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1、淋病奈瑟菌检测操作规程(一)涂片镜检1、检测目的查找标本中白细胞内的革兰阴性双球菌,规范淋病奈瑟氏菌的涂片检测,保证检测结果的准确性。2、标本采集生殖道分泌物,无菌留取。3、玻片的制备(1)取洁净载玻片,在有磨砂的一面写上编号(化验单尾号或标本号)(2)在生物安全柜内涂片,自然干燥后进行革兰染色及显微镜检查。4、染色(1)涂片经火焰固定后,加结晶紫染液染1分钟,流水缓慢冲去染液。(2)吸水纸吸干玻片水分后加碘液媒染1分钟,水洗。(3)加脱色液,复染30秒,水洗。(4)加复染液,复染30秒,水洗(5)玻片完全干燥后,显微镜镜检。5、镜检与结果报告阳性:革兰染色显微镜下为革兰阴性双球菌,呈双肾形成
2、对排列。结果报告:细胞内可见革兰阴性双球菌。6、参考范围:阴性7、质量控制(1)每次染色时应同时用已知的革兰阳性菌和阴性菌进行对照试验,以检查染色液的质量。(2)结晶紫与草酸铵溶液混合不能保存太久,如有沉淀则应重新配制。(3)采样时,女性拭子插入子宫颈3cm处取样,避免阴道分泌物污染拭子。(4)对于不能及时送检的标本应常温保存,不可以冷藏。8、生物安全防护(1)操作前应做好自身防护(穿工作服、戴口罩、胶皮手套)。(2)在生物安全柜中进行涂片操作。(3)所有不再需要的标本,培养物和其他生物性材料,应置于专用和有生物危害标记、用于处置危险废弃物的防漏容器内。(4)试验操作工作面应以500ppm“84”消毒液擦试,再用紫外线灭菌灯照射2小时。(5)所有弃置的实验室生物标本,培养物和被污染的废弃物,应通过高压消毒或其他无害化处理。