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1、利用PMSG和LRH-A3诱导间情期秋田犬发情效果的研究摘要为了探索提高母犬利用年限和终身产仔数。以不同剂量和给药次数的PMSG与LRH-A3组合的方法，对乏情期母犬进行外源激素诱导发情。第一组为皮下注射PMSG 1500IU条，仅注射一次；第二组为皮下注射PMSG 500IU条，少量多次，总剂量1500IU。当两组中的母犬综合征状显示最佳配种时同时注射一次LRH-A3 25ug条；第三组为空白对照组不注射任何药物，为母犬正常状态。结果，第二组采用少量多次皮下注射PMSG（500IU）进行诱导发情的发情率为37.5%，比第一组，一次注射PMSG(1500IU)的发情率75%，高37.5%（P0
2、.05）。而第一组的受胎率为33.33%，第二组的受胎率是50%，两者相差16.67%（P0.05）。试验证明，在外源性激素PMSG诱导母犬发情排卵时，在配种的同时应用LRH-A3可以促进卵泡发育和排卵，增加可用胚胎数和提高受胎率。关键词：孕马血清,促性腺激素释放激素，秋田犬，诱导发情 Utilization of estrus Estrus Akita between PMSG and LRH-A3 inducedAbstractIn order to explore the use of age and improve lifelong bitches litter size. In PM
3、SG and methods LRH-A3 combinations of different dosage and administration times of anestrus bitches exogenous hormones induce estrus. The first group was injected subcutaneously PMSG 1500IU / bar, injected only once; the second group was injected subcutaneously PMSG 500IU / bar, a few times, a total
4、 dose of 1500IU. When two of the best breeding bitch syndrome-like display simultaneously injected once LRH-A3 25ug / bar; the third group was the control group were not injected any drug for bitches normal state. As a result, the second group received a small amount of multiple subcutaneous PMSG (5
5、00IU) for induction of estrus estrus was 37.5%, compared with the first group, the first injection of PMSG (1500IU) 75% of estrus, high 37.5% (P 0.05) . The first group pregnancy rate was 33.33%, the second group pregnancy rate is 50%, a difference of 16.67% (P 0.05). Tests show that exogenous hormo
6、ne PMSG inducing ovulation during estrus bitches in breeding at the same time apply LRH-A3 can promote follicular development and ovulation, increase the number of available embryos and increase conception rate.Keywords: pregnant mare serum gonadotropin-releasing hormone, Akitas, induce estrus目 录前 言
7、11 材料与方法21.1 材料21.1.1 试验时间和地点21.1.2 试验动物21.1.3 试验仪器与药品21.2 方法21.2.1 试验犬的饲养管理21.2.2 激素处理方案及妊娠确定条件21.2.3 外部观察法、试情法及最佳配种时间确定31.2.4 阴道涂片镜检及最佳配种时间确定32 结果与分析42.1 注射一次PMSG母犬发情状况结果42.2 多次皮下注射PMSG诱导母犬发情状况结果52.3 采用PMSG不同注射方法和剂量诱导母犬发情状况结果63 讨论63.1 犬发情不稳定、不明显、配不上原因分析63.2 外源性激素在体内转化作用机理73.3 处理方法的分析84 结论8参考文献9致谢1
8、1涟江为区内地表水的主要排水通道，隧道设计标高高于最低排水基准面，隧道区山脊内沟谷多为季节性冲沟，主要由大气降水补给，水量小，受季节影响明显，地表水不发育，地表水对隧道施工及运营无影响。前 言随着社会经济的飞速发展和居民生活水平的不断提高，饲养宠物的人士越来越多。据初步统计，2015年全国在册宠物数量已达1亿多只，中国宠物行业的年总产值达到150亿元人民币1。现今中国已成为世界上宠物产品需求增长最快的国家之一。犬是人们最早驯化的动物之一，居我国传统养殖业“猪、马、牛、羊、犬”中六畜之一。犬从远古时代与人一道来到世上，共渡历史长河，漫漫长生，是人类忠实的伴侣和朋友。犬是理想的试验动物，广泛用于营
