植物生理学实验报告--

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1、烯效唑(S-3307)对小麦幼苗生长发育的影响摘要: 此次实验是采用烯效唑的不同浓度浸种小麦种子,以此来研究小麦的幼苗形态和生理指标。在这次实验中共设0、10、30和50mgL的烯效唑浸种4个处理,对小麦种子的呼吸强度、幼苗根系活力、幼苗叶绿素含量、丙二醛含量等指标进行了测定。实验结果表明:不同浓度烯效唑浸种对小麦幼芽呼吸强度有一定的抑制作用;烯效唑能增大根/冠比;提高根系活力;促进叶绿素含量的增加;但是丙二醛含量降低。烯效唑浸种能使小麦矮化壮苗、增强植物抗性。关鍵词: 小麦 烯效唑 生长 形态指标 生理指标前言:烯效唑是一种高效、低毒的生长延缓剂, 具有活性高、低毒、低残留等特点,广泛适用于

2、农作物、蔬菜、果树、草坪等 11-12。烯效唑能减缓细胞的分裂和伸长,抑制节间生长,幼苗高度明显降低,茎粗和分蘖数增加,增强根系活力,提高叶绿素含量,延缓作物衰老,促进花芽形成,根冠比增加和提高光合速率等生理效应。种子经过浸种法处理可以充分吸收水分,利于催芽播种;可以使种子吸收一定量的农药,既可以杀灭种子携带的有害生物,又可以防止幼苗遭受病虫的危害,浸种可提高秧苗根系活力和根冠比,增加叶绿素的含量,从而保证健壮苗的形成。近些年对S3307大量实验研究表明,S3307浸种可使小麦幼苗健壮、叶片增加、叶色浓绿、根系发达和分蘖数增多,促进成穗,并有明显的增产效果41、材料与方法1.1 材料与试剂:经

3、不同烯效唑浓度处理的小麦种子,90%S-3307,0.1%消毒液HgCl21.2 方法:1.2.1 种子的前处理精选小麦种子,用0.1%HgCl2消毒10min,用清水冲洗干净消毒液,分别用0、10、30、50mg/ml的多效唑溶液浸种20小时,倒掉浸泡液,将种子放在培养盘中,在250C-280C的恒温箱中催芽三天,待长出幼芽后,测定幼芽的呼吸强度。1.2.2 幼苗栽植与培养(水培法) 选取在不同浓度S-3307浸泡的发芽种子,栽植于塑料杯的纱网上,种植2杯,每杯种植30株,并标上记号,二周后用于测定幼苗的形态指标和生理指标。 2、测定项目2.1 发芽小麦呼吸速率的测定(小筐子瓶法) 52.1

4、.1 空白值的测定:用移液管移取20mlBa(OH)2溶液在广口瓶中并振荡,使瓶中的CO2充分吸收,滴两滴酚酞。用浓度为1/44的草酸滴定,边滴便摇动广口瓶,使其充分显色。2.1.2 样品值的测定:用移液管移取20mlBa(OH)2溶液在广口瓶中并振荡,使瓶中的CO2充分吸收。取不同浓度发芽小麦各30株,放进小网里里并用挂于小钩上放进广口瓶作用30分钟,其间不断晃动。同前滴定。2.2 幼苗形态指标的测定2.2.1 小麦株高、根长与发根数的测定:每小组分别取0、10、30、50 mgml多效唑处理的小麦幼苗10株,用直尺测量小麦幼苗的株高及所有根的最长根长,计算各组的平均株高、根长及发根数。2.

5、2.2小麦幼苗根/冠比的测定:用上面测定后的植株,除去其种子部分,把根、冠分开分别放在铝盒内,标上记号。然后在105oC杀青20min,在80下烘干5小时至恒重,待冷却后分别测定地上部分和根的干物质重量,计算根/冠比值。2.3 幼苗根系活力的测定(TTC法) 62.3.1 取长约0.5cm的根尖50根。2.3.2 将小瓶用磷缓冲液润洗后,用移液管移取混合液(2ml磷酸+2ml0.4%TTC)在小瓶内,并将根尖放入其内,摇匀。2.3.3 在37水浴中暗反应1小时,取出根尖,用吸水纸将根尖吸干。2.3.4根尖的色素提取:将研钵用乙酸乙酯润洗后,加入3ml乙酸乙酯,研碎。将上清液倒入试管中,用乙酸乙

6、酯少量多次润研钵后倒入试管中。最后用乙酸乙酯定容至10ml。2.3.5 比色测定:乙酸乙酯作参比液。在485nm下测定样品吸光光度值。2.3.6 制定标准曲线。(全班一组)2.3.6.1 用1mg/mlTTC溶液配成20ug/ml的TPF(红色)溶液50ml,将20ug/mlTPF配成0、2、4、6、8、10、12、14ug/ml溶液各10ml,然后进行比色测定,在485nm下测定OD值,绘制标准曲线。2.4 幼苗叶片中叶绿素含量测定(分光光度计法) 72.4.1 取长4cm、宽0.3cm的叶片5片。2.4.2 色素提取:将叶片放入用80%乙醇润洗后的研钵中,加入石英砂、CaCO3少量,加入8

