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1、苯和甲苯的气相色谱定性与定量分析,17:42,SCNU,2,重 现,1903年 俄罗斯植物学家 Tsweet茨维特,植物提取液 CaCO3玻璃柱 石油醚淋洗,石 油 醚,色 谱,创建,17:42,SCNU,3,色谱分析法的特点 Characteristics of Chromatographic Analysis,集富集、分离和检测于一体的高自动化、高选择性和高灵敏度的分析方法,Separation,Concentration,Detection,High Selectivity High Sensitivity High Automatization,17:42,SCNU,4,两相分配,迁移
2、,平衡,有些成分与固定液“关系密切”,“关系密切”，留下 输了比赛,分配系数: 固S流M 两相浓度之比,17:42,SCNU,5,色谱图：图形结果（Chromatogram）,色谱图即色谱柱流出物通过检测器时所产生的响应信号对时间的曲线图，其纵坐标为信号强度，横坐标为保留时间。, 色谱峰,保留时间（分）,基线 ,峰高,峰宽,响应值,17:42,SCNU,6,分类,流 动 相,17:42,SCNU,7,气相色谱法分类,气固色谱(GSC)：是用多孔性固体为固定相，分离的对象主要是一些永久性的气体和低沸点的化合物. 气液色谱(GLC)：固定相是用高沸点的有机物涂渍在惰性载体上由于可供选择的固定液种类
3、多，故选择性较好，应用亦广泛。,17:42,SCNU,8,气相色谱基本结构,供气系统：气源、气体净化、流速控制及测量 进样系统：进样器、气化室 分离系统：色谱柱及控温装置 检测系统：检测器、控制电源及控温装置 记录系统：放大器、记录仪或数据处理机,17:42,SCNU,9,进样系统,进样装置 液体：0.5、1、5、10、25、50 L (一般进样0.110 L） 气体：0.255 mL 注射器或六通阀 (一般进样0.110 mL） 汽化室 样品在汽化室汽化，并很快被带入色谱柱 汽化室：可控温度为50400，一般比柱温高3070 ,17:42,SCNU,10,原理图(不分流状态),毛细管色谱柱分
4、流/不分流进样原理(不分流状态) Purge on 状态 * 只有在进样后4060 秒 时间内处于本状态,毛细管色谱柱分流/不分流进样原理(不分流状态),17:42,SCNU,11,原理图（分流状态）,经稳压后载气入口,稳流阀,三通管,二位三通电磁阀,针型阀,隔垫清扫输出 0.5-5ml / 分钟,分流输出 根据分流比调节,毛细管色谱柱,毛细管色谱柱分流/不分流 进样原理(分流状态),17:42,SCNU,12,分离系统,分离系统由色谱柱组成，它是色谱仪的核心部件，其作用是分离样品。色谱柱主要有两类：填充柱和毛细管柱。 填充柱 填充柱由不锈钢, 玻璃或聚四氟乙烯等材料制成，内装固定相，一般内径
5、为26 mm，长15m。填充柱的形状有U型和螺旋型二种。柱内填充固定相，制作简单，柱容量大，操作方便，分离效果足够高，应用普遍,17:42,SCNU,13,分离系统,毛细管柱又叫空心柱，分为涂壁，多孔层和涂载体空心柱。涂壁空心柱是将固定液均匀地涂在内径0. l0. 5mm的毛细管内壁而成，毛细管材料可以是不锈钢或石英。毛细管色谱柱渗透性好，传质阻力小，而柱子可以做到长几十米。与填充柱相比，其分离效率高（理论塔板数可达106）、分析速度快、样品用量小，但柱容量低、要求检测器的灵敏度高，并且制备较难。,17:42,SCNU,14,控温系统,在气相色谱测定中，温度是重要的指标，它直接影响色谱柱的选择
6、分离、检测器的灵敏度和稳定性。控制温度主要指对色谱柱炉，汽化室，检测器三处的温度控制。 色谱柱的温度控制方式有恒温和程序升温二种。对于沸点范围很宽的混合物，往往采用程序升温法进行分析。程序升温指在一个分析周期内柱温随时间由低温向高温作线性或非线性变化，以达到用最短时间获得最佳分离的目的。,17:42,SCNU,15,检测系统,样品经色谱柱分离后，各成分按保留时间不同，顺序地随载气进入检测器，把进入的组分按时间及其浓度或质量的变化，转化成易于测量的电信号，经过必要的放大传递给记录仪或计算机，最后得到该混合样品的色谱流出曲线及定性和定量信息。,17:42,SCNU,16,气相色谱检测器,根据检测原
7、理的不同，可将其分为浓度型检测器和质量型检测器两种： （l）浓度型检测器 测量的是载气中某组分浓度瞬间的变化，即检测器的响应值和组分的浓度成正比。如热导检测器和电子捕获检测器。 （2）质量型检测器 测量的是载气中某组分进入检测器的速度变化，即检测器的响应值和单位时间内进入检测器某组分的量成正比。如火焰离子化检测器和火焰光度检测器等。,17:42,SCNU,17,火焰离子化检测器（FID）,火焰离子化检测器属选择性检测器，是以氢气和空气燃烧的火焰作为能源，利用含碳有机物在火焰中燃烧产生离子，在外加的电场作用下，使离子形成离子流，根据离子流产生的电信号强度，检测被色谱柱分离出的组分。,17:42,
