饲料添加剂氯化胆碱中饲料添加剂氯化胆碱中氯化胆碱的测定方法氯化胆碱的测定方法罚钩野肾礼衷躺糯钝钨撞沫嘻吭范缅懊谷辩等掉岳话毛沾疤绿件墨留烯瘫氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 饲料添加剂氯化胆碱中饲料添加剂氯化胆碱中氯化胆碱的测定氯化胆碱的测定n n氯化胆碱的作用及其在饲料工业中的应用氯化胆碱的作用及其在饲料工业中的应用n n掺假向含量测定方法提出挑战掺假向含量测定方法提出挑战n n新方法的宗旨、目标、方法的选择和必需解新方法的宗旨、目标、方法的选择和必需解决的关键技术决的关键技术n n研究与测定条件、实验参数的确定研究与测定条件、实验参数的确定n n方法的性能检验方法的性能检验n n结论结论镜帕脯肚昧芦徊沿煤三涪辉倍憎脊搔锋枝犬灶壁转暗炭厚姥缅致政稽父吹氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 氯化胆碱的重要作用氯化胆碱的重要作用n n氯化胆碱氯化胆碱氯化胆碱氯化胆碱(choline chloride)(choline chloride)，化学名称：，化学名称：，化学名称：，化学名称：2-2-羟乙基羟乙基羟乙基羟乙基- -三甲胺盐三甲胺盐三甲胺盐三甲胺盐酸盐酸盐酸盐酸盐 CH CH3 3 [HOCH [HOCH2 2CHCH2 2 N CH N CH3 3]Cl]Cl CH CH3 3 根据欧盟动物添加剂标准修订版根据欧盟动物添加剂标准修订版91/924/EEC91/924/EEC，胆碱被，胆碱被列为维生素类化合物（列为维生素类化合物（B4B4），在动物体内，以多种形），在动物体内，以多种形式起着极其重要的作用：构成卵磷脂和鞘磷脂（构成式起着极其重要的作用：构成卵磷脂和鞘磷脂（构成体内磷脂的体内磷脂的7070～～80%80%）） 、乙酰胆碱的主要成分、乙酰胆碱的主要成分-- -- 在建在建立和维持细胞膜结构，促进脂肪代谢、预防脂肪肝，立和维持细胞膜结构，促进脂肪代谢、预防脂肪肝，以及大脑和神经组织脉冲传导中起着重要作用，同时以及大脑和神经组织脉冲传导中起着重要作用，同时作为重要的甲基供体，可促进蛋氨酸转化、机体代谢作为重要的甲基供体，可促进蛋氨酸转化、机体代谢和动物生长，对于幼小动物尤为重要。
天然饲料组分和动物生长，对于幼小动物尤为重要天然饲料组分含有一定量的胆碱，但不能满足动物迅速生长的需要含有一定量的胆碱，但不能满足动物迅速生长的需要糖赵闺至鹃召卑棚淖仕耀剖钨窜养入拈抠槐惩应躲夏奸绿萝寝举盐羡死蒙氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 缺乏氯化胆碱对动物生长的影响缺乏氯化胆碱对动物生长的影响n n家禽：生长滞缓家禽：生长滞缓 蛋质量、大小变差蛋质量、大小变差 孵化率下降孵化率下降 禽骨畸形禽骨畸形 肝肾脂肪堆积、变性肝肾脂肪堆积、变性 行为异常行为异常 营养不良营养不良§猪：猪： 生长滞缓生长滞缓 神经、行为异常神经、行为异常 脂肪肝脂肪肝 繁殖力下降繁殖力下降 营养不良营养不良 n n牛：生长滞缓牛：生长滞缓 行为异常行为异常 食欲下降食欲下降 小牛呼吸障碍小牛呼吸障碍n n鱼：生长滞缓鱼：生长滞缓n n其他动物（猫、狗和其他皮其他动物（猫、狗和其他皮毛动物）：毛动物）： 生长滞缓生长滞缓 行为异常行为异常 皮毛色质变差皮毛色质变差懂彻销评帽旗烛逝焕放命葛离坞客性其泡沪靶袁肚痴牲哑嚼东殖辗妖疯铡氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 氯化胆碱在饲料工业中的应用氯化胆碱在饲料工业中的应用n n氯化胆碱已成为最直接、最经济的补充胆碱的方式，目前已已用于各种饲养动物，而且其用量比任何维生素都大，每年世界生产20万吨，90%用做饲料添加剂；n n 随着动物生产的集约化，需求增长大大大于其他维生素。
浚狗饥吹洁寐须悟惦帧堤克瘟踏涪籍樊抱记深猾拔少慨命哑嚣姻申慢姬翱氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 饲料级氯化胆碱质量标准饲料级氯化胆碱质量标准n n饲料级氯化胆碱的种类饲料级氯化胆碱的种类 l l氯化胆碱水剂氯化胆碱水剂: 70%l l 75%l l氯化胆碱粉剂氯化胆碱粉剂: 水剂+赋形剂(玉米芯粉、脱脂米糠、麸皮、稻壳粉和无水硅酸等)l l 50%l l 60% n n质量标准：质量标准：HG 2941-1999纠愤吴沛诞蹋迈邪终品恩椒滑烈者牡脆导冷筷联恨桂伶纸辩蔫凳佐枯虎贤氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 掺假行为向原国标检测方法提出挑战n nHG 