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1、正常人G显带核型分析,代课老师：五且昆,Company Logo,实验目的,熟悉人类染色体G显带的带型特征 初步掌握G显带核型分析的基本方法,Company Logo,G显带（G banding）是最常见的显带技术，它是将染色体标本用碱、胰蛋白酶或其它盐溶液处理后，再用Giemsa染液染色，在普通显微镜下，可见深浅相间的带纹，称G带（G band）。G显带方法简便，带纹清晰，染色体标本可以长期保存，因此被广泛用于染色体病的诊断和研究。,Company Logo,关于G显带的机理目前有多种说法，较常见的有: 1. Lee等（1973）认为染色体上与DNA结合疏松的组蛋白易被胰蛋白酶分解掉，染色后
2、这些区段成为浅带，而那些组蛋白和DNA结合牢固的区段可被染成深带。,Company Logo,2. 有人认为，染色体显带现象是染色体本身存在着带的结构。比如用相差显微镜观察未染色的染色体时，就能直接观察到带的存在。用特殊方法处理后，再用染料染色，则带更加清楚，随显带方法不同，显出来的带特点也不一样，说明带的出现又与染料特异结合有关。,Company Logo,3. 一般认为，易着色的阳性带为含有AT多的染色体节段，相反，含GC多的染色体段则不易着色。总的来说，G显带的机理还未搞清。,Company Logo,染色体的类型： 按着丝粒在染色体长轴的位置，分成： 中央着丝粒染色体：1/25/8 亚
3、中着丝粒染色体：5/87/8 近端着丝粒染色体：7/8至末端,Company Logo,正常人类G显带染色体的核型特征,定义： 核型（Karyotype）又称染色体组型，是指将人体体细胞内的全部染色体，按其不同的大小、形态、特征排列起来所构成的图像。 核型分析（ Karyotype analysis） 制备核型图像并对其进行观察分析以确定正常与否的全过程。,Company Logo,根据染色体大小和着丝粒位置不同分为AG七组，X列入C组，Y列入G组，并决定将副缢痕和随体作为识别染色体的辅助指标。 核型的表示方法： 正常男性核型：46，XY 正常女性核型：46，XX,Company Logo,染
4、色体中期分裂相照片的剪贴分析,1】用剪刀将每一条染色体小心剪下； 2】将剪下的染色体按照Denver体制的特征进行分组、排号【、组（形态最大）、组（近端着丝粒染色体）、组（较小，中央、亚中央着丝粒染色体）组】，按顺序从长到短排列； 3】粘贴时短臂向上，长臂向下,如两条染色体长度相等,短臂较长者排前，每组的着丝粒在一条横线上； 4】分析结果，记录下核型。,Company Logo,实验用品,解剖剪、培养皿、胶水、镊子等 人类染色体G显带照片,Company Logo,实验内容与方法,（一）认识正常人体细胞各染色体 显带的带型特征 （二）正常人体细胞染色体数目观察 （三）正常人显带核型分析,Com
5、pany Logo,染色体观察及核型分析,Company Logo,染色体观察及核型分析,一秃二蛇三蝶飞，四象鞭炮五黑腰。 六号短臂小白脸，七上八下九苗条。 十号长臂三条带，十一低来十二高。 十三十四十五号，三个一样一二一。 十六长臂近点深，十七远端带脚镣。 十八人小肚皮大，十九中间一点腰。 二十头重脚底轻，二十一象葫芦瓢。 二十二一点Y黑腰，X pq 一肩挑。,Company Logo,A：1，2，3对染色体，体积大，易于区别，有中央着丝粒。第2对的着丝粒略偏离中央。无随体，1号常见次缢痕。 B：4，5两对，体积大，有亚中部着丝粒，无随体，彼此不易区分。 C：包括612对常染色体和X染色体，
6、中等大小，为亚中部着丝粒染色体。第6对的着丝粒靠近中央，X染色体大小接近介于第6，7对之间。第9对染色体长臂上有一次缢痕，第11对染色体的短臂较长，第12对染色体的短臂较短。,D：13，14，15中等大小，有近端着丝粒，有随体，彼此之间不易区分。 E：16，17，18较小，第16对有中央着丝粒，长臂上有次缢痕，易于区别。第17，18对有亚中部着丝粒，难以区分，后者的短臂较短。 F：19，20体积小，有中部着丝粒，无随体，彼此之间难以区分。 G：21，22常染色体和Y染色体。第21，22对染色体体积最小，近端部着丝粒，有随体，长臂常呈分叉状，彼此不易区分。Y染色体较前两对略大，近端部着丝粒，无随
7、体，长臂常常彼此平行。,Company Logo,中央着丝粒染色体，短臂有两条深带；长臂远侧段有4条深带,一号染色体,一秃,Company Logo,亚中着丝粒染色体 短臂可见4条深带，中段的两条深带稍靠近。 长臂有58条深带,二号染色体,二蛇,Company Logo,三号染色体,中央着丝粒染色体 3号染色体着丝粒染色浓。在短臂和长臂的中短各有一条明显而宽阔的浅带，呈蝴蝶结状,三蝶飞,Company Logo,四号染色体,亚中着丝粒染色体 短臂：可见1-2条深带 长臂： 可见均匀分布的4条深带,四象鞭炮,Company Logo,五号染色体,亚中着丝粒染色体 长臂上有四条深染带，其中间三条深