9、养、病理、生理、药理、试验外科和遗传学的研究，加上狗皮在国际市场上畅销，狗肉又有很高的营养价值，因此“养狗热”一度出现2。现代人由于社会节奏加快、生活、工作和学习压力增大，加上独生子女现象、社会老龄化与城市居住单元化等因素影响使得人际交往逐渐减少，而豢养宠物有助于缓解紧张状态对人们精神生活的冲击，有利于人们的身心健康与感情释放。并能创造性地做出许多惊人的事迹。因此，加强犬的繁殖育种工作，以提供适应各种用途的优良犬种愈加重要。我国宠物文化的产生与发展可以概括为三句话，即：悠久的历史、落后的现实、兴盛的未来。由于种种原因，多年来缺乏科学选种、育种和饲养管理，优良纯系减少，品种退化迫在眉睫。而且，目
10、前国内有关犬繁殖的资料甚少，尤其犬的繁殖生理特点与其他动物比较差异甚大，且犬的品种较多，人们喜欢共识名犬100多种。不同品种犬的体型，用途差异很大，各种犬的生理指标也不尽相同。一般认为，秋田犬在家庭单独饲养犬正常情况下每年发情两次，多在春（35月份）、秋（911月份）两季。群养犬的发情与季节无关，通常间隔6个月出现二次发情，因犬个体不同，发情表现和持续时间略有差异3。秋田犬初次发情时间平均为1012月龄，初配在1.5岁以后，体重在成年体重的75%以上较好，错过一次发情、配种就意味着要等半年，严重地提高了劳动报酬。犬的生殖活动受着内分泌系统的精确调节，而这一调节贯穿生殖的全过程。由犬体内激素不平
11、衡导致激素分泌紊乱母犬不发情和公犬性欲低下，而引起生育功能低下或不育等问题；严重影响了养犬业的发展阻碍了其繁殖速度，对犬的社会经济价值的开发利用造成了重大影响。近几年来，国内外学着已有对犬诱导发情处理的研究报道，但收到效果不尽人意。研究报道使用激素常为PG、HCG、E、PMSG和GnRH较多为单独使用，效果不甚理想4,5。本试验为了促进犬的发情，排卵和提高受胎率，采用PMSG+LRH-A3 处理方法,观察其对秋田犬发情的影响。1 材料与方法1.1 材料1.1.1 试验时间和地点 试验地点河南省*有限公司，试验时间为2016年03月20日到05月5日。1.1.2 试验动物 日系秋田犬由河南省*业
12、有限公司提供23岁成年经产母犬21条体质量2026kg，健康公犬2条在试情和配种时使用，共计23条犬；试验犬只经驱虫，三联疫苗和狂犬疫苗免疫，生殖机能正常。1.1.3 试验仪器与药品 显微镜（深圳市赛克数码科技开发有限公司，型号SK2009HS）；B超仪（广州索诺星信息科技有限公司，型号SS1000）；一次性2.5ml、5ml注射器（江西洪达医疗器械集团有限公司）；注射用促性腺激素释放激素(LRH-A3，赤峰博恩药业有限公司， 批号兽药字（2007）)，25ug/支；注射用孕马血清促性腺激素(杭州动物药品厂，批号兽药字(2012)1000IU/支；生盐水（山东康宁药业有限公司500ml/瓶）；
13、棉签（石家庄康尔泰医疗器械有限公司20cm20只/包）；载玻片（姜堰市夏南生化器械厂50片/盒）；瑞氏-姬姆萨复合染色液（珠海贝索生物技术有限公司A、B液一瓶50ml，A染色液B 是稀释液）。以上试验药品均采购于郑州桑园饲料兽药批发市场。1.2 方法1.2.1 试验犬的饲养管理本次试验在犬的间情期进行，根据养殖场的档案记录随机抽取21条非繁殖期经产母犬和2条公犬组成，共计23条。单笼饲养于河南省*有限公司的饲养室内，专人负责。随机对母犬进行编号即，1号21号，同理公犬也随机分为A公犬和B公犬，以便减少公犬自身因素而带来的误差。所有犬只自由饮水，母犬日粮为自制犬粮，公犬日粮是优卡成犬犬粮。一日饲
14、喂两次即，早06点和17点各一次；每日对犬只仔细观察3次即07点、13点和18点各一次。1.2.2 激素处理方案及妊娠确定条件对已编号的母犬按顺序分为三组：即18号为第一组，皮下注射PMSG 1500IU条，仅注射一次；916号为第二组，皮下注射PMSG 500 IU条,24h次，连用3天，总剂量1500IU（当一组和二组母犬综合征状显示最佳配种时同时注射LRH-A3 25ug条，一次）；第三组1721号为空白对照组不注射任何药物，为母犬不正常状态；A公犬和B公犬不注射任何激素，参与察情配种。妊娠诊断：经过配种后30天的母犬仰卧或站姿用5.0MHz的探头纵切和横切扫描，子宫位于膀胱背侧，降结肠
15、腹侧探查卵巢时应在肾脏后部和邻近区域6。正常未怀孕的母犬子宫一般不现像。这样就能更加精确的判断犬所处的生理状态，指导生产实践提高繁殖效率。 1.2.3 外部观察法、试情法及最佳配种时间确定外部观察法、试情法判定方法:母犬公犬调情，公犬阴茎接触母犬外阴时，母犬尾根倒向一侧，四肢叉开踏地，接受爬跨。如试验员手指轻拍母犬外阴表现有规律地收缩或插入阴道内，母犬不反抗，则为接受交配阳性7,8。对两条公犬的其中一条有反应即为阳性，此反应若在晚上出现，当天就算进入发情期。拒绝公犬交配之日为发情结束，各种发情症状逐渐减弱、消失。每天对犬只观察3次即07点、13点和18点各一次，观察犬的一般状态、外阴部变化、阴道前庭粘液性状及阴道分泌物变化等，当阴户漏出粘液有血时，用公犬试情，以确定容许与否。试情法是根据母犬在性欲上对公犬的反映情况或实施压背法，视其“静立反射”程度来判断其发情程度。把A、B公犬栓在舍外，牵母犬过去进行试情，每天07点和18点各一次。试验所用公犬均有交配经验、健康且性欲旺盛。表1 雌犬最佳配种时间临床行为表现最佳配种时间行为表现（1）首次对公犬表现性趣35天后（2