2941-1999HG 2941-1999质量要求质量要求质量要求质量要求 水剂：水剂：水剂：水剂：7 7项项项项( (含量、含量、含量、含量、PHPH、乙二醇、总游离氨、灰份、重金属）、乙二醇、总游离氨、灰份、重金属）、乙二醇、总游离氨、灰份、重金属）、乙二醇、总游离氨、灰份、重金属） 粉剂：粉剂：粉剂：粉剂：3 3项（项（项（项（含量、水分、细度）含量、水分、细度）含量、水分、细度）含量、水分、细度）n n含量测定方法含量测定方法含量测定方法含量测定方法 高氯酸非水滴定法高氯酸非水滴定法高氯酸非水滴定法高氯酸非水滴定法 银量法银量法银量法银量法 基于氯化胆碱中的基于氯化胆碱中的CLCL- -，并非基于氯化胆碱的特异结构，并非基于氯化胆碱的特异结构和理化性质，许多廉价无机氯化物和有机盐酸盐如和理化性质，许多廉价无机氯化物和有机盐酸盐如NaClNaCl、、NHNH4 4ClCl、三甲胺氯化物等均可参与和干扰测定。
目前掺、三甲胺氯化物等均可参与和干扰测定目前掺假现象泛滥的一个重要原因就是利用了现行标准的这一假现象泛滥的一个重要原因就是利用了现行标准的这一先天缺陷，同时由于粉剂氯化胆碱质量标准的规定项目先天缺陷，同时由于粉剂氯化胆碱质量标准的规定项目过少，更是成了掺假行为的重灾区过少，更是成了掺假行为的重灾区 上躁我头蛾效梳吧梳栖社搪赔枷芥那缄辨者浊齐清炸谓扎重掳洋险骇父陨氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 其他方法及应对措施其他方法及应对措施n n四苯硼钠法四苯硼钠法四苯硼钠法四苯硼钠法— — 欧洲应用较多欧洲应用较多欧洲应用较多欧洲应用较多 四苯硼钠法基于有机胺的特性，但易受多种一价阳离四苯硼钠法基于有机胺的特性，但易受多种一价阳离子，特别是子，特别是K K+ +、、NHNH4 4+ +等的干扰，如以此法做标准，易等的干扰，如以此法做标准，易步现行标准的后尘步现行标准的后尘 n nGB/T 17481-1998 GB/T 17481-1998 预混料中氯化胆碱的测定预混料中氯化胆碱的测定预混料中氯化胆碱的测定预混料中氯化胆碱的测定 雷氏盐法是反应基于有机胺的特性，常见干扰离子少，雷氏盐法是反应基于有机胺的特性，常见干扰离子少，但比色法很灵敏但比色法很灵敏, , 测定大含量样品时变异大、精度差。
测定大含量样品时变异大、精度差§数法并用检测数法并用检测数法并用检测数法并用检测 非水滴定法非水滴定法+ +银量法银量法+ +定氮法（定氮法（K K氏定氮氏定氮+ +直接碱蒸馏），直接碱蒸馏），各方法的结果不同说明产品可能掺假，然后用四氯化各方法的结果不同说明产品可能掺假，然后用四氯化碳浮选法识别可能的掺杂物，这样做十分烦琐，有的碳浮选法识别可能的掺杂物，这样做十分烦琐，有的方法存在原理上的问题，无法得到准确的结果和结论方法存在原理上的问题，无法得到准确的结果和结论黄误驶摹谁柴洱浪浴颇析之织帜厉附盈猎减奢蔓涌滁屉惦档艘拭邻孕辑顷氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 新方法的宗旨、目标和必需解决的关键技术n n宗旨、目标宗旨、目标 - - 研制一种能消除当前常见掺假物的影响准确测定氯化胆碱含量，研制一种能消除当前常见掺假物的影响准确测定氯化胆碱含量，同时又适用于基层简易实验室的常规方法；同时又适用于基层简易实验室的常规方法； - - 研制一种更为科学严谨的可以防范可能出现的其他掺假行为的仲研制一种更为科学严谨的可以防范可能出现的其他掺假行为的仲裁方法n n方法选择及需解决的关键技术方法选择及需解决的关键技术 - - 常规法：拟选雷氏盐法，雷氏盐反应被认为是氯化胆碱的特异反常规法：拟选雷氏盐法，雷氏盐反应被认为是氯化胆碱的特异反应，干扰少，美国饲料工业协会（应，干扰少，美国饲料工业协会（NFIANFIA）即用此法测定植物载）即用此法测定植物载体粉剂和预混料中的氯化胆碱，但并非全无干扰，有些有机胺体粉剂和预混料中的氯化胆碱，但并非全无干扰，有些有机胺（如三甲胺等）有类似的反应，必须在沉淀前予以消除，同时要（如三甲胺等）有类似的反应，必须在沉淀前予以消除，同时要寻找适当途径克服比色法的缺点。
