《吉林省伊通满族自治县高中生物 第一章 基因工程 1.2 基因工程的基本操作程序(二)课件 新人教版选修3》由会员分享,可在线阅读,更多相关《吉林省伊通满族自治县高中生物 第一章 基因工程 1.2 基因工程的基本操作程序(二)课件 新人教版选修3(18页珍藏版)》请在金锄头文库上搜索。
1、1.2 基因工程的基本操作程序 (二),1.2 基因工程的基本操作程序,第三步:将目的基因导入受体细胞(转化 transformation),转化:目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内稳定存在和表达的过程。,1.2 基因工程的基本操作程序,第三步:将目的基因导入受体细胞(转化 transformation),1、将目的基因导入植物细胞,(1)导入细胞的种类,(2)导入方法,农杆菌转化(最常用),体细胞,双子叶植物和裸子植物,其他植物可用酚类物质处理后用农杆菌转化,1.2 基因工程的基本操作程序,第三步:将目的基因导入受体细胞(转化 transformation),1、将目的基因导入植物细胞
2、,(2)导入方法,基因枪法 花粉管通道法,1.2 基因工程的基本操作程序,第三步:将目的基因导入受体细胞(转化 transformation),2、将目的基因导入动物细胞,(1)导入细胞的种类,(2)导入方法,显微注射法,最好是受精卵细胞,1.2 基因工程的基本操作程序,第三步:将目的基因导入受体细胞(转化 transformation),3、将目的基因导入微生物细胞,(1)微生物作为受体的优势,(2)导入方法,Ca2+处理,繁殖速度快,可大量生产 生产成本低,胰岛素原的人工合成,1.2 基因工程的基本操作程序,第三步:将目的基因导入受体细胞(转化 transformation),3、将目的基
3、因导入微生物细胞,(3)原核生物作为受体细胞产生的蛋白质没有空间结构,需要在体外加工。,1.2 基因工程的基本操作程序,第三步:将目的基因导入受体细胞(转化 transformation),1.2 基因工程的基本操作程序,第三步:将目的基因导入受体细胞(转化 transformation),1.2 基因工程的基本操作程序,第四步:目的基因的检测与鉴定,抗虫鉴定、抗病鉴定活性鉴定等,抗原抗体杂交法,分子杂交法,DNA分子杂交法,DNA分子,限制片段,限制性酶切割,琼脂糖电泳,转移至硝酸纤维素膜上,与放射性标记DNA探针杂交,放射自显影,带有DNA片段的凝胶,凝胶,滤膜,用缓冲液转移DNA,吸附有DNA片段的膜,DNA分子杂交,32P-抗体,裂解细胞,表达蛋白转移到硝酸纤维素膜上,与放射性抗体杂交的蛋白质斑点,转化到E.Coli,细菌启动子,插入的真核DNA片段,放射自显影,重组体,抗原-抗体杂交,