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1、与耐药性相关的细菌的酶,陶冬梅,耐药机制,1灭活酶或钝化酶. 2.抗生素的渗透障碍 3.靶位的改变 4.其它：拮抗物,细菌在环境中产生多种酶，与细菌的致病性、侵袭力、耐药性等有关。,内酰胺酶 钝化酶 乙酰转移酶 酯化酶,内酰胺酶,内酰胺酶是一群酶，已知就有170种以上，是细菌对内酰胺类抗生素耐药主要作用机制。 内酰胺酶通过其作用位点Ser-OH对内酰胺环上的羧基碳发生亲核攻击使环打开，形成由酯键连接的酰酶复合物中间体，然后迅速水解酰酶中间体的酯键使酶再生，释放已失活的内酰胺部分， 细菌因此产生耐药性，其水解效率是细菌耐药性的主要决定因子。,内酰胺酶,较常用的是根据一种Ambler分类法分成 A
2、、B、C、D四类， 另一常用的是Bush功能分类法。主要的酶有头孢菌素酶、青霉素酶、广谱酶、超广谱酶、金属酶等。 G球菌产生内酰胺酶一直较少发生进化， G杆菌主要产生超广谱内酰胺酶（ESBLs），尤以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌多见。 另一类重要的头孢菌素酶为几乎所有的肠杆菌科（除了沙门菌属和克雷伯菌属的某些种）和铜绿假单胞菌产生，称为AmpC酶。自然状态下细菌产生此酶的量很少，但某些细菌如阴沟肠杆菌、弗氏枸橼酸杆菌等在内酰胺类抗生素的作用下可大量诱导产生，导致细菌对除碳青酶希类之外的所有内酰胺类抗生素耐药。,钝化酶分类,氨基糖苷类钝化酶，是质粒介导，由G菌及部分G菌产生，已知的钝化
3、酶有三类：乙酰转移酶，核苷转移酶，磷酸转移酶。 氯霉素乙酰转移酶 灭活氯霉素 红霉素酶和其他灭活酶,超光谱内酰胺酶（ESBLs）的检测结果分析,室内质量控制： 阴性质控：ATCC 25922 不产ESBL的标准菌株大肠埃希菌， 阳性质控： ATCC 700603 产头孢噻肟型ESBL的标准菌株肺炎克雷伯菌。,超光谱内酰胺酶（ESBLs）的检测结果分析,执行标准： 根据NCCLS对抗菌药物敏感性试验K-B法. 表型确证试验 本实验室采用Oxoid药敏纸片 头孢他啶，头孢他啶棒酸； 头孢噻肟，头孢噻肟棒酸 现将2007年以来本实验室对临床送检标本培养出的136例大肠埃希菌、102例克雷伯菌属的ES
4、BLs表型确定结果分别进行统计 。,超光谱内酰胺酶（ESBLs）的检测结果分析,表1 136 例 大 肠 埃 希 菌 ESBLs 表 型 确 定 结 果 统 计 表 标本类型 总例数 产ESBLs酶例数 ESBLs 阳 性 率 血液 18 6 0.33 尿液 67 5 0.07 痰 51 24 0.4 合计 136 35 0.26 结果显示，血培养标本大肠埃希菌产ESBLs菌株约占33%；尿液标本大肠埃希菌产ESBLs菌株约占7%；痰标本大肠埃希菌产ESBLs菌株约占47%,超光谱内酰胺酶（ESBLs）的检测结果分析,表2 35 例 大 肠 埃 希 菌 ESBLs 阳 性 表 型 确 定 结
5、果 统 计 表 标本类型 头孢他啶型 头孢噻肟型 ESBLs 阳 性 率 头孢他啶型 头孢噻肟型 血液 2 * 6 0.20 0.86 尿液 2 5 0.25 0.83 痰 4 20 0.16 0.84 合计 6 29 0.17 0.83 附：* 表示头孢他啶、头孢噻肟同时阳性的表型。 表2表明头孢噻肟型为大肠埃希菌产ESBLs的主要表型，约占83，头孢他啶型占17，该统计结果符合相关文献报导的在中国境内产ESBLs菌株大多为头孢噻肟型的报道。35例中检测出一例很少见的，头孢他啶和头孢噻肟同时阳性的表型。通过联系临床了解到，该例标本来自一位患慢性疾病的老年病人，可能与病人的机体免疫状态及长期使
6、用广谱抗生素的既往史密切相关。,超光谱内酰胺酶（ESBLs）的检测结果分析,表3 102 例 克 雷 伯 菌 属 ESBLs 检 测 结 果 统 计 表 肺 炎 克 雷 伯 菌 产 酸 克 雷 伯 菌 标本类型 例数 头孢 头孢 ESBLs 例数 头孢 头孢 ESBLs 他啶型 噻肟型 阳性率 他啶型 噻肟型 阳性率 血液 2 - - - - - - - 尿液 6 - 1 0.17 2 - - - 痰 87 6 29 0.40 5 - 1 0.20 合计 95 6 30 0.38 7 - 1 0.14 表3表明，临床标本肺炎克雷伯菌产ESBLs菌株占38%，其中痰标本占了40，痰标本克雷伯菌属中产酸克雷伯菌产ESBLs菌株约占20， 总的克雷伯菌属为39，为痰中主要产ESBLs菌属，而头孢他啶型与头孢噻肟型的比例约为16，和大肠埃希菌ESBLs表型比例分配基本相同。,超光谱内酰胺酶（ESBLs）的检测结果分析,由于国内医疗界对使用抗生素的控制不是很严格，加之内酰胺酶的不断进化发展，ESBLs的阳性率将随着临床不规范的用药越来越高, 应该引起大家警醒。,与耐药性相关的细菌的酶,THANK YOU !,