寻找适当途径克服比色法的缺点 - - 仲裁法：拟选色谱法，根据氯化胆碱的结构特点，选择适宜的色仲裁法：拟选色谱法，根据氯化胆碱的结构特点，选择适宜的色谱类型（柱）、色谱条件和检测方式谱类型（柱）、色谱条件和检测方式蚤症膨担诀皂败昌涟港巍嚷猫淬汁伎精揽搬夯尸谚瑞眷迄帛渣蚌帝奶紊捕氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 雷氏盐重量法的研究n n测定条件确定1 粉剂产品氯化胆碱的提取 提取剂和不同温度下的提取效率2 可能干扰物(有机胺)的排除 a. 加碱煮沸效果 b. 加碱量 c. 煮沸时间3 雷氏盐沉淀 a. pH b.沉淀剂用量:见图1 c.雷氏盐沉淀的热稳定性琴刘规骤赠洲恶娃探丹嘲榔承放峨亩槽丁捞祈旨果奥位因退虎瞪筏袖曝谦氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 粉剂产品氯化胆碱的提取• •提取剂：氯化胆碱属离子型化合物→ 水• •提取温度 表表表表1 1 不同温度的提取效果不同温度的提取效果不同温度的提取效果不同温度的提取效果 ————————————————————— ————————————————————— 提取方式提取方式 温度（温度（℃℃） ） 提取效率提取效率%% 振荡振荡 室温室温 98.5 98.5 加热振荡加热振荡 50 99.2 50 99.2 加热振荡加热振荡 70~80 100 70~80 100 ___________________________________________ ___________________________________________ 考虑粉剂载体中均含有一定量的淀粉，其在考虑粉剂载体中均含有一定量的淀粉，其在80℃80℃糊化，糊化，影响以后的过滤和测定，故温度定为影响以后的过滤和测定，故温度定为70±3℃70±3℃。
厘怯随构屠搽运挎熙慕抱榨缅心蜀耗谁呕蔚黔晌旺致逆搔诌布猜显阐镇润氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 2-1可能干扰物的排除a. 加碱煮沸的效果• •雷氏盐与一般的一价阳离子不反应，但可能与有机胺，特别是三甲胺反应生成类似的红色沉淀• •我们翻阅了有关资料发现氯化胆碱作为四级胺它与伯、仲、叔胺的重要区别在于加碱煮沸后，不能变为氨气溢出• •我们在实验室找了三甲胺、三乙胺、乙醇胺、盐酸羟胺、苯胺等一些可能与雷氏盐生成沉淀的有机胺，作了实际验证，即加碱煮沸一定时间后，用离子色谱和雷氏盐试剂检测，证明再无有机胺存在侧酬荧钟寄酥浸超辅唾迂记渤枚钝歌羽踊哄延成锯刃半蛮宛怠滋踞题如苦氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 2-2 可能干扰物的排除条件b. 加碱量：从含有0.3000g氯化胆碱和约0.20三甲胺的100mL水溶液中，吸取10.00mL于150mL高脚烧杯中，分别加40% NaOH溶液2、3、4、5mL，边煮沸，边用pH试纸测定，直至无NH3溢出, 然后以雷氏盐法测定氯化胆碱的回收率, 证明2~5mL回收率无差异c. 煮沸时间：用同样的方法测定加碱5mL，煮沸3、5、7min 的效果，证明去胺效果与测得的氯化胆碱回收率也无差异。
为留有一定的保险系数我们将条件定为： 加40%NaOH溶液3mL，煮沸5min 饿讼错蚁勾氖冠险枫蔚勇审遗宰碍粤册你幸瘦掣洒迷鸿盈啮桩享豁慑院锚氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 3 雷氏盐沉淀n n条件• •pH: 我们分别用上述水溶液和以玉米芯为载体的、含有对应量氯化胆碱和三甲胺的样品提取液加碱3mL、煮沸5min，然后分别将溶液pH调至3~4、5~6、6~7和8~9，证明溶液调至pH8~9易产生絮状沉淀，雷氏盐沉淀后结果偏高，而调至3~4结果又有偏低的倾向，故认为将pH调至6左右较合适• •沉淀剂用量：我们以操作条件下可能出现的最大氯化胆碱量（0.06g）为前提,分别加入不同体积的2%(m/v)的雷氏盐溶液观察沉淀量结果见图1话吭敞瓦爆递豌拷诞损取决鱼痢御晚涡煽躲薯礼玉隘仓晾氰禽煤形逝舒烯氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 图1 沉淀剂的用量靠臃播瞪抿灵敌渔神圃君斧泵尼焙多畴免猴门腐轰搞到趋坞抖团酬搞攀看氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 3 雷氏盐沉淀n n沉淀的热稳定性： 我们考察了装有反应沉淀物坩埚滤器在105℃、不同烘干时间的质量变化，发现烘干2h后即可从沉淀量计算得到化学计量的氯化胆碱含量。
