几种常用的染色方法几种常用的染色方法1 .美蓝染色法 在已干燥、固定好的抹片上，滴加适量的美蓝染色液，经1 —2min,水洗，沥去多余的水分，吸干或烘干，镜检2 .革兰氏染色法(1)在已干燥、固定好的抹片上，滴加草酸镂结晶紫染色液，经 1—2min,水 洗2)加革兰氏碘溶液于抹片上媒染，作用1—3min,水洗3)加95%酒精于抹片上脱色，约 30s---1min ,水洗4)加碱性复红液(或沙黄或稀释石炭酸复红液)复染 10---30S ,水洗5)吸干或烘干，镜检革兰氏阳性菌呈蓝紫色，革兰氏阴性菌呈红色3 .抗酸性染色法(1)在已干燥、固定好的抹片上，滴加较多量的石炭酸复红染色液，在玻片下 以酒精灯火焰缓缓加热，至发生蒸汽即止，维持微微发生蒸汽，经 3-5min,水 洗2)用3%盐酸酒精脱色，直至标本无色脱出为止，充分水洗3)用美蓝染色液复染约1min,水洗4)吸干或烘干，镜检抗酸性细菌呈红色，非抗酸性细菌呈蓝色以下方法也可：即在干燥、固定好的抹片上，滴加石炭酸复红染色1min,水洗，用1 %美蓝染色液复染约20s,水洗对光观察，标本务必全呈蓝色，在火焰上烘干、镜检抗酸性细菌呈红色，非抗酸性细菌和背景呈蓝色。
4 .瑞氏染色法(1)抹片自然干燥后，滴加瑞氏染色液于其上，为了避免很快变干，染色液可稍多加些，或看情况补充滴加，经1 —3min,加约与染液等量的中性蒸播水或PBS液，轻轻晃动玻片，使与染液混匀，约 3min左右，直接用水冲洗(不可先 将染液倾去)，吸干或烘干、镜检细菌染成蓝色，组织、细胞等物呈其它颜 色2)另一方法抹片自然干燥后，按涂抹点大小，盖上一块略大的清洁滤纸片，在其上轻轻滴加染色液，至略浸过滤纸，并看情况进行补滴，维持不使变 干；染色3--5min ,直接用水冲洗，吸干或烘干、镜检此法使染色液经滤纸过 滤，可大大避免沉渣粘附于抹片上影响镜检观察5 .姬姆萨染色法(1)于5ml新煮过的中性蒸播水中滴加 5- 10滴姬姆萨氏染色液原液，即稀释 成为常用的姬姆萨氏染色液2)抹片经甲醇固定干燥后，在其上滴加足量的染色液或将抹片浸入盛有染色 液的染色缸中，染色 30min,或者染色数小时至24h,取出水洗，吸干或烘干、 镜检细菌呈蓝青色，组织、细胞等呈其它颜色视野常呈淡红色6 .克利特氏荚膜染色法(1)染色液配制①美蓝溶液美蓝1g, 95%酒精10ml,蒸播水100ml将美蓝溶于酒精内，再加蒸播水混合。
②碱性复红溶液碱性复红0.03g , 95 %酒精1ml,蒸播水99ml o将碱性复红溶于酒精内，再加蒸福水混合2)染色法①涂片经火焰固定后，滴加美蓝溶液，将玻片至火焰上面加热至发生蒸汽为 止②水洗，以碱性复红溶液复染15-30s o③水洗后、吸干、镜检④染色后，菌体呈蓝色，荚膜呈红色7 .结晶紫福尔马林荚膜染色法(1)染色配制①结晶紫福尔马林染色液结晶紫10g,福尔马林溶液100ml混合使其完全溶解，隔夜过滤②碱性复红溶液见前：克利特氏荚膜染色法(2)染色法①涂片用结晶紫福尔马林染色液染色0.5-1mino②水洗后，以碱性复红染色液复染 15—30s③水洗、吸干、镜检④染色后，菌体呈深蓝色，荚膜呈淡红色8 .番红染色液荚膜染色法(1)染液配制番红(或沙黄)0.7g, 95%酒精20ml,蒸播水15ml将番红溶解于酒精内，再加蒸储水混合而成2)染色法①涂片滴加番红染色液，将玻片置火焰上加热至发生蒸气约5min②水洗、吸干、镜检③染色后，菌体呈暗红色，荚膜呈淡黄色9 .赫斯氏荚膜染色法(1)染色液配制①龙胆紫酒精溶液龙胆紫酒精饱和液5ml,蒸储水95ml②硫酸铜水溶液硫酸铜20g,蒸播水100ml。
