河北北方学院学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师( 或指导小组) 的指导下，由本人独立完成本学位论文研究所获的研究成果，其知识产权归河北北方学院所有河：l k ：l k 方学院有权对本学位论文进行交流、公开和使用导师签名：烈睁 l研究生签名：佘影往争经 矽乃年j 月乡u 日河北北方学院研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定本论文由本人独立撰写，文责自负导师签名：嘶研究生签名：佘律私刎乡年r 月如E t目录目录l I M I IIIIIIIH II I I I l l l l l l l l l ll L I I I IY 2 4 3 2 8 3 4中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5英文缩写⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l O研究论文开心散治疗C M S 抑郁模型大鼠的作用机制及活性成分T e n u i f o l i s i d eA 基于E R K 和P 1 3 K 通路介导的神经保护机制研究前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1 1日| J舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1 1材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1 3结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯’⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2 1附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2 7附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5 5讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5 7结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6 3参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6 4综述E R K 信号通路与抑郁症⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6 8致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8 1个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8 2中文摘要开心散治疗C M S 抑郁模型大鼠的作用机制及活性成分T e n u i f o l i s i d eA 基于E R K 和P 1 3 K 通路介导的神经保护机制研究摘要开心散始载于唐代孙思邈之《备急千金要方》，是治疗中医情志病的经典方，由人参、远志、茯苓、石菖蒲4 味药组成。
其方主治心气不定，五脏不足，忧愁悲伤不乐，忽忽喜忘，朝愈暮剧，或暮愈朝发等情志异常，类似于西医的抑郁，焦虑，学习记忆障碍等本课题组前期的研究发现，开心散中远志寡糖酯类是中药复方抗抑郁的主要活性部位，其活性单体T e n u i f o l i s i d e ·A ( T F S A ) 可通过增加新生细胞合成D N A 而减轻皮质酮对S H —S Y 5 Y 神经细胞的损伤，可明显增加慢性应激所致抑郁模型动物海马中磷酸化环磷腺苷反应元件结合蛋白( p h o s p h o —c A M Pr e s p o n s ee l e m e n tb i n d i n gp r o t e i n ，p - C R E B ) 军I ] 脑源性神经营养因子( b r a i n —d e r i v e dn e u r o t r o p h i cf a c t o r , B D N F ) 的表达量，并能调节慢性应激大鼠H P A 轴的功能，有明显的抗抑郁样作用目前，抑郁神经营养假说认为B D N F 分泌减少或与B D N F 相关的信号转导通路受损是抑郁症发生的关键环节之一。
B D N F 结合高亲和力受体酪氨酸激酶B ( t y r o s i n ek i n a s eB ，T r k B ) 后可激活细胞内多条信号通路，其中E R K 和P 1 3 K 信号通路是研究抗抑郁药物作用机制的重要靶标本研究包括两部分内容：首先，在经典的抑郁动物模型( 慢性温和应激模型) 上检测抑郁动物B D N F ／T r k B 信号系统关键节点蛋f 刍( T r k B ，E R K ，C R E B ，P 1 3 K ，A k t ，G S K 3 1 3 ，B D N F ) 的变化，以及采用经典古方开心散治疗抑郁后，对B D N F ／T r k B 信号通路关键节点蛋白的影响，探索开心散抗抑郁作用的分子机制其次，以开心散中的活性成分寡糖酯类单体化合物T F S A 为研究对象，建立皮质酮( C o r t i c o s t e r o n e ，C O R T ) 损伤体外神经胶质瘤细胞模型以及原代培养海马神经元模型，评价T F S A的神经保护作用，并根据抑郁症发病机制的新理论，采用化学拮抗剂阻断方法从B D N F ／T r k B 信号转导通路阐明T F S A 抗抑郁的细胞分子机中文摘要制。