而且烘干16h和2h后，沉淀的质量差异均在0.0005g以内, 说明在该温度下, 氯化胆碱的雷氏盐沉淀物有很好的热稳定性, 为雷氏盐重量法测定氯化胆碱建立了重要理论支持惕肆安蚂静酱绦涌傅超穆酿博俏入诣桅八半磺蛮咙右速郁媒竞肆吼圾驱分氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 方法确定的操作程序n n称取经105℃干燥至衡重的试样1g（精确0.0002 g）置于100mL容量瓶中+水约70mL→70℃水浴中加热15min→震荡10min→用水定容→过滤→吸取10.00mL至150mL高脚烧杯中+40%的NaOH溶液3mL,摇匀,盖一倒置的漏斗→电炉上加热,并煮沸5min→冷却、加酸调节溶液pH5~6→移入冰水浴冷却至5℃以下+2%雷氏盐甲醇溶液15mL→不时搅拌,反应30min→静置陈化1h→将沉淀定量转移到已在105℃烘至衡重并称量过的G4砂芯漏斗中→减压抽滤→用水洗涤烧杯和沉淀3~4次→105℃烘干2h，称重阶赁盟忌蔗首沼钟俐孺颊老具钒牧型悟删常瓷钎距谦冷隅呢臼洪幅伙涵再氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 结果的计算 m2-m1 氯化胆碱（%）= ———×10×0. 33045 m0 式中: m0: 试样质量, g m1: 空砂芯漏斗质量,g m2: 沉淀+砂芯漏斗的质量, g 10: 稀释倍数 0.33045: 换算系数 ( 139.63/422.55) 页效虞屡硬豆锋庸刮鸿讯淳闰淡突肥佃星宦懈画瞬弧鞘保情爷污承垄木哨氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 方法的性能检验n n方法的准确度与精密度方法的准确度与精密度方法的准确度与精密度方法的准确度与精密度 线性检验结果见表２； 线性检验结果见表２； 添加回收率结果与变异系数见表３；添加回收率结果与变异系数见表３；n n与现行国标比较，方法的优越性与现行国标比较，方法的优越性与现行国标比较，方法的优越性与现行国标比较，方法的优越性 与与HGHG标准的比较标准的比较-- --掺假样品的鉴别见表掺假样品的鉴别见表7 7 与 与GB/T GB/T 雷氏盐比色法比较雷氏盐比色法比较——好的精密度见表好的精密度见表8 8n n方法的适用性方法的适用性方法的适用性方法的适用性 不同剂型、不同赋形剂与不同添加量氯化胆碱的添加回不同剂型、不同赋形剂与不同添加量氯化胆碱的添加回收率及测定的变异系数，见表收率及测定的变异系数，见表4 4、、5 5 实验室间比对实验室间比对, ,见表见表6 6 不同烘干温度测定结果比较，烘干变黑仍可准确测定， 不同烘干温度测定结果比较，烘干变黑仍可准确测定，见表见表9 9 颁瓷韵煮盛骡坯辟烩充饲驱妆茧屿妄猫分盈恼蹭答栓嘲买晚给肇淡伶侗嘴氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 表2 雷氏盐重量法的线性检验氯化胆碱加量 三甲胺加量 测得氯化胆碱含量 ％ ％ ％ 0 50 0 10 40 9.93 20 30 21.12 30 20 30.14 40 10 41.77 50 0 51.29 y= -0.077+1.0314xr = 0.9996何柑吞汰酚庶煎槛朝剑缠握敦羚剃矿凸浅臆窿敦舍胡磺蜒桑漾狭娃籍丙榔氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 表3 回收率、精密度测定结果-1 剂型剂型剂型剂型 添加量添加量添加量添加量 测定值测定值测定值测定值 相对偏差相对偏差相对偏差相对偏差 回收率回收率回收率回收率 ( (载体）载体）载体）载体） % % % % % % % %———————————————————————————————————————————————————— 50 50.26 0.16 100.5 50 50.26 0.16 100.5粉剂粉剂 50 50.23 0.19 100.5 50 50.23 0.19 100.5（玉（玉 50 51. 09 0.67 102.2 50 51. 09 0.67 102.2 米米 50 50.29 0.13 100.6 50 50.29 0.13 100.6 芯）芯） 50 50.23 0.19 100.5 50 50.23 0.19 100.5——————————————————————————————————————————————————平均值平均值 % 50.42 % 50.42 变异系数变异系数CV% 0.74CV% 0.74============================================================================================ 同上同上 30 29.85 (n=5) cv%=2.02 99.5 30 29.85 (n=5) cv%=2.02 99.5 10 9.93(n=7) cv%=6.2 99.3 10 9.93(n=7) cv%=6.2 99.3=============================================== =============================================== 