8、SCNU,18,FID特点,灵敏度很高，比热导检测器的灵敏度高约103倍；检出限低，可达10-12gS-1； 火焰离子化检测器能检测大多数含碳有机化合物； 死体积小，响应速度快，线性范围也宽，可达106以上； 而且结构不复杂，操作简单，是目前应用最广泛的色谱检测器之一。 其主要缺点是不能检测永久性气体、水、一氧化碳、二氧化碳、氮的氧化物、硫化氢等物质。,17:42,SCNU,19,2. 装置主要部件是离子室,离子室： 包括气体入口、火焰喷嘴、发射极和收集极等部件。,17:42,SCNU,20,工作原理,通过在发射极和收集极之间施加极化电压，形成直流电场，有机组分在高温下电离成许多正离子和电子，
9、在极化电场作用下向两极定向移动，正离子移向负极，电子移向正极，形成微电流，微电流放大后由记录仪记录下来。 微电流大小与被测组分含量成正比，含量越大，产生微电流越大，因此可进行定量分析,17:42,SCNU,21,GC,仪器名称 可测定物质 灵敏度 稳定性 线性 鉴定能力,GC-MS 挥发性有机物质 Scan :0.1ng 好 104 -106 保留时间与质谱 SIM : 10 fg ( 质量信息) GC-FID 挥发性有机物质 10pg 好 106 仅限保留时间 GC-ECD 具有卤化物等 1ng-1pg 尚可 103 -104 敏感物质与保留 吸电子基的物质 时间 GC-FPD 含S,P物质
10、 S: 1ng 好 S: 103 敏感物质与保留 P: 10pg P: 105 时间 GC-NPD 含N,P 物质 10pg 尚可 104 敏感物质与保留 时间,17:42,SCNU,22,评价GC方法的标准,问题：什么样的分离结果是好的？分离度？灵敏度？,17:42,SCNU,23,什么是色谱的分离度,分离度的公式：,R：分离程度的量度,17:42,SCNU,24,17:42,SCNU,25,定性分析,1.利用保留值与已知物对照定性 利用保留时间定性 在相同色谱条件下，将标准物和样品分别进样，两者保留值相同，可能为同一物质。 此方法要求操作条件稳定、一致，必须严格控制操作条件，尤其是流速。,
11、17:42,SCNU,26,利用保留值经验规律定性,(1) 碳数规律推知同系物保留值 在一定温度下,同系物的调整保留时间的对数值与其分子中碳原子数呈线性关系 lg t R=A1n+C1 t R:调整保留时间 A1, C1: 对给定的色谱系统和固定液为常数 n: 分子中碳原子数(n3) 根据同系物中几个已知组分的调整保留值可推知同系物其它组分的调整保留值,可用于定性鉴定.,17:42,SCNU,27,(2)沸点规律相同碳数的其它异构体,在一定色谱条件下,同族具有相同碳数的碳链异构体,其调整保留时间的对数与其沸点呈线性关系 lg t R=A2Tb+C2 A2、C2 均为常数；Tb 为组分的沸点（K
12、） 根据同族同碳数碳链异构体中几个已知组分的调整保留值及其沸点，可推知同族中具有相同碳数的其它异构体的调整保留值,17:42,SCNU,28,常用的定量方法,峰面积百分比法 由于检测技术的影响，在色谱中不常用 外标法 在色谱中用的最多 内标法 准确，但是麻烦 在标准方法中用的最多,17:42,SCNU,29,峰面积百分比法定量,公式： 特点： 各组分要全部流出、全部被检测，并对检测器的响应值一样简单 与进样量无关 不需标样 简单,17:42,SCNU,30,外标法定量 (一),配制一系列已知浓度的标样,17:42,SCNU,31,外标法定量（二）,实际色谱图,标准曲线,17:42,SCNU,3
13、2,外标法定量（三）,计算公式 特点 无需各组份都被检出、洗脱 需要标样 标样及样品测定的条件要一致 进样体积要准确,17:42,SCNU,33,内标法定量（一）,配制一系列浓度的标样，其中加有内标样,17:42,SCNU,34,内标法定量（二）,实际色谱图,标准曲线,17:42,SCNU,35,内标法定量（三）,计算公式： 特点： 无需各组份都被检出、洗脱 需要标样，需要内标样 结果与进样体积无关,17:42,SCNU,36,内标法定量（四）,对内标物的要求 化学结构与待测组分相似(同系物、异构体) 在样品中不存在 不与样品中组份发生任何化学反应 保留值与待测组分接近 浓度（响应值）与待测组分相当 其色谱峰与其他色谱峰分离好,17:42,SCNU,37,可接收的检测范围,校正曲线只有在建立这条曲线的浓度范围内有效，高或低于这些点都可能引起计算错误,17:42,SCNU,38,定量校正曲线,曲线A： 因在零浓度时仍有色谱峰， 可能有杂质未分开 曲线B： 在此浓度内，检测器的响应 值是非线性的 曲线C： 可接受的理想状态，实际情 况应是其延长线到零点 曲线D： 表明有样品的损失，可能是色谱柱的非特征吸附，也 可能是样品制备时的损失,17:42,SCNU,39,谢 谢！,
