自身抗体检测的临床应用

《自身抗体检测的临床应用》由会员分享，可在线阅读，更多相关《自身抗体检测的临床应用（32页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。

1、自身抗体检测的临床应用,自身免疫病的“病谱”,器官特异性 非器官特异性 桥本甲状腺炎 类天疱疮 自身免疫性肾小球肾炎 系统性红斑狼疮 原发性粘液水肿 恶性贫血 肺肾出血综合征 干燥综合征 甲状腺机能亢进 自身免疫性萎缩性胃炎 绝经过早（少数病例） 类风湿关节炎 Addisino病 自身免疫性肝炎 男性不育（少数病例） 硬皮病 1型糖尿病 原发性胆汁性肝硬化 溃疡性结肠炎 多发性肌炎/皮肌炎 重症肌无力 原发性硬化性胆管炎 克隆氏病 混合性结缔组织病 多发性硬化症 自身免疫性溶血性贫血 交感性眼炎 系统性血管炎 脱髓鞘疾病 特发性血小板减少性紫癜 晶状体源性葡萄膜炎 抗磷脂综合征 寻常天疱疮 特

2、发性粒细胞减少症 药物性狼疮,自身抗体,是指抗自身细胞内、细胞表面和细 胞外抗原的免疫球蛋白 是自身免疫和自身免疫病重要特征之一 某些自身免疫病伴有特征性的自身抗体(谱) 判断疾病的活动性 预测疾病的预后 研究发病机制,自身抗体的分类,抗核抗体 抗胞浆成分抗体：如抗中性粒细胞抗体，抗线粒体抗体等 抗胞膜成分抗体：如抗心磷脂抗体 抗细胞外抗原的抗体：如类风湿因子,抗核抗体,指抗细胞核成分（DNA，RNA，蛋白质和酶）的抗体。ANA存在一个谱。 ANA新概念：抗核酸（Nucleic acid）和核蛋白（Nucleoprotein）抗体的总称,ANA的粗筛,人类喉癌上皮细胞 (HEp-2 cells

3、)和灵长类肝脏的 联合生物薄片 ：检测抗核抗体的标准基质。 间接免疫荧光法（IFT）:HEp-2细胞/灵长类肝脏冰冻组织切片：完整的抗原谱 (细胞核、细胞浆) ；ANA检测的金标准，具有最高的敏感性和特异性；质量控制容易；除ANA外，还可获得一些对临床医生有用的其他信息 (如ANCA)。 ELISA:用高度纯化的抗原来筛查ANAs：抗原谱比IIF窄；对所用的靶抗原具有很高的敏感性和特异性；操作简便、快速,ANA分类,抗DNA（dsDNA,ssDNA) 抗组蛋白（Histone) 抗非组蛋白（Non-histone,Extractable Nuclear Antigen,ENA） 抗核仁（Nuc

4、leolus）,抗dsDNA：绿蝇短膜虫,EUROIMMUN,抗双链DNA抗体 （短膜虫免疫荧光法 1:5）,HEp-2细胞/灵长类肝脏：抗组蛋白抗体,EUROIMMUN,抗组蛋白抗体 （酶联免疫吸附法X2SD),系统性红斑狼疮 50% 其他结缔组织病 23-30% 服异烟肼12月以上 53% 服苯妥因钠6月以上 18% 服他巴唑6个月 0 活动期SLE 90.2%阳性,抗H1 H2A H2B H2A-H2B H3 H4 系统性红斑狼疮 + + + + + + 长期服异烟肼 + + + + + + 类风湿关节炎 + + + + + + SLE以IgG型抗组蛋白抗体为主，而长期服烟肼及RA病人以

5、IgM型为主,抗组蛋白抗体 （免疫印迹法）,抗ENA抗体谱,Sm：Smith， SLE标记性抗体（20%-30%） RNP: u1 RNP或nRNP Nuclear ，Ribonucleoprotein， MCTD 95 -100%（高滴度） SSA: RO Sjogrens syndrome A， PSS 60 -75%，其它CTD SSB: La, Ha, Sjogrens syndrome B， PSS 10 -40%，其它CTD Jo-1: John， PM/DM 25%，标记性抗体 ScL-70: Scleroderma， SSc 25 -75%, 标记性抗体 抗rRNP抗体： SL

6、E特异性抗体（10%-30%）,抗nRNP在多种结缔组织病中存在，高滴度有利于MCTD的诊断。nRNP抗原与rRNP不同，前者是含尿嘧啶的核糖核蛋白，主要在核内，而rRNP是主要在胞浆内的磷酸蛋白，抗rRNP抗体与SLE 有关，尤其有精神神经症状的SLE阳性率较高,抗核仁抗体 （底物HEP-2细胞，免疫光法）,病例数 阳性率 正常人 100 0 系统性红斑狼疮 90 6 类风湿关节炎 25 15 硬皮病 75 39 多发性肌炎 50 10 干燥综合症 60 9 非结缔组织病 100 0,常见结缔组织病的抗核抗体的阳性率,ANA dsDNA Histone Sm n RNP SSA SSB Sc