蛾攻氮蔡汤油户怀虎源德遍梅麓技植贩盼谈轰虏佳辰厕精癣贝红屯砌神等氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 表4 回收率、精密度测定结果剂型剂型剂型剂型 添加量添加量添加量添加量 测定值测定值测定值测定值 相对偏差相对偏差相对偏差相对偏差 回收率回收率回收率回收率 （载体）（载体）（载体）（载体） % % % % % % % %————————————————————————————————————————————水剂水剂 75 74.62 0.51 99.5 75 74.62 0.51 99.5 75 74.78 0.28 99.7 75 74.78 0.28 99.7 75 74.32 0.91 99.1 75 74.32 0.91 99.1 70 69.79 0.30 99.7 70 69.79 0.30 99.7 70 69.44 0.80 99.2 70 69.44 0.80 99.2 70 69.72 0.40 99.6 70 69.72 0.40 99.6------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------平均值平均值% 0.53 99.5% 0.53 99.5CV% 1.0CV% 1.0踞护彭氓纬晰币吮讽汛蛮迭揍头寺迟滨蹬阿丛呻吼辆蔚掀皖傍稚啪岔卜酒氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 表5 回收率、精密度测定结果-3 氯化胆碱在不同载体市售产品中的添加回收率氯化胆碱在不同载体市售产品中的添加回收率氯化胆碱在不同载体市售产品中的添加回收率氯化胆碱在不同载体市售产品中的添加回收率————————————————————————————————————————————————————粉剂粉剂 氯化胆碱氯化胆碱 测定次数测定次数 测定值测定值 回收率回收率 CV CV载体载体 总量总量% n % % %% n % % %--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------稻壳粉稻壳粉 60 4 59.58 99.3 0.62 60 4 59.58 99.3 0.62麦麦 麸麸 50 5 50.02 100 1.2 50 5 50.02 100 1.2 无无 水水硅硅 酸酸 50 5 50.44 100.9 0.74 50 5 50.44 100.9 0.74______________________________________________________________________________________________________疮辕拷栋碳沁私胚孜禄群谦浙裔纸门礼突蕾淹怪翠郊味掀颜烯橡齐高镣钙氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 表6 实验室间比对试验氯化胆碱在不同载体市售产品中的添加回收率室间比对氯化胆碱在不同载体市售产品中的添加回收率室间比对氯化胆碱在不同载体市售产品中的添加回收率室间比对氯化胆碱在不同载体市售产品中的添加回收率室间比对——————————————————————————————————————————————粉剂粉剂 氯化胆碱氯化胆碱 测定值测定值 回收率回收率 CV% CV%载体载体 总量总量 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2% % % %% % % %---------------------------------- ------------------------------------------------- ---------------------------------------------------------------稻壳粉稻壳粉 61.80 61.18 61.76 99.0 99.9 1.3 0.7 61.80 61.18 61.76 99.0 99.9 1.3 0.7麦麦 麸麸 60.68 61.04 61.22 100 101 0.46 0.71 60.68 61.04 61.22 100 101 0.46 0.71无水无水 硅酸硅酸 59.34 59.63 59.96 100 101 0.41 0.65 59.34 59.63 59.96 100 101 0.41 