈，是 α毒素（卵磷脂酶）分解卵磷脂所致，称 Nagler反应；Nagler反应（＋）卵黄琼脂平板二、 产气荚膜梭菌 (C. perfringens)代谢活跃，分解多种糖类，产酸产气；庖肉培养基 中分解肉渣中糖类，产生大量气体，肉渣呈红色；牛奶培养基中，分解乳糖产酸，酸使酪蛋白凝固，同时产生大量气体，冲散凝固的酪蛋白，可出现“ 汹涌发酵 ” (stormy fermentation)。
庖肉培养基 牛乳培养基－汹涌发酵二、 产气荚膜梭菌 (C. perfringens)（二）致病性1. 致病物质产气荚膜梭菌能产生 12种外毒素根据 4种主要毒素（ α、 β、 ε、 ι）的抗原性，将该菌分为 5个血清型（ A~E）；对人致病的主要为 A和 C型 ， A型 （ 气性坏疽、食物中毒 ）；C型 （ 坏死性肠炎 ）其中多种毒素即为胞外酶二、 产气荚膜梭菌 (C. perfringens)产气荚膜梭菌主要和次要毒素及其分型毒素 生物学作用 毒素分型 A B C D E 主要毒素 α ( al p h a) 卵磷脂酶，增加血管通透性，溶血和坏死作用 + + + + + β ( b et a) 坏死作用 - + + - - ε ( e p s ilon) 增加胃肠壁通透性 - - - + - ι ( iot a) 坏死 作用，增加血管通透性 - - - - + 次要毒素 δ ( d el t a) 溶血素 - ± + - - θ ( t het a) 溶血素，细胞毒素 ± + + + + κ ( k a p p a) 胶原酶、明胶酶、坏死作用 + + + + + λ ( lam b d a) 蛋白酶 - + - + + μ ( m u) 透明质酸酶 ± + ± ± ± ν ( nu) D N A 酶 ± + + ± ± 神经氨酸酶 改变神经节苷脂受体 + + + + + 其它 肠毒素 肠毒素、细胞毒素 + nt + + t + 大多菌株产生；± 某些菌株产生； - 不产生； nt 未研究 2. 所致疾病（ 1） 气性坏疽 ： 由 A型产气荚膜梭菌及其他梭菌引起 致病条件同破伤风； 以 组织坏死、水气肿、全身中毒 为特征；大量毒素入血局部生长繁殖 产生大量毒素和酶细菌侵入肌肉组织毒血症全身中毒症状（ 40~100%死亡率）卵磷脂酶、透明质酸酶分解肌肉组织中的糖类，产酸产气气肿挤压软组织和血管，影响血液供应，肌肉坏死，病变部位水肿二、 产气荚膜梭菌 (C. perfringens)2. 所致疾病气性坏疽2. 所致疾病（ 2） 食物中毒 ： 食入被该菌大量污染的食物（主要是肉类）感染菌株： A型菌株致病物质： 肠毒素症状：腹痛、腹胀、水样腹泻；无热、无恶心呕吐，可自愈（ 3） 坏死性肠炎感染菌株： C型菌株致病物质： β毒素症状：剧烈腹痛、腹泻、肠黏膜出血、伴血便二、 产气荚膜梭菌 (C. perfringens)（三）微生物学检查气性坏疽发展迅速，后果严重，应尽早作出确实的细菌学报告，及早治疗。
