LI-6400 便携式光合仪测量光合作用步骤 一、光合测定过程 1. 正确连接 IRGA ，缓冲瓶（利用大气二氧化碳，将缓冲瓶放置离人较远并悬挂2-3m处） 接上 电池( 电源)，开机 2. 安装红蓝（LED ） 光源选 Config Menu （F2） ， 选 Light Source Control项， 选取 Pick Source， 选取人工光 Lightsource = 6400 - 02B，按 F5“ Done” 进入“ Config Menu ”第一项“ Config Status ”, 选择 F3 “Save As”, 给一个文件名 e.g: “LED Red Blue Light Source”进入“ Config Menu ”最后一项“ Reset Menu ” ，选取“ Reset to User Configuration”, 确认选择“ LED Red Blue Light Source” ，这样，光源就安装成功了以后，不必再安装光源了如果这一步已经安 装好可以省去直接开机 3. 根据叶室（一般选择2×3 LED), 按 Enter ，选择 Y 4. 当显示： “Is the IRGA connected?(Y/N)”选择“ Y” 。
预热二十分钟以上 5. 调零：调零前确保叶室紧闭， （即上下叶室刚刚接触到，再张开叶室，调紧螺丝半圈） 选“Calib Menu ” （校准菜单即 F3）项： ① 选“Flow Meter Zero”项（流量计调零），按 Enter ，10 秒后读数稳定，视具体情况，用f1 、 f2 调节，至读数基本稳定，且在±1mv 范围内， F5 退出； ② 选择红外分析仪调零“IRGA Zero” ： 此时要求旋紧碱石灰管和干燥管上端的调节螺母指向Full SCRUB 方向，即全虑除状态清空并关闭叶室，按Enter ，按 Y，按 press any key，等待数数分钟， 看屏幕确定待 CO2_R 及 CO2_S 波动范围都小于± 0.1 时可以按 Auto_CO2；待 H2O_R 及 H2O_S 波 动范围都小于± 0.01 时， 可以按 Auto_H2O 或者在以上条件都满足时， 按 Auto_All 按 F5 (Quit) 退出，进入“ View, Store Zero_Span”, 按 F1 “Store ”, 保存本次校准数据 6. 设置光源：进入主界面按New Msmnts （测量菜单即 F4） ，按 2（进入第二功能行），PAR （F5） ， 选择 Q ，输入光强（以外界光强为基准） 。
然后按 escape 进入主界面 7. 开始测量：按 New Msmnts （F4）项，打开碱石灰管和干燥管上的螺母至全旁路(ByPass) 位置 （以前已经打开的话，此时只需要再检查一下）： ①“Match” 如果?CO2>0.5 ( 通常，正常值可以 < 0.3) ，则需要匹配 (level 1 F5“Match”) CO2 读数为环境大气浓度380 左右, H2O 读数为 10-20 左右（视具体天气情况而定） ，待读数稳定且 样品室和参考室的数值稳定时，选取label 1 F5“Match” ；待数值稳定，且两室的数值之差在 0.5 以内 ② 选“Open Logfile” （F1）项，在 file：Date 后输入文件名和标记进行命名（一般是时间+ 试验样地 +名字，这个可根据个人爱好设定，只要不与其他同学重复就行），按 Enter ，进入 Enter/Edit Remark 标样地，按 Enter ，开始测量 ③ 打开叶室，夹入样品，进行测定等待数据稳定, 按 C 行 Photo：数值稳定在小数点后一位 或者 E行 Stable 1 时稳定按 Log（F1）测一个数据，更换另一叶片，按 f4 ，添加 remark, 重复以上步骤，进行测量。