7、0%乙醇少量多次研钵,用漏斗过滤到25ml容量瓶中,用乙醇定容。2.4.3 比色测定:80%乙醇润作参比液。分别在663nm、645nm下测定吸光光度值。2.4.4 计算chl a、b含量及总量。2.5 丙二醛(MDA)含量测定(TBA法)82.5.1 叶片处理:将剩下的叶片剪成0.5cm长的小段混匀,称取1g加入研钵中。加入2ml 10%TCA研磨成匀浆状。再加入3ml 10%TCA混匀,放入离心管,在3000转/分下离心10min,上清液位提取液。2.5.2 显色测定:取三支试管:2.5.2.1 参比液(一大组一支)3ml10%TCA+3ml0.5%TBA2.5.2.2 叶样液 3ml样液

8、+3ml0.5%TBA2.5.2.3 根样液 3ml样液+3ml0.5%TBA将叶样液与根样液在沸腾水浴中加热10分钟,待试管冒小泡时开始计时。冷却后,在分光光度计上波长为450、532、600nm下测定OD值。3、结果分析3.1 呼吸强度测定表1 不同浓度S-3307对发芽小麦呼吸强度的影响项目0mg/L10mg/L 30mg/L50mg/L测定值(ml)16.5417.3018.5717.18CO2(mg)呼吸强度(CO2mg/株h)0.2000.0130.1500.0100.1200.0081.4700.098 项目0mg/L10mg/L 30mg/L50mg/L空白值(ml)16.74

9、17.4518.6918.65 呼吸强度(CO2 mg株.h)=(V1V2)44/株.t实验数据表明,S-3307在030mg/L浓度范围内会随浓度增加而抑制小麦种子的呼吸强度。但是在50mg/L时,呼吸强度明显上升,说明S-3307这种生长调节剂,经过其浸泡的种子在萌发期间呼吸强度受抑制,只是处理的浓度必须在50mg/L才能抑制器呼吸强度。3.2 幼苗叶片中叶绿素含量的测定 表2 不同浓度烯效唑浸种对小麦幼苗叶绿素含量的影响处理浓度mg/LA(Chla) A(Chlb)Chla的含量(mgdm-2)Chlb含量(mgdm-2)Chl总含量(mgdm-2)00.4720.15411.622.7

10、414.36100.4690.20311.778.1819.95300.6630.18521.679.0930.76500.2490.0936.062.038.09按Arnon公式计算有:Chla含量(mg/dm2)=(12.7OD6632.69OD645)V(S10-21000)Chlb含量(mg/dm2)=(22.9OD6454.68OD663)V(S10-21000)Chl总含量(mg/dm2)=Chlb+Chla实验结果表明,经过不同浓度S-3307处理的小麦,能够使叶片中叶绿体色素有不同程度的增加,且浓度为30 mg/L的S-3307对小麦叶片叶绿体色素含量增加最明显,超过30mg/

11、L后有下降趋势,因此烯效唑浓度在30mg/L浸种小麦效果最佳。所以S-3307可以增加小麦叶片的叶绿素含量,从而提高光合作用的效率,促进有机物合成,增强储能,有利于增产增收。3.3 幼苗根系活力的测定 表3 不同浓度烯效唑浸种对小麦幼苗根系活力的影响处理浓度mg/L吸光度值根系活力(gTPF/株h)00.0580.369 100.123 0.783300.4853.089500.1450.923标准曲线方程:Y=0.0314x R2=0.9784 根系活力(ug TPF株.h)=CV株t结果表明,S-3307在一定浓度范围内促进根系活力,其中浓度为30 mg/L的S-3307处理过的小麦,根系

12、活力最强,在50 mg/L的浓度处理的小麦根系活力开始降低,所以适宜浓度的S-3307处理小麦种子后,能够增强小麦幼苗根系活力,增强根系吸收水分、矿质元素的能力,获得充足的营养,有利于小麦茁壮成长,提高成活率,在农业生产上能够提高产量。3.4 幼苗形态指标的测定表4 不同浓度多效唑浸种后幼苗的平均根长、平均苗高、发根数和根/冠比处理浓度mg/L 平均茎高/cm 平均根长/cm 发根数 根/冠值0(CK) 2.37 18.23 6 0.52 10 1.34 19.87 8 0.9930 0.98 20.95 9 1.4750 1.18 18.81 9 1.00 实验数据表明, S-3307在一定

13、浓度范围内,对小麦幼苗的根生长具有促进作用,促进了分蘖;而对苗的生长具有抑制作用,减缓植株伸长。与对照相比,在S-3307浓度为30 mg/L时,根的平均长度最长,而大于30 mg/L 时,根长又有所减小。S-3307对根的生长有促进作用,当处理为30mg/L时,对根的生长有非常明显的促进作用,根长达到20.95,根冠比值最大,超过其浓度根冠比值降低。 所以经过适宜浓度的S-3307浸种处理的小麦种子能够防止小麦徒长,能促进小麦根系的生长,使小麦植株发育矮壮,增加其抗倒伏能力。3.5幼苗叶片中MDA含量的测定表5 不同浓度烯效唑浸种对小麦幼苗MDA含量的影响根:处理浓度OD450OD532 O

14、D60000.3930.2220.1211030500.2410.5330.4070.1610.3330.2210.0920.2100.130叶:处理浓度OD450OD532 OD60001.4910.7880.5991030501.2891.1200.1950.4620.3450.4610.2670.1860.237根处理浓度mg/LMDA的浓度(molL-1)MDA的含量(molg-2FW)00.43130.3410-2100.31110.2410-2300.49490.3910-2500.26950.2110-2叶处理浓度mg/LMDA的浓度(molL-1)MDA的含量(molg-2FW)00.38410.3010-2100.33590.2610-23

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