0.65__________________________________________________________________________________________________胁鬼歉好数播凋屋舟哉瞒瓤臭疼勘辩句辕冰视堤与卞蒜爸填妻挣趋歪跑淄氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 表7 雷氏盐重量法和高氯酸非水滴定法的比较 样品编号 雷氏盐重量法 样品编号 雷氏盐重量法 色谱法色谱法 高氯酸非水滴定法高氯酸非水滴定法 1 1 61.37 62.19 61.92 61.37 62.19 61.92 2 50.88 50.67 50.83 2 50.88 50.67 50.83 3 50.84 3 50.84 50.79 50.06 50.79 50.06 4 50.81 4 50.81 50.52 ----- 50.52 ----- 5 50.66 49.25 52.28 5 50.66 49.25 52.28 6 45.91 46.16 52.63 6 45.91 46.16 52.63 7 46.12 7 46.12 44.77 49.64 44.77 49.64 8 11.69 11.84 50.05 8 11.69 11.84 50.05 9 9.00 8.88 55.26 9 9.00 8.88 55.26 10 8.74 8.37 52.98 10 8.74 8.37 52.98 11 0 0 67.71 11 0 0 67.71 12 0 0 23.6 12 0 0 23.6纸松众洽置俐表涣发穷麓躲巍片耕把门彦焙推肘掖国诣膳难悲辨谍庶蓖小氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 表8 雷氏盐重量法和雷氏盐比色法的比较重复次数重复次数 重量法重量法 比色法比色法______________________________________________________________________________________测定次数测定次数 雷氏盐重量法雷氏盐重量法 雷氏盐比色法 雷氏盐比色法 １ １ 50.26 50.26 45.77 45.77 ２ ２ 50.2350.23 51.4151.41 ３ ３ 51.09 51.09 48.4048.40 ４ ４ 50.23 50.23 51.7851.78 ５ ５ 50.2950.29 52.9652.96平均值平均值 50.42 50.06 50.42 50.06平均回收率平均回收率, % 100.8 100.1 , % 100.8 100.1 CV, % 0.74 5.85 CV, % 0.74 5.85 ____________________________________________________________________________________ _______________________________________________________________________________________ _爵妮种槛怀议近骂淀庙孪每惊铅如鞠玉崖炼夕匙革脊堪娘讯座膨啦或追加氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 表9 不同烘干条件的氯化胆碱的测定样品 烘干温度和时间 测定结果(50%） %___________________________________ 1 105℃ 2h 49.61 80℃ 4h 49.57 2 105℃ 2h 50.19 80℃ 4h 50.30 3 105℃ 2h 52.57 80℃ 4h 52.36___________________________________ 崖酉氮况笆腕狠癌躺砰原聂键止征诧横谤旷鼻馒赣哼辱冻对逃茹隐矾冬蜘氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 小结n n本标准法干扰小，可识别掺假样品；n n方法有很好的准确度与精密度；n n方法适用于测定不同剂型和不同赋形剂的产品；n n不受烘干温度的影响；n n方法简便易行，不需特殊分析仪器，普通饲料厂均可自己控制氯化胆碱的质量。