在孤养结合慢性温和应激( C M S ) 大鼠抑郁模型上，作者观察抑郁动物脑中T r l i nT a n gD y n a s t y , i sac l a s s i c a lt r a d i t i o n a lC h i n e s em e d i c i n ep r e s c r i p t i o nt ot r e a tm e n t a ld i s o r d e r s ，w h i c hi sc o m p o s e do fR a d i xG i n s e n g , R a d i xp o l y g a l a ，P o r i a ，a n dR h i z o m aa c o r ut a t a r i n o w i i ．T h eh e r b a lr e c i p ec a nc u r es y m p t o m si n c l u d i n gr e s t l e s s n e s s ，m e l a n c h o l y , f o r g e t f u l n e s se t c ，w h i c ha ．r es i m i l a rt od e p r e s s i o n ，a n x i e t ya n dd i f f i c u l t yi ns t u d ya n dm e m o r i z a t i o ni nt h eW e s tm e d i c i n e ．O u re a r l yp h a r m a c o l o g i c a ls t u d i e ss h o wt h a to l i g o s ee s t e r s ，m a i na c t i v ec o m p o n e n t so fP o l y g a l at e n u i f o l i aw i l l d , a r ee s s e n t i a lt oa n t i d e p r e s s i o n ．T e n u i f o l i s i d eA ( T F S A ) ，a na c t i v eo l i g o s ee s t e rc o m p o n e n tf r o mP o l y g a l at e n u i f o l i aw i l l d , c a ne x e r tn e u r o p r o t e c t i v ee f f e c t so nS H —S Y 5 Yt h u sr e l i e v eC o r t —i n d u c e di n j u r yb yp r o m o t i n gD N As y n t h e s i so fn e w —b o r nc e l l s ，a n di n c r e a s et h ee x p r e s s i o no fp h o s p h o —c A M Pr e s p o n s ee l e m e n tb i n d i n gp r o t e i n ( p —C R E B ) a n db r a i n —d e r i v e dn e u r o t r o p h i cf a c t o r ( B D N F ) i nt h eh i p p o c a m p u so fd e p r e s s i o nr a t sm o d e lc a u s e db yc h r o n i cm i l ds t r e s s ( C M S ) ，a n dr e g u l a t eH P Aa x i sf u n c t i o ni nC M Sr a t s ．E v i d e n c e ss u g g e s tB D N Fh a sb e e ni m p l i c a t e di nt h ep a t h o p h y s i o l o g yo fd e p r e s s i o na n dp l a y sa ni m p o r t a n tr o l ei nt h em e c h a n i s mo fa n t i d e p r e s s i o na c t i o n ．T h eN e u r o t r o p h i cH y p o t h e s iso fA n t i d e p r e s s a n tA c t i o n ss t a t e st h a tB D N Fs e c r e t i o nr e d u c t i o no rt h es i g n a lt r a n s d u c t i o np a t h w a yi m p a i r m e n tr e l a t e dt oB D N F , a so n eo fk e yl i n k sl e a d st od e p r e s s i o na n da l s oi st h eh o ts p o ti na n t i d e p r e s s i o nr e s e a r c ha r o u n dt h ew o r l d ．B D N Fi sk n o w nt om e d i a t ei t sa c t i o nt h r o u g ha c t i v a t i n gv a r i o u ss i g n a l i n gt r a n s d u c t i o np a t h w a y sa f t e rb i n d i n gw i t ht y r o s i n ek i n a s er e c e p t o rB ( T r k B ) ，w h i c ha r e气I m p o r t a n tt h e r a p e u t i ct a r g e t sf o rm o o dd i s o r d e r s ．T h i ss t u d yc o n t a i n st w op a n s ．F i r s t ，t h ec l a s s i c a ld e p r e s s i o na n i m a lm o d e l ( c h r o n i cm i l ds t r e s sm o d e l ) i se s t a b l i s h e dt od e t e c tt h ec h a n g eo fk e vl i n kp r o t e i n so nt h eB D N F ／T r k Bp a t h w a yo fd e p r e s s a n ta n。