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1、第二章 白细胞检验,本章目录,第一节 白细胞生理概要 第二节 白细胞计数 第三节 白细胞分类计数 第四节 中性粒细胞常见的形态变化 第五节 白细胞计数和白细胞分类计数的临床意义 第六节 嗜酸性粒细胞计数 第七节 红斑狼疮细胞检验,返回,下一页,第一节 白细胞生理概要,外周血常见白细胞的种类与功能 白细胞的寿命和归宿,返回,上一页,下一页,学习目标,1.叙述白细胞显微镜计数法的原理、试剂组成、注意事项 2.学会白细胞显微镜计数法的操作方法 3.准确识别外周血常见正常和异常白细胞形态 4.学会白细胞分类计数方法,返回,上一页,下一页,外周血常见白细胞的种类与功能,(一)外周血常见白细胞的种类 1.
2、白细胞的形态： 无色有核，球形，直径7m25m。 2.白细胞的种类（形态分类）： 三类五种-,返回,上一页,下一页,中性粒细胞（N） 粒细胞 嗜酸粒细胞（E） 嗜碱粒细胞（B） 白细胞 淋巴细胞 （L） 单核细胞 （M）,返回,上一页,下一页,白细胞的发育,起源于骨髓多能造血干细胞。,返回,上一页,下一页,白细胞的功能,中性粒细胞：具有较强的运动能力和吞噬活性。胞内酶有复杂的杀菌系统。 嗜酸粒细胞：可作变形运动，吞噬抗原抗体复合物，灭活组织胺减轻过敏反应。 嗜碱粒细胞：与IgE具有较强的结合力，脱粒释放组胺导致速发性变态反应。 淋巴细胞：参与体液免疫和细胞免疫。 单核细胞：有强大的吞噬功能，传
3、递抗原信息。,返回,上一页,下一页,白细胞的寿命,粒细胞： 1015天 淋巴细胞：数天20余年 单核细胞：数月,返回,上一页,下一页,白细胞的归宿,衰老的粒细胞被单核-吞噬细胞系统清除，也有一部分从口腔、气管、消化道和泌尿生殖道排出。 B淋巴细胞经抗原刺激后分化为浆细胞，产生特异性抗体，参与体液免疫。T淋巴细胞经抗原致敏后，可产生多种免疫活性物质，参与细胞免疫。 粒-单核系祖细胞在骨髓经分化成原始单核细胞后发育为成熟单核细胞，释放入血液。,返回,上一页,下一页,返回,上一页,下一页,学习目标,1.叙述白细胞显微镜计数法的原理、试剂组成、注意事项。 2.学会白细胞显微镜计数法的操作方法 3.准确
4、识别外周血常见正常和异常白细胞形态。 4.学会白细胞分类计数方法。,返回,上一页,下一页,显微镜计数法,【原理】 用白细胞计数稀释液，将血液稀释一定倍数并破坏红细胞后，混匀充入计数池中，在显微镜下计数一定容积内的白细胞数，经换算即可求得每升血液中白细胞的总数。,返回,上一页,下一页,显微镜计数法,【器材】 1.显微镜（目镜10；物镜10） 2.微量吸管（Hb吸管） 传统的Hb吸管玻璃上有10l和20l（误差1%）两个刻度。使用前应经严格校正。橡胶乳头提供负压,返回,上一页,下一页,Hb吸管的消毒清洗,每次使用后，应经2/过氧乙酸浸泡2消毒。然后依次用蒸馏水冲洗，0.95/乙醇除脂脱水，乙醚干燥
5、后，才能再次使用。注意清洗的顺序不可颠倒。,返回,上一页,下一页,显微镜计数法,3.计数池,返回,上一页,下一页,显微镜计数法,3.计数池 各池刻划有92面积的刻度，分为 9个大方格，每格长、宽各1，面积12，体积为 0.1，容量 0.1l。,返回,上一页,下一页,计数白细胞的四个大方格,四个角的大方格都用单线划分为16个中方格，为计数密度小的（白）细胞用。 容量： 0.1l/大方格,返回,上一页,下一页,计数红细胞的五个中方格,中央的一个大方格，用双线划分为25个中方格，每个中方格又被单线划分为16个小方格，共有400个小方格，供计数密度大的（红）细胞用。 容量： 0.1l/大方格 0.00
