实验四 斐林试剂法测定果品蔬菜中还原糖含量一、实验目的：掌握园艺产品中糖的测定方法二、实验原理利用糖的还原性，与斐林试剂（氧化剂） 中的二价铜离子还原为一价铜，进行氧化还原反应，而进行测定非还原糖必须转化为还原糖，再进行测定斐林试剂中酒石酸钾钠铜是一种氧化剂，反应的终点可用次甲基蓝作指示剂，在碱性、沸腾环境下还原呈无色根据斐林试剂完全还原所需的还原糖量，计算出样品还原糖量三、试剂与材料1、斐林试剂甲： 加水溶解并定容至1000ml ；乙： 346g 酒石酸钾钠 +100gNaOH加水溶解并定容至1000ml ；2、 1%次甲基蓝， 1g 次甲基蓝加水溶解并定容至 100ml，棕色瓶保存；3、 %标准葡萄糖， 2g 105℃烘干到恒重的葡萄糖加水定容到 1000ml；4、碱式滴定管；5、电炉，各种玻璃器皿四、操作方法1、斐林试剂标定取甲液 5ml 加入 5ml 乙液中，置于 250ml 三角瓶中，加入水 10ml，从滴定管中加入 %的标准葡萄糖若干毫升（约 23ml）量控制在后滴定时消耗葡萄糖在－电炉上加热至沸，并保持微沸 2 分钟，加 2 滴 1%次甲基蓝溶液，趁沸以每两秒 1 滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，用 %标准葡萄糖滴定至蓝色消失，有红棕色沉淀，溶液清亮为终点止。
记录耗用的葡萄糖量为 V0，必须在 1min 内完成注意： 还原的次甲基蓝易被空气中的氧氧化， 恢复成原来的蓝色， 所以滴定过程中必须保持溶液成沸腾状态，并且避免滴定时间过长 ）2、样品滴定预备试验同上法取斐林试剂，加10ml样品液，摇匀于电炉上加热至沸，保持微沸2 分钟，加2滴 1%次甲基蓝，用%葡萄糖滴定至蓝色消失记录耗用的葡萄糖量为V13、样品滴定同上法吸取斐林试剂加10ml样品液 ( 预先稀释) ，补加（V0-V 1）ml水，并从滴定管中预先加入（V1-1 ） ml %葡萄糖，摇匀至电炉上加热至沸，保持2min微沸，加入2 滴1%次甲基蓝，继续用葡萄糖滴定至蓝色消失记录消耗的标准葡萄糖体积为 V 毫升五、结果计算还原糖含量 ( 以葡萄糖计 ) （ g/ml)= （Vo- V)×× 1/10 ×n式中： Vo-------- 斐林试剂标定值， mlV--------- 样品糖液测定值， ml标准葡萄糖溶液浓度， g/ml10-------- 样品糖液体积， mln--------- 样品稀释倍数六、思考题：1、还原糖测定方法有哪些2、总结本实验方法测定还原糖应注意哪些事项。