7、L-70 Jo-1 着丝点 核仁 SLE 90 （62） 50 （25）40 39 10 0 0 0 6 SS 50 15 30 0 14 （75）（59） 0 0 0 9 SD 75 5 27 0 12 19 5 ( 30) 0 （20）（39） PM/DM 50 13 0 5 0 0 0 (20) 0 10 RA 23 10 23 0 0 20 5 0 0 0 15+,+有指端硬化 ANA 1:40（+），抗dsDNA30%(或1：5）（+）,抗中性粒细胞胞浆抗体,ANCA是一组针对中性粒细胞许多胞浆抗原 所产生的自身抗体，其靶抗原实际为中性粒细胞胞浆中的颗粒蛋白酶。 1982年 Davi

8、es等首先报告节段性坏死性肾小球肾炎存在ANCA。 1985年 Van der Wonder等发现C-ANCA是Wegner 肉芽肿 （WG)）特异性抗体。 ANCA荧光染色模型：固定剂作用人为形成 胞浆型: C-ANCA (cytoplasmic pattern) 核周型: P-ANCA (perinuclear pattern) 非典型型: X-ANCA (atypical pattern),ANCA两种荧光染色型,核周型ANCA（pANCA） 胞浆型ANCA（cANCA）,已知的抗中性粒细胞胞浆抗体靶抗原谱 蛋白酶 3（proteinase 3, PR3） 溶酶体（lysozyme, L

9、YS） 髓过氧化物酶 （myeloperoxidase, MPO） 天青杀素（azurocidin） 人白细胞弹性蛋白酶（human leukocyte elastase, HLE）防御素（defensin） 乳铁蛋白（lacloferrin, LF） 烯醇化酶（-enolase） 组织蛋白酶G（cathepsin G, Cath G） -葡萄糖醛酸酶（-glucuronidase） 杀菌/通透性增高蛋白（bactericidal/permeability increasing protein, BPI） 人溶酶体相关膜蛋白2 （human lysosomal-associated membr

10、ane protein 2, H-LAMP 2）,PR3-ANCA /cANCA临床意义 PR3-ANCA在临床上与WG密切相关。cANCA诊断WG的特异性大于90%，外加PR3-ANCA可超过95% 敏感性取决于疾病活动性和病期阶段，在初发不活动的WG中，阳性率只有50%，而活动性典型的WG，几乎100%阳性。 虽然PR3-ANCA /cANCA阳性在WG活动期有很高的价值，但在其它原发性血管炎中也可被检测到，仍然存在25%的阳性机会，如MPA、RPGN、PAN等 PR3-ANCA在临床上另一重要应用价值在于该抗体滴度与病情活动一致，在WG等原发性血管炎患者，常被作为判断疗效、估计复发的指标

11、，从而指导临床治疗,MPO -ANCA临床意义 主要与MPA、RPGN、CSS相关，其他疾病:PAN、抗GBM病、WG、SLE、RA、 DIL、Felty综合征等 MPO-ANCA与疾病相关性不及PR3-ANCA与WG相关性紧密。MPO-ANCA阳性强烈提示原发性血管炎 MPO-ANCA偶见于 SLE，可能与慢性炎症反应有关，如动脉炎，浆膜炎和C反应蛋白增高等 MPO-ANCA与RA的关节外损害及血管损害有相关性 MPO-ANCA与病情活动相关，也可用于判断疗效、估计复发和指导疗效,与ANCA自身抗体谱相关的疾病 相关疾病 IIF染色模型 特异性靶抗原 韦格纳氏肉芽肿 c, p(少见) PR3

12、(90%),MPO(10%) 显微型多动脉炎 c, p PR3(45%),MPO(45%) 坏死性肾小球肾炎 p, c(少见) PR3(25%),MPO(65%) Charg-Straus综合征 p, c(少见) PR3(10%),MPO(60%) 结节性多动脉炎 p, c(均少见) PR3( 5%),MPO(15%) 抗GBM病 P MPO(30%) 系统性红斑狼疮 P/ a LF,HEL,MPO(少见) 类风湿性关节炎 p, a LF,MPO(少见) 药物性狼疮 P/ a MPO(常见),LF,HEL Felty综合征 p, a LF,MPO(少见) 溃疡性结肠炎 P/ a（50-80%）

13、 LF,Cath G,LYS,其它 克罗恩病 p/a（10-20%） LF,Cath G,LYS,其它 原发性硬化性胆管炎 P/ a（26-87%） LF,Cath G,其它 原发性胆汁性肝硬化 P/ a（10%） LF,Cath G,LYS,HEL,其它 自身免疫性肝炎 P/ a（16-83% LF ,Cath G,LYS,HEL,其它 囊性纤维化 P/ a BPI（91%） 其它急性/慢性感染 c / a PR3,MPO,BPI,其它 （HIV、阿米巴等）,抗磷脂抗体谱及其临床意义,aCL（抗心脂抗体） SLE，原发性抗磷脂综合征 感染、肿瘤 抗2GP1(载脂蛋白) 是aCL与磷脂结合的辅助因 子 LA（狼疮抗凝物） SLE、感染、肿瘤 抗磷脂酰丝氨酸 抗磷脂酸,磷脂抗体是诊断磷脂抗体综合征的必备条件之一，但并非有 磷脂抗体患者均属该综合征，必需同时有临床症状（血栓、 血小板减少、反复自发性流产）,抗心磷脂（Cardiolipin）抗体,以牛心肌的乙醇浸出液提取酸性磷脂，用放射免疫或ELISA测定。50%SLE（患者阳性）。其他自身免疫性疾病，如RA、原发性血小板减少性紫癜及感染（尤在病毒）和药物因素均可阳性（+）。 高滴度IgG抗心脂抗体的SLE 40%发生动、静脉栓