茶多酚、茶多糖的鉴定1.茶多酚的鉴定4．1 茶多酚结构鉴定的化学方法 在早期的结构研究中，化学法占主导地位茶 多酚由碳、氢、氧三种元素组成，故水分的含量将影 响元素的组成在进行元素分析前需充分脱水，然 后进行水解和醇解才可以获得茶多酚的有关结构信 息衍生物制备是茶多酚结构研究的常用方法通 常将茶多酚制成甲醚、乙酸酯、苄醚、三甲基硅醚、甲 基醚乙酸酯等重氮甲烷法和硫酸二甲酯一丙酮一 碳酸钾法常用于将茶多酚结构上大部分或全部的酚 羟基转化为甲醚，乙酸酐一吡啶法则使结构上全部 的酚羟基和醇羟基转化为乙酸酯；甲基醚进一步乙 酰化，生成甲基醚乙酸酯从甲氧基、乙酰基的数目 可以判断酚羟基及醇羟基的数目，其衍生化过程如下［35］：、>T-(OCHJx(OH)7— T-(OCnj)x(OCUCH；\4. 2茶多酚结构鉴定的波谱法 进入2世纪的60—70年代，由于波谱法提供 的信息丰富、准确，且仅需微量样品，已几乎取代了 化学法特别是其中的N MR谱和MS谱法4.2.1 紫外光谱儿茶素类化合物均有两个吸收带，即为酚类化合物的E2带和B带，分别在210 nm左右和 270〜280 m处(可参考标准紫外光谱图)［。
4.2.2 红外光谱 儿茶素类化合物酯型有羰基峰吸收(1 680〜1 690 cm ) ；在 3 200 cm 附近有羟基峰吸收，若羟 基缔合较强则吸收峰较宽且较强；在1 600 cm 和 1 510 cm 附近有苯环骨架振动吸收(可参考标准图 谱的指纹区)［圳4. 2. 3 NMR谱 这是研究茶多酚结构的强有力工具，是所有波 谱鉴定方法中提供信息最丰富的，样品还可回收仅用NMR谱即可完成90%的茶多酚的结构鉴定工作1) 氢谱 茶多酚中儿茶素结构单元黄烷的氢谱化学位移 值如图1所示［35］：图1 黄烷的化学位移示意图(2) 碳谱 在茶多酚的质子全去偶谱中，每个碳都有尖锐 的单峰，反映了分子骨架的结构特点茶多酚中儿 茶素结构单元黄烷的碳谱化学位移值如图2所 示［35］：图 2 黄烷的碳谱图(Fig 2. The" CNMR spectrum of tlavane(3) 二维谱 用二维谱进行结构鉴定的关键是找到有特征的 初始化学位移值，然后依次连接各个交叉点，定出系统具体事例可参考文献136 ］和［37］4.2.4 质谱 质谱主要用于茶多酚相对分子质量的测定，其中包括EI. MS、FAB. MS、FD. M和JD MS。
有时离子 碎片峰也能提供重要信息FAB. MS常用于极性强、 热不稳定、相对分子质量较大、难以气化的样品的测 定，特别是高分辨FAB. MS可以给出准确的相对分 子质量，配合计算机检索可以直接给出分子式在 实际应用中，负FAB. MS比正FAB. MS更适用于茶多 酚结构的测定，因为负FAB. MS比正FAB. MS产生的 分子离子峰强许多对相对分子质量大、不稳定和 难以气化的茶多酚，常需选择适当的离子源或制备 成衍生物后进行测定例如，将茶多酚制成甲基醚 乙酸酯，然后可用EI. MS, FD. MS测定其衍生物的相 对分子质量，进而计算出茶多酚的分子式同时，裂 解的碎片峰也能提供结构解析的重要信息在质谱 中，茶多酚主体儿茶素类主要是发生黄烷C环的逆 Diels. Alder 反应裂解 L35］2.茶多糖的鉴定在大多数文献中，茶叶多糖的纯度鉴定一般都是采用高效凝胶液相色谱和示差检测器检测的方法也有利用茶叶多糖蛋白在2 8 0 nm处有吸收，通过紫外 检测器来检测茶叶多糖的纯度。