2)染色法①涂片加热固定，将龙胆紫酒精溶液滴加于玻片将玻片置火焰上微加热至见蒸气并保持蒸气约20min②用硫酸铜液代替水冲洗染液，用吸水纸吸干、镜检③染色后，菌体呈深紫色，荚膜呈浅蓝色10 .安沙尼氏荚膜染色法(1)染色液配制①1 %结晶紫水溶液②20 %硫酸铜水溶液2)染色法①将涂片在空气中自然干燥②以1 %结晶紫水溶液染色2min (不必加热)，再以20%硫酸铜代水冲洗 染液③吸干、镜检④染色后，菌体呈紫色，荚膜呈淡紫色11 .苗列尔氏芽胞染色法(1)染色液配制①媒染液 5 %铭酸液(铭酸5ml,加蒸储水95ml)②染色液石炭酸复红液③脱色液 2 %硫酸液(纯硫酸2ml,加蒸储水98ml)④复染液碱性美蓝(2)染色法涂片，干燥，火焰固定，用媒染液染色 10min,充分水洗，用炭酸酸复红液加温染色(最好在标本上覆盖一张滤纸)2min,水洗，用脱色剂脱色10s,水洗，用美蓝液复染1min,水洗，干燥、镜检结果：芽抱呈红色，菌体呈蓝色1)染色液 5 %孔雀绿液，0.5 %沙黄液2)染色法涂片火焰固定，加5%孔雀绿液微微加温染色 30s—1min,至发生蒸气为止，待 冷后水洗，再加沙黄液复染 30s,水洗，干燥后镜检。
结果：芽抱呈绿色，菌体其它部分呈淡红色13 .李富逊氏鞭毛染色法(1)染色液配制5 %钾明研水溶液10ml, 20%鞍酸水溶液10ml, 1 %碱性复红酒杯精溶液10ml将上述三种溶液按次混合配成，如发生沉淀，用其上清液，本染液保存1周，复染液可用下列染液：美蓝 0.1g,硼砂0.5g,蒸播水100ml o(2)染色法①所用的载玻片必须十分清洁无油脂、无划痕可将玻片先浸于重铭酸钾消 洁液数大，用银子取出后以清水冲洗干净(冲洗时切勿用手捏玻片)，然后 斜插于木架上，置37度温箱中任其干燥后备用②菌液最好用10—16h的幼年肉汤培养物若取自琼脂培养基上的菌落， 则用接种环挑取少许，置蒸储水中制成轻度混浊的细菌悬液，切忌用接种环 多作搅动，以免损伤鞭毛③挑取肉汤培养物或细菌悬液一环，轻置于玻片一滴，玻片作倾斜放置， 使菌液沿玻片面顺向下流，自成一薄菌膜，置37度恒温箱内干燥④将上述染液滴加于涂片上，染10-15min,染色时间的长短随室温的高低而不同，如在冬季，可置于 37度温箱内染色⑤轻轻地水洗1—2min⑥在室温或37度温箱内任其干燥后作镜检，细菌菌体及鞭毛呈红色⑦如需复染色，则用上述美蓝硼砂复染液在水洗后，染色 10min,用水冲洗，干燥后作镜检。
菌体呈蓝色，鞭毛呈红色⑧良好的鞭毛染色涂片，应在显微镜的视野中见到大部分细菌菌体均附有 鞭毛14 .过碘酸锡夫氏真菌染色法(1)染色液配制甲液：1 %过碘酸液乙液：碱性复红0.1g ,95%乙醇5ml,蒸播水95ml丙液：亚硫酸氢锌1g,酒石酸0.5g,蒸播水100ml丁液：1.22 %饱和苦味酸液(2)染色法将标本在甲液中染10min,水洗后再用乙液染2-3min,置丙液中染30 — 40min,至玻片呈淡红色为合适，水洗 1min,再置于丁液中染3min充分水 洗至无黄色液体为止脱水、透明，树胶封周后镜检结果：真菌组织染色鲜红色15 .中国蓝真菌染色法(1)染色液纯石炭酸20ml,乳酸20ml,甘油40ml,蒸播水20ml将上述成分混合，加温溶解后加入中国蓝0.05g ,混合振荡即成2)染色法先将染色液加在载玻片上，将培养物被检样放在玻片上的染色液中，涂匀后 覆盖盖玻片，微加温后镜检16 .黑色素螺旋体染色法(1)染色液配制黑色素5g,蒸播水50mlo混合加热使其溶解，在溶液中加1 %福尔马林作防腐剂，临用前过滤2)染色法取被检物一滴，墨汁一滴混合后涂片，室温下放干燥后镜检结果：螺旋体无色发亮，背TvBr i o17.墨汁螺旋体染色法(1)染色液 印度墨汁5ml,蒸播水20ml,震荡混合而成。
2)染色法取被检物一滴，墨汁一滴混合后涂片，室温下放干燥后镜检结果：螺旋体无色发亮，背TvBr i o。