至少半小时进行一次 Match ④ 测量完毕，按 F3 “Close”关闭文件，“escape” ，进入主菜单 8. 关机按 esc ，退回主界面，按 welcome menu (F1), 选择 Quite open ，选 IRGAS OFF ，关闭 电源 9. 关机后将化学管旋钮旋至中间松弛状态；旋转叶室固定螺丝，保持叶室处于打开状态二．测光响应曲线： 1. 开机，配置界面选择红蓝光源，连接状态按“Y” ，进入主菜单，预热约20分钟 调零等操 作与测光合作用一致，参考前页 2．按 New Msmnts（F4 ) 进入测量菜单如果将使用二氧化碳钢瓶控制浓度的话，按 2 ，再按 F3(CO2 Mixer) ，按上下箭头键选择 R) Ref CO2 XXX μmol mol-1，按 Enter ，设定 CO 2浓度为环 境 CO2浓度(约 400 μmol mol-1)，按 Enter （此步骤可选择）3. 按 1,F1, Open Log File,建立一个文件，按Enter ，输入一个 remark ，按 Enter 打开叶室， 夹好叶片，闭合叶室 4. 按 5 ，F1(Auto prog) ，进入自动测量界面，按上下箭头键选择 LightCurve(光响应曲线， A-cicurve是 CO2响应曲线 )，按 Enter 进入，按 Y，出现 Desired lamp settings，自高到低设 定光强梯度如： 1500 1200 1000 800 600 400 200 150 100 50 20 0(注意数值间一定空格间隔， 为保障测量准确，后面的间隔要小一些， 上面数值仅供参考 )， 按 Enter ， 出现 Minimum wait time (secs): 设定 60 ，按 Enter ，出现 Maximum wait time(secs):设定 200，按 Enter ，出现 Match if | ΔCO2| less than (ppm): 设定 20 或 15 ，按 Enter ，按 Y，进入自动测量，等待测量结束。
更换叶片，重复以上步骤待全部测量完毕后，按 1 ，F3 (Close file)保存文件 5. 关机按 esc ，退回主界面，按 welcome menu (F1), 选择 Quite open ，选 IRGAS OFF ，关闭 电源 把化学管旋钮旋至中间松弛状态；旋转叶室固定螺丝，保持叶室处于打开状态三、注意事项 1.1 测定之前的注意事项 1. 为了省电，测定开始后要将LI-COR 6400 主机的背光关掉（ ctrl+shift+home） 2. 在测定过程中，主机屏幕要遮起来（手套、笔记本等），以免太阳直射，造成老化，影响观察 数据 3. 叶片生长环境一致，且能代表满足实验目的需要的叶片生长微环境主要针对光环境 4. 叶龄一致避免使用衰老和不成熟叶片 5. 叶片之间无相互遮荫的叶片 6. 选择生长状况良好叶片，包括无病虫害、无损伤、水份和营养状况良好 7. 测定过程中尽量保持叶片原来状态，包括位置，角度等等 8. 最适测量时间为上午9:00 — 11:00 ，即双峰植株第一个光合状况最佳时间，如果是单峰植 株，则可以适当延长测定时间 9. 同一天测定光响应和CO2响应曲线时，尽量使用不同叶片。
这两个叶片要求叶龄、生长状况、 生长环境尽可能的一致 1.2 仪器注意事项 1. 一旦三分之二干燥剂颜色发红需要立即更换； 2. 使用 CO2钢瓶时，必须先调零再装钢瓶； 3. 注意仪器保养，轻拿轻放，信号线尽量保持伸展，勿扭曲，否则易使接口不牢，线头从接口 处滑出； 4. 关于缓冲瓶：应使用无色透明容器，且体积以不小于二升为佳，出气口与进气口要尽可能的 远四．常见故障及处理： 1. 休眠后 CO2浓度无法控制，这是使用CO2钢瓶引起的，故用钢瓶时预热稍长，干燥剂需要换 可直接拆卸，迅速换好安装回去； 2. match 时显示“ IRGA not ready” ，此时需检查探头各处是否接牢，如果不是接线的问题，可 能故障与 1 相似； 3. CO2calibration 不能达到 50 以下，需检查空气进口是否封闭严实，另外就是滤嘴是否需要 更换 4. 使用 CO2 钢瓶时，最小 CO2R 在 50ppm. 。