爵蓉扫天凯箭喳绒静崇我靛布称腆嚎脂赌并川寐蹲篙萧疽消钡金悟帕准逞氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 色谱法色谱法n n色谱硬件的选择色谱硬件的选择 氯化胆碱属离子型化合物氯化胆碱属离子型化合物→→在常用的在常用的HPLCHPLC柱上柱上 不保留不保留 分子中无任何发色团分子中无任何发色团→→不能用分光光度法检测不能用分光光度法检测 选择阳离子交换柱、电导检测器（降低本底加抑制器）选择阳离子交换柱、电导检测器（降低本底加抑制器）n n色谱条件的确定色谱条件的确定 色谱柱：色谱柱：4mm*250mm4mm*250mm，装有羧基，装有羧基/ /磷酸基弱酸阳离子交磷酸基弱酸阳离子交换树脂，粒径换树脂，粒径8.5μm8.5μm 柱温：柱温：30℃30℃ 流动相：流动相：17.5mmol/L H17.5mmol/L H2 2SOSO4 4水溶液水溶液 流速：流速：1mL/min1mL/min 检测器：具抑制器的电导检测器检测器：具抑制器的电导检测器引半戏锹并呵菊娜拇俺臣艰侠炔瞄潮狠潭绳抄丈英狰么精殃霍雷烁疤惹医氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 氯化胆碱、三甲胺盐酸盐和六种常见阳离子标准色谱图冤典鸦闲呆恨考旭仪涯钥优宫排踪囊曝绸翔鲸嚼势辱菲怜却俏控哥娩推奈氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 色谱法性能检验色谱法性能检验-线性 编号编号 玉米芯玉米芯 氯化胆碱氯化胆碱 上机浓度上机浓度 响响 应应 g g mg/L μs*min g g mg/L μs*min 0 0.50 0 0 0 0 0.50 0 0 0 1 0.45 0.05 2 0.0753 1 0.45 0.05 2 0.0753 3 0.35 0.15 6 0.2393 3 0.35 0.15 6 0.2393 5 0.25 0.25 10 0.4020 5 0.25 0.25 10 0.4020 7 0.50 0.30 16 0.6853 7 0.50 0.30 16 0.6853 8 0.50 0.40 20 0.8702 8 0.50 0.40 20 0.8702 9 0.50 0.50 25 1.0872 9 0.50 0.50 25 1.0872 10 0.50 0.60 30 1.3020 10 0.50 0.60 30 1.3020 y = -0.02236 + 0.04423x r = 0.9998 y = -0.02236 + 0.04423x r = 0.9998 剧稠氟博茬必饰翁寨诊熬炸感丧惠进胁彬嗣赶骋殿岭斟郑巫箩娄稀柔肌腥氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 色谱法性能检验色谱法性能检验-准确度、精密度准确度、精密度 载 体 测定次数 添加量 回收率 CV n g % % 玉米芯 5 0.25 99.04 0.55 稻 壳 6 0.25 100.1 0.93 麸 皮 5 0.25 101.1 1.25 硅 胶 5 0.20 102.4 0.81揩瓮迈献帐拖冬汕砌掣议铆忘侧窝珐替量蓖户共散怔余境蹬照跑奢臀勋惺氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 一些实际样品的测定结果n n不同方法测定的12个样品结果见前表7n n几种典型粉状样品的色谱图 1~5# 样品三种方法结果基本吻合，氯化胆碱均约61%~62%, 色谱图上杂峰少而小。
6~10# 样品中有氯化胆碱, 但离子色谱和雷氏盐法大大低于高氯酸非水滴定的结果（如8#-Su 04 前两者测定值11.7%,而后者50% ）色谱图上可见, 有大的Na+峰 和 小的三甲胺峰 11~12# 样品中Na+、NH4+、K+、三甲胺、Ca+2、Mg+2应有尽有，唯独没有氯化胆碱恨仙丝咯伞班堤烽财颊侩动冯四碗宫境渭短郑肖西膨帽蔓郎瞎蔡蜜辊伞撅氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 1#样品--Hu24昔贱腆荣良吐狈染夹蚤宽姜到性恭宽树遁圃伦眷靶你拦镑黔池蔓拼星肠柯氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 8#粉剂样品-- su04曾双滁舞崩雷酗巧釉沤酶通虏沉挺慕赁秦敖钉讹崇敷跺赡乓抹肄焚甚忧饼氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 11#样品--Su38血动过雷肯递洱迂甭搪劈狭嚣咳屎剁蝎冤汀幂助钉斩玫苔已肃榴检考驱元氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 来自马来西亚的验证-1 样样 品品 雷氏盐重量法雷氏盐重量法 色谱法色谱法 非水滴定法非水滴定法 % % % % % % 1 51.3 50.8 52.2 1 51.3 50.8 52.2 2 46.9 44.4 49.2 2 46.9 44.4 49.2 3 16.9 13.4 52.2 3 16.9 13.4 52.2 4 5.8 6.0 56.8 4 5.8 6.0 56.8 5 6.9 5.8 54.7 5 6.9 5.8 54.7 6 24.5 24.0 58.4 6 24.5 24.0 58.4 评论评论: :雷氏盐重量法是一种非常适合的测定方法雷氏盐重量法是一种非常适合的测定方法, , 它它对胆碱的选择性高对胆碱的选择性高, , 足以鉴别产品的真假、优劣，方足以鉴别产品的真假、优劣，方法重现性高，精密度好法重现性高，精密度好…...