6、4l/中方格,返回,上一页,下一页,.盖玻片,特制的计数池专用盖片，要求玻璃表面平整光滑，有一定重量，不被细胞悬液所抬浮，厚度应为0.40.7。盖玻片两面的平整度是：0.002以内， 大小: 24mm20mm0.6mm。,返回,上一页,下一页,显微镜计数法,【试剂】 白细胞稀释液 冰乙酸 2.0 10g亚甲蓝（或结晶紫）数滴 蒸馏水加至100,返回,上一页,下一页,稀释液中各组分的作用,蒸馏水 低渗溶解红细胞， 乙 酸 可加速红细胞溶解，同时乙酸能固定核蛋白，使白细胞核显现，便于辨认。 染 料 使核略着色，且易与红细胞稀释液 区别。,返回,上一页,下一页,显微镜计数法,【操作】 取小试管支，加
7、入白细胞稀释液0.38。 用微量吸管准确吸取外周血20ul。 擦去管尖外部余血，立即将吸管插入盛有稀释液的试管底部，轻轻将血放出，并吸取上清液漱洗吸管次次，注意每次不能冲浑稀释液，最后用手振摇试管混匀。,返回,上一页,下一页,操作,.充液 将计数板和盖玻片擦净，盖片盖在计数池上，用毛细滴管或玻璃棒取已混匀的细胞悬液1滴，充入计数池与盖玻片间的缝隙中，静置2min3min，待白细胞下沉。,返回,上一页,下一页,镜下白细胞形态,似成熟蚕卵，中央核深染，胞质色淡。,返回,上一页,下一页,显微镜计数法,5.计数方法 用低倍镜依次计数四角的四个大格内的白细胞数。对于压线的白细胞，应采取数上不数下；数左不
8、数右（左、上计入，右、下弃去）的原则，保证计数域的一致性，使计数准确。,返回,上一页,下一页,让我们共同计数下列大格的细胞,返回,上一页,下一页,让我们再试一次：,返回,上一页,下一页,显微镜计数法,【计算 】 四个大格白细胞数 白细胞数 10 20 106 4 式中： 得每个大格（即 0.1l）内白细胞平均数 10 因一大格容积为0.1l，换算为1l 20 血液稀释倍数。 106 将1l换算为 1。,返回,上一页,下一页,稀释倍数的确认,稀释倍数（溶质溶剂）/溶质 注意：体积单位需一致后方能运算。,返回,上一页,下一页,请您练习,求以下操作的稀释倍数： 稀释液（ml）血液（l）稀释倍数 0.
9、38 20 0.48 20 0.39 10 2.00 10,20,25,40,201,返回,上一页,下一页,请您练习,按常规取血稀释后数得4个大格共有白细胞280个，求白细胞计数结果？,解：WBC280/41020106,14109/L,返回,上一页,下一页,请您练习,取血40ul加入稀释液0.36ml，镜下计数了8个大格共有白细胞320个，求其白细胞计数结果？,答案：稀释倍数（36040）40,WBC 32081010106,10, 4109/L,返回,上一页,下一页,白细胞计数计数误差,1.技术误差: 由于操作不正确和仪器不精确造成的误差。 2.固有误差: 因每次白细胞分布不可能完全相同所
10、造成的偏差属固有误差，也称计数域误差。,返回,上一页,下一页,常见技术误差：,血液凝固 稀释倍数不准 充液不当 识别错误 器材不符合要求,返回,上一页,下一页,固有误差(计数域误差),根据统计学研究，白细胞在计数池内的随机分布符合泊森分布。 从计算公式中可以看出计数范围越大，计数的细胞越多，计数域误差越小。,返回,上一页,下一页,注意事项,1、稀释液要过滤使用，试管、计数板等均须清洁。 2、计数池内细胞分布要均匀。 总数在参考范围内，每个大方格间白细胞数不得相差8个以上，两次重复计数误差不得超过10%，否则要重新充液计数。 3、遇白细胞数太低者、白细胞数太高者稀释倍数应灵活掌握。 4、当外周血
