dna重组技术的基本工具讲义

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1、选修3知识呈现的方式:,乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷),转基因抗虫棉,抗虫棉,普通棉,专题一 基因工程,基因工程的概念,基因拼接技术或DNA重组技术,生物体外,基因,DNA分子水平,人类需要的基因产物,剪切, 拼接, 导入, 表达,基因重组,基因工程的概念,科技探索之路 基础理论和技术的发展催生了基因工程,基因工程培育抗虫棉的简要过程:,普通棉花(无抗虫特性),苏云金芽孢杆菌,提取,抗虫基因,与运载体DNA拼接 导入,棉花细胞(含抗虫基因),棉花植株(有抗虫特性),上述培育抗虫棉的关键步骤是什么?,基因工程培育抗虫棉的关键步骤:,关键步骤一:,抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来,

2、关键步骤二:,抗虫基因与运载体DNA连接,关键步骤三:,抗虫基因导入受体(棉花)细胞,解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具?,关键步骤一的工具: 关键步骤二的工具: 关键步骤三的工具:,基因的剪刀限制性内切酶 基因的针线DNA连接酶 基因的运载工具运载体,DNA 重组技术的基本工具,本节知识内容,1 DNA重组技术的基本工具,专题一 基因工程,“分子手术刀” 限制酶,“分子缝合针” DNA连接酶,“分子运输车” 基因进入受体细胞的载体,识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。,主要是从原核生物中分离纯化出来的一种酶。能将外来的DNA

3、切断,由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的,故名限制性内切酶。,4000种。,形成两种末端,一、 “分子手术刀” 限制性核酸内切酶,大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开。,限制酶,什么叫黏性末端?,限制酶,什么叫黏性末端?,什么叫黏性末端?,被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。,什么叫平末端?,当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时,切开的DNA两条单链的切口,是平整的,这样的切口叫平末端。,二、 “分子缝合针” DNA连接酶,1、种类: 2、作用部位:,两类,磷酸二酯键,DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来,即把梯子两边扶手的断口连接起来,这样一个重组的DNA分子就形成了。,DNA连接酶与DNA聚合酶的比较,三、 “分子运输车” 基因进入受体细胞的载体:,模拟制作,DNA重组技术的基本工具,本节知识小结,1 DNA重组技术的基本工具,专题一 基因工程,“分子手术刀”,“分子缝合针”,“分子运输车”,T,磷酸二酯键,A,

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