实训三细菌染色法 7/24/20241实训三细菌染色法 1.细菌染色法革兰染色法复染色法单染色法负染色：正染色死菌活菌：抗酸染色法芽孢染色法姬姆萨染色法荚膜染色法用美蓝或TTC等作活菌染色7/24/20242实训三细菌染色法 常用染料l碱性染料：带正电荷，如美蓝、结 晶紫、碱性复红等 l酸性染料：带负电荷，如伊红、酸 性复红或刚果红等酸性染料染色l中性染料：又称复合染料，如伊红 美兰、伊红天青等 2.染色原理：小、色差染色法：简单、革兰染色7/24/20243实训三细菌染色法 3.染色方法（1）单染色法：菌种－－枯草芽孢杆菌（观察芽孢）（2）革兰染色法：菌种－－金黄色葡萄球菌或大肠埃希菌（观察革兰染色性）7/24/20244实训三细菌染色法 涂片干燥固定结晶紫 1min （1）单染色步骤：枯草芽孢杆菌镜检水洗干燥记录结果教师评分l无菌操作l两环菌液l直径约1cml晾干l烘干l等全干l过外焰3次l目的l不烫l染液不干l全干再看l用油镜7/24/20245实训三细菌染色法 （2）经典染色法－－革兰染色法革兰阳性菌 G+（紫色）革兰阴性菌 G-（红色）革兰染色法由丹麦医生革兰于1884年创立。
7/24/20246实训三细菌染色法 涂片干燥固定结晶紫 1min 碘液 1min水洗95％乙醇 30s水洗 蕃红 2-3min水洗镜检水洗水洗干燥干燥革兰染色步骤:金黄色葡萄球菌或大肠埃希菌 7/24/20247实训三细菌染色法 7/24/20248实训三细菌染色法 G+（紫）（紫）×1000 G— （红）（红）×1000革兰染色意义:鉴别；致病性；药物选择7/24/20249实训三细菌染色法 革兰染色影响因素：l菌 龄—培养18-24小时的幼龄菌l涂片厚度—宜薄不宜厚l各试剂作用时间l脱色时间—关键步骤，一般30秒 过长— 假阴性 过短— 假阳性7/24/202410实训三细菌染色法 4.实训结果:2片/人,单染色30分;革兰染色50分l评分标准：①染色结果是否正确②找到目标③是否最佳目标④目标是否清晰⑤光线是否适宜菌名颜色革兰染色性放大倍数教师评分单染:枯草芽孢杆菌×7/24/202411实训三细菌染色法 5.思考题：1和26.实训总结：（实训结束后完成）分析实训过程的收获、存在的问题和解决的方法7/24/202412实训三细菌染色法 。