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SPF级鸡胚成纤维细胞的制备

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SPF级鸡胚成纤维细胞的制备_第1页
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SPF级鸡胚成纤维细胞(CEF)的制备1, 鸡胚应将气室放置在顶部,用镊子将鸡胚打破,撕去表皮,取出鸡胚,挑取脖子部位,放在呈有Hanks培养基的平皿中,去 掉头和内脏2, 用剪刀剪组织块,组织块V5mm,2-3min,时间太短剪不开,时间太长会形成很多死细胞15ml Hanks冲洗吸取组织,沉降 5min后小心倒掉上层液体3, 加入10ml胰酶/10只鸡胚,37度消化20min,4, 加入20ml MEM完全培养基,反复吹洗50次,加入100ml三角瓶,放置5min沉降,等待中处理纱布,用Hanks润湿纱布, 过滤,用完全培养基冲洗纱布,计数,铺板子,浓度为T150 培养瓶=4*107,,六孔板=3*106/孔。

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