直接涂片镜检深部创口取材涂片；革兰阳性大杆菌，有荚膜；白细胞甚少且形态不典型；伴有其它杂菌；早期诊断能避免病人截肢或死亡二、 产气荚膜梭菌 (C. perfringens)分离培养及动物实验接种血平板或庖肉培养基，镜检及生化反应鉴定；取细菌培养液 0.5~1ml静脉注射小鼠，进行动物实验动物躯体膨胀，解剖观察，脏器和肌肉有大量气泡，尤其肝脏最为明显“泡沫肝”；如怀疑产气荚膜梭菌性食物中毒，在发病后一日内，检出大于 105病菌 /克食品或 106病菌 /克粪便可确立诊断二、 产气荚膜梭菌 (C. perfringens)（三）微生物学检查（四）防治原则预防无类毒素预防及时处理伤口，破坏和消除厌氧微环境预防性的使用抗生素治疗局部感染控制抗生素多价抗毒素高压氧舱法二、 产气荚膜梭菌 (C. perfringens)三、肉毒梭菌 (C. botulinum)革兰阳性 粗短杆菌；芽胞 呈椭圆形 ， 粗于菌体 ， 位于 次极端 ， 使细胞呈汤匙状或网球拍状 ；有鞭毛 ， 无荚膜 一）生物学特性（二）致病性1. 致病物质 —— 肉毒毒素对人致死量为 0.1µg，无毒前体 毒素 ；不耐热 ，煮沸 1分钟即可被破坏；致病机理：抑制乙酰胆碱释放，导致 弛缓性麻痹 。
乏力 —— 眼肌、咽部肌肉、膈肌麻痹 —— 吞咽咀嚼困难，呼吸困难 —— 死于呼吸衰竭蛋白酶降解三、肉毒梭菌 (C. botulinum)2. 所致疾病（ 1） 食物中毒 该病是单纯性毒素中毒，而非细菌感染 ； 临床表现与其它食物中毒不同，主要为运动神经末稍麻痹 ，少见胃肠症状 2）婴儿肉毒症 感染者以 6个月以内的小婴儿居多，为细菌芽胞直接感染； 症状与肉毒毒素食物中毒类似，最先引人注意的症状是便秘，吸乳、啼哭无力 3）创伤肉毒中毒 创伤感染肉毒梭菌，毒素进入血液出现中毒症状三、肉毒梭菌 (C. botulinum)高致命毒素除皱危险大年轻半年换来三角眼（三）微生物学检查粪便、可疑食物和呕吐物煮沸杀死无芽胞杂菌；进行厌氧分离培养；毒素检查四）防治原则加强食品卫生管理和监督，提高防范意识 ；尽早根据症状作出诊断，迅速注射 A、 B、 E三型多价 抗毒素 ，同时加强护理和对症治疗三、肉毒梭菌 (C. botulinum)自学 G+粗大杆菌；无荚膜， 有芽胞 对氧极为敏感，一般厌氧培养不宜生长，常用艰难梭菌选择培养基 致病物质有：透明质酸酶、黏附因子和外毒素等外毒素有毒素 A和毒素 B。
毒素 A为肠毒素，引起肠液分泌，黏膜损伤等；毒素 B为细胞毒素，引起黏膜损伤和假膜的形成 所致疾病：抗生素相关性腹泻 Antibiotic-Associated Diarrhea；假膜性结肠炎 Pseudomembranous Colitis四、艰难梭菌 (C. difficile)属人体内的正常菌群，包括 G＋ 和 G－ 的球菌和杆菌；在某些特定状态下，这些厌氧菌作为条件致病菌可导致内源性感染第二节 无芽胞厌氧菌(Nonspore-forming anaerobes)革兰阴性 革兰阳性 杆菌 球菌 杆菌 球菌 类杆菌属 （ Bacteriodes ） 韦 荣 菌 属 ( Veillonella ) 丙酸杆菌属( Propionibacterium ) 消化链球菌属( Peptostreptococus ) 普雷沃菌属 ( Prevotella ) 双歧杆菌属( Bifidobacterium ) 紫单胞菌属 ( Porphy romonas ) 真杆菌属( Eubacterium ) 梭杆菌属( Fusobacterium ) 放线菌属( Actinomyces ) 感染特征：1. 多为内源性感染，呈慢性过程；2. 感染无特定病型，大多为化脓性炎症 ；3. 分泌物或脓液黏稠，有恶臭，有时有气体产生；4. 使用氨基糖苷类。