11、出现大量有核红细胞时应予以校正除去。,返回,上一页,下一页,总 结,1.白细胞的种类按形态分类包括： 三类五种 2.显微镜法计数原理： 用稀乙酸溶液将血液稀释并破坏红细胞后，混匀充入计数池中，在镜下计数一定容积中的白细胞数，经换算求得每升血液中的白细胞总数。,返回,上一页,下一页,总 结,3. 计数池的结构：分为 9个大方格，每个大方格长、宽各1，面积 2，体积为 0.1，容量 0.1l。 4. 稀释液中各组分的作用为：蒸馏水低渗溶解红细胞；乙酸加速红细胞溶解同时固定核蛋白，使白细胞核显现，便于辨认；染料使核略着色，且易与红细胞稀释液区别。,返回,上一页,下一页,总 结,5. Hb吸管的清洗顺
12、序是：蒸馏水冲洗95%乙醇脱水除脂 乙醚干燥 6.镜下计数时要遵循一定顺序，对于压线的白细胞，应采取:数上不数下；数左不数右（左、上计入，右、下弃去）的原则计数。,返回,上一页,下一页,总 结,计算公式 四个大格白细胞数 白细胞数1020106,4,返回,上一页,下一页,第三节 白细胞分类计数,一、外周血常见白细胞的形态 二、白细胞分类计数,返回,上一页,下一页,学习目标,1. 叙述外周血常见白细胞的形态 .分析白细胞在血涂片上的分布，正确选择分类计数区域 .述说显微镜白细胞分类计数法,返回,上一页,下一页,一、外周血常见白细胞的形态,经瑞特染色后外周血中常见各种成熟白细胞形态如下：,返回,上
13、一页,下一页,（一）中性粒细胞,返回,上一页,下一页,胞体呈圆形，直径1015，约为红细胞的倍。胞质量丰富染粉红色，含大量细小均匀的紫红色中性颗粒。细胞核染色质粗糙不匀，排列紧密成小块状染深紫红色。根据核的形状分为中性杆状（带状）核粒细胞和中性分叶核（多节核）粒细胞两种。,（一）中性粒细胞,中性分叶核粒细胞的核分叶叶或更多叶，以叶叶为常见叶间以核丝或核桥相连。分叶的大小、形状和排列各不相同。,返回,上一页,下一页,中性分叶核粒细胞的核,返回,上一页,下一页,杆状核和分叶核的划分标准,胞核完全分离或核间以丝状相连，或核叶重叠，使核的轮廓看不清，划分为分叶核粒细胞。胞核细长多样，弯曲盘绕，可呈C型
14、、S型、V型或不规则型，划分为杆状核粒细胞。为不完全成熟细胞。,返回,上一页,下一页,杆状核粒细胞的核形,返回,上一页,下一页,（二）嗜酸粒细胞,圆形，直径13m15m，略大于中性粒细胞。胞核常分两叶，似眼镜形。也可见叶叶者。核染色质粗。染紫红色。胞质中充满粗大、均匀、整齐、紧密排列的橘红色嗜酸性颗粒。偶见少许淡蓝或无色胞质。嗜酸粒细胞较易碎，破碎后颗粒多散在胞核附近。,返回,上一页,下一页,（三）嗜碱粒细胞,圆形，直径10m1m ，较其他粒细胞小。胞核常被颗粒遮盖，核染色质粗着色较浅，分叶常不明显形态不规则，清楚时可见叶叶。胞质量较少，常呈淡红或淡紫红色，含少量粗大，但大小不均、排列不规则的
15、紫黑色嗜碱性颗粒，常盖于核上。嗜碱性颗粒易溶于水，故染色时易被溶解消失，而呈淡红色空穴状。,返回,上一页,下一页,（四）单核细胞,呈不规则的圆或椭 圆形，为外周血中最大 的细胞直径15m 25m 。细胞核大呈不 规则圆形、肾形、马蹄形， 或不规则分叶有时折叠卷曲。染色质细致疏松如网状，染淡紫红色。胞质量丰富染淡蓝、灰蓝色不等，常呈毛玻璃样半透明。胞质内含有大量细小灰尘样紫红色嗜天青颗粒。核凹陷处胞质染色较淡偶见无颗粒胞质是伪足样伸出。,返回,上一页,下一页,（五）淋巴细胞,按其个体可有大小之分。 小淋巴细胞：呈圆形，直径6m 10m 。胞核圆形。偶见 凹陷，染色质粗糙紧密，排列 均匀，无空隙。常有隐约成块现象，核周常有染色质浓集，核膜明显，有时可见潜在核仁。 胞质量极少，仅在核的一侧出现一线天蓝或深 蓝色，有的甚至完全不见。胞质中一般无颗粒 存在，偶见几颗大小不等的紫红色嗜天青颗粒。,返回,上一页,下一页,大淋巴细胞：,体积较大直径10m 15m ，胞核染色质比小淋巴细胞疏松，胞质量丰富，呈透明的淡蓝色，常有少量大小不等的嗜天青颗粒。,返回,上一页,下一页,五种白细胞鉴别要点,返回,上一页,下一页,点评,三种粒细胞主要依据胞质中颗粒形态和染色性质去