8、带常集中在一起,五黑腰,Company Logo,六号染色体,亚中着丝粒染色体 短臂有两条深带，在近侧、远侧深带之间有一条宽阔而明显的浅带，比拟为“小白脸”,六号短臂小白脸,Company Logo,七号染色体,亚中着丝粒染色体 长臂上有三条深染带，短臂有三条深带，中间一条较浅，远侧深带最深，犹如“瓶盖”,七上,Company Logo,八号染色体,亚中着丝粒染色体 长臂上有三条深染带，远侧深带最深,八下,Company Logo,九号染色体,亚中着丝粒染色体 长臂上有两条深染带，在近着丝粒区有次缢痕，显示出特有的“苗条”,九苗条,Company Logo,十号染色体,亚中着丝粒染色体 长臂上
9、有三条深染带，近侧的第一条深带最深,十号长臂三条带,Company Logo,十一号染色体,亚中着丝粒染色体 短臂近中段有一条深带；长臂上有两条深染带，近侧紧靠着丝粒有一条深带，远侧一条深带，中间有一条宽的浅带。,十一低来,Company Logo,十二号染色体,亚中着丝粒染色体 短臂中段有一条深带；长臂上近侧紧靠着丝粒有一条深带，远侧有34条深带，中间一条较宽的 浅带。,十二高,Company Logo,十三号染色体,近端着丝粒染色体 长臂上有比较均匀分布的四条深染带，中间两条最清楚,十三十四十五号， 三个一样一二一,Company Logo,十四号染色体,近端着丝粒染色体 着丝粒区深染，长
10、臂上有四条深染带，中间一条深带和远侧一条深带最清楚。,Company Logo,十五号染色体,近端着丝粒染色体 着丝粒区深染，长臂上可见一条清楚的深染带。,Company Logo,十六号染色体,中央着丝粒染色体 长臂上靠近着丝粒区深染可见一条清楚的深染带。,十六长臂近点深,Company Logo,十七号染色体,亚中着丝粒染色体 着丝粒区深染，长臂远侧段有一条深染带，与着丝粒之间有一条宽的 浅带。,十七远端带脚镣,Company Logo,十八号染色体,亚中着丝粒染色体 短臂有一条浅带，长臂近侧段与远侧段各有一条深染带，它们之间有一条宽的浅带。,十八人小肚皮大,Company Logo,十九
11、号染色体,中央着丝粒染色体 着丝粒区深染，其余全为浅带。,十九中间一点腰,Company Logo,二十号染色体,中央着丝粒染色体 着丝粒区深染，短臂有一条深带，长臂着色较浅。,二十头重脚底轻,Company Logo,二十一号染色体,近端着丝粒染色体 短臂末端有时可见随体，长臂中段可见一条宽的清楚的深染带。,二十一象葫芦瓢,Company Logo,二十二号染色体,近端着丝粒染色体 着丝粒区深染，长臂近中段可见一条较宽的浅带。,二十二一点,Company Logo,X染色体,亚中着丝粒染色体 短臂和长臂中段以着丝粒为中心各有一条深染带，像“照镜子”。,Company Logo,Y染色体,近端
12、着丝粒染色体 短臂末端没有随体，两长臂靠拢，有时在远侧段可见两条深带，有时整个长臂深染，像“小砝码” 。,Company Logo,Y黑腰 Y 染色体：形态和大小，跟G 组染色体相似。它有以下几个特征： 它的两条染色单体一般不作分叉状，几乎是平行的； 在许多细胞中，在其长臂上可见到次缢痕；,一般来说，它比第21、22染色体要长一些； 没有随体； 长臂的端部模糊不清，呈“细毛状”。,Company Logo,46,XY,1,1,2,2,3,3,4,4,5,5,6,6,7,7,8,8,9,9,10,10,11,11,12,12,Company Logo,46,XY,1,1,2,2,3,3,4,4,
13、5,5,6,6,7,7,8,8,8,9,9,10,10,11,11,12,12,13,13,22,22,14,14,15,15,16,16,17,17,18,18,19,19,20,20,21,21,X,Y,Company Logo,46,XX,1,1,2,2,3,3,4,4,5,5,6,6,7,7,8,8,9,9,10,10,11,11,12,12,13,13,14,14,15,15,16,16,Company Logo,46,XX,X,X,17,18,18,19,19,20,20,21,21,22,17,22,Company Logo,Company Logo,实验步骤,取显带中期分裂相显微镜照片，计数染色体总数。 用解剖剪沿各染色体边缘，稍留空隙，剪下每条染色体，放在培养皿内。再计数一次。 按各号染色体显带带性特点，在培养皿内将同源染色体一一配对，再按染色体分组标准，分成组。 将配对好的染色体排列并粘贴在纸上，在各组染色体应在的位置上画横线，让各组染色体的着丝粒压在横线上。短臂在上，长臂在下。性染色体可贴在组染色体之后。,Company Logo,作 业,每人剪贴分析一张正常人体细胞显带中期分裂相显微镜照片，进行性别诊断并且写出核型。,Company Logo,
