细胞融合是一个随机的物理过程在小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞混合细胞 悬浮液中，经融合后细胞将以多种形式出现如融合的脾细胞和瘤细胞、融合的 脾细胞和脾细胞、融合的瘤细胞和瘤细胞、未融合的脾细胞、未融合的瘤细胞以 及细胞的多聚体形式等正常的脾细胞在培养基中存活仅5〜7天，无需特别筛 选，细胞的多聚体形式也容易死去而未融合的瘤细胞则需进行特别的筛选去除细胞DNA合成一般有两条途径主途径是由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合 成DNA，叶酸作为重要的辅酶参与这一合成过程另一辅助途径是在次黄嘌吟和 胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经次黄嘌吟磷酸核糖转化酶(HGPRT)和胸腺嘧啶 核苷激酶(TK)的催化作用合成DNA细胞融合的选择培养基中有三种关键成分： 次黄嘌吟(hypoxa nt hine, H)、氨基蝶吟(aminop terin. A)和胸腺嘧啶核苷 (thymidine，T)，所以取三者的字头称为HAT培养基氨基蝶吟是叶酸的拮抗 剂，可阻断瘤细胞利用正常途径合成DNA，而融合所用的瘤细胞是经毒性培养基 选出的HGPRT —细胞株，所以不能在该培养基中生长只有融合细胞具有亲代双 方的遗传性能，可在HAT培养基中长期存活与繁殖。
需要说明的是，在现在流行的教辅资料中，通常都把氨基喋吟错写成氨基嘌 吟其实这两种物质完全不同氨基喋吟，商品名白血宁，能抑制DNA的复制， 曾作为治疗白血病的药物，因其毒副作用大，现已被氨甲喋吟取代而6-氨基 嘌吟就是腺嘌吟，是组成DNA和RNA的一种含氮碱基请诸位明察。