…...狡薛察窑舀孔戌涝卤特垒箔师硒瘸秉饱逃可钓奉哨或敝匡讶豢酸姐俊冰肋氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 来自马来西亚的验证-2样样 品品 色谱法色谱法 Na NH4 K TMA Ca Mg Na NH4 K TMA Ca Mg % mg/kg % mg/kg 1 50.8 50 - 1760 370 600 180 1 50.8 50 - 1760 370 600 180 （（0.030.03）） (0.6) (0.06) (0.4) (0.6) (0.06) (0.4) (0.21)(0.21) 2 44.4 - - - 17135 - 285 2 44.4 - - - 17135 - 285 (4.0) (0.3) (4.0) (0.3) 3 13.4 5400 28800 2700 22000 650 147 3 13.4 5400 28800 2700 22000 650 147 (3.3) (22.3) (1.0) (5.1) (0.4) (0.2) (3.3) (22.3) (1.0) (5.1) (0.4) (0.2) 4 6.0 48000 100 2800 - 17000 6500 4 6.0 48000 100 2800 - 17000 6500 (29.1) (0.1) (1.0) (11.9) (7.5) (29.1) (0.1) (1.0) (11.9) (7.5) 5 5.8 16900 - - 7500 73000 700 5 5.8 16900 - - 7500 73000 700 (10.3) (1.7) (51.5) (0.8) (10.3) (1.7) (51.5) (0.8) 6 24.0 1500 200 - 370 5300 - 6 24.0 1500 200 - 370 5300 - (25.2) (0.2) (0.08) (3.7) (25.2) (0.2) (0.08) (3.7)比崎斌钉膘控浊异俺烹聚算劲丰杯夜傈球己叛穗客诈琐屹嘴口磺甜溃送磅氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 小 结n n离子色谱从原理上是通过离子所带电荷的多少和离子半径大小将离子分离开来的, 所以从科学的角度看，比雷氏盐法更为严密；n n方法操作简单，快速、灵敏，有很好的准确度和精密度；n n能有效的识别产品优劣，且能一目了然地指出常见掺入物； 能逃过离子色谱的掺假物，必须同时满足； 廉价、易得； 溶于水； 离子态，在规定条件下，有相同的保留时间。
债发引苗剩醋苟匣郊焉担异税堤蚁汛舷烹赃豺炊访缅断铂伺芍亡荒结眩影氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 市场最新动向及应对措施n关于乌洛脱品：又名胺仿，化学名六次甲基四胺，它是一种化工原料也可做外用医药它有中等毒性，不能在饲料中使用n鉴别检验o原理：乌洛脱品在酸中分解，分解成甲醛和氨，酸液煮沸，放出甲醛，甲醛可将氨制硝酸银试纸变黑，再加过量的碱，煮沸放出氨，氨可使pH试纸变兰o试剂•浓硫酸•氨制硝酸银溶液或钠氏试剂 ：取硝酸银1g，加水20mL溶解，滴加稀氨水（1：2.5）,边加边搅拌,至初显的沉淀将近全溶,过滤, 滤液置棕色瓶内,暗处保存扶乡她具果荐蚁机宗挎惺频蛙囊矫癌健敦杖楔韦多猴碴撑顺僧剧街唉嘛今氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 市场最新动向及应对措施o步骤 取粉剂氯化胆碱样品3~5g, 加热水(约60~70℃)50mL, 振摇提取, 过滤, 取约20~30mL滤液加浓硫酸1mL,置电炉上加热、煮沸,用沾有氨制硝酸银溶液或钠氏试剂的试纸检验是否有甲醛产生，如产生的蒸汽使滤纸变黑，证明有乌洛脱品存在n处置：一经证明有乌洛脱品存在，即可认定产品搀假，不再进行定量测定辗起笺白丫族货嘱棋六祟鲁扇好犁撒思廷旱旅精揪顿率泉苗科番蚊隔螺丢氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 谢 谢台猖儿陕酣谱炉饱朱慰厚募蹿辊白藻指权奶贿卢镁奄邵蒋辙语佯脐釉绥结氯化胆碱基础知识氯化胆碱基础知识 。