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1、实验五 放线菌的插片培养和形态观察,1.了解放线菌的特点并观察其形态特征 2.学习掌握放线菌观察的基本方法,一、实验目的:,二、实验原理,放线菌：由不同长短的纤细的菌丝形成单细胞的菌丝体，革兰氏阳性细菌。 菌丝体分为两部分，即潜入培养基中的营养菌丝（或称基内菌丝）和生长在培养基表面的气生菌丝。有些气生菌丝分化成孢子丝，呈螺旋形、波浪形或分枝状等，其着生形式有丛生、互生和轮生。孢子常呈圆形、椭圆形或杆状。,气生菌丝及孢子的形状和颜色常作为分类的重要依据,放线菌模式图,孢子丝,菌丝,放线菌的菌落特征,三、实验材料,1.放线菌培养物 紫色链霉菌和灰色链霉菌的四天插片培养物。 2.培养基：高氏合成一号
2、培养基 3.显微镜、无菌培养皿、无菌盖玻片、显微镜、酒精灯、接种针、载玻片等。,放线菌的插片培养,接种位置,四、实验步骤,插片并接种的顺序,插片培养法：倒平板（将融化的高氏合成1号培养基无菌操作倒平板） 插片（将无菌的盖玻片以大约45角插入培养基中（9片/皿/组） 接种（无菌操作取灰色链霉菌或紫色链霉菌的孢子划线接种于插片和培养基接触处） 培养（将插片平板倒置，28培养35天） 观察镜检：轻轻地慢慢地逆着插入方向拔出盖玻片，擦去背面培养物，然后将有菌的一面朝下放在滴有美兰的载玻片上，放下后不要再移动盖玻片，观察。,霉菌的载玻片培养,1、培养小室的灭菌：平皿底铺一张滤纸，再放一个U形玻璃棒，其上
3、放一张载玻片和两个盖玻片，160-170干热灭菌2小时。 2、琼脂块的制作：取已灭菌的马铃薯或查氏培养基6-7mL注入灭菌平皿中，使之凝固成薄层（培养基不要太厚）。用解剖刀切成边长0.5-1cm的小块，将其移至培养室中的载玻片上（每片放两块）。 3、接种：挑取很少量的孢子接种于琼脂块的上边缘【接种量要少，注意每次接种完毕烧红接种环，避免菌混杂】 ，用无菌镊子将盖玻片盖在琼脂块上，轻压一下。 4、培养：在平皿的滤纸上滴加3mL以上（4滴管）灭菌的20%甘油（保湿），28培养24小时。,五、实验结果,绘图紫色链霉菌和灰色链霉菌基内菌丝、气生菌丝和孢子丝。,基内菌丝,气生菌丝和孢子丝,绘图,孢子丝,气生菌丝,基内菌丝,培养基界线,实验结束后载玻片先用擦镜纸擦去镜油,再用洗洁精洗干净,放到酒精箱里. 擦油镜30秒,再离开实验室,下次实验内容,霉菌的形态观察 小培养法,在显微镜下，酵母菌有哪些突出的特征区别于一般细菌？ P43 ，2（2） 酵母菌一般以出芽方式进行无性繁殖。 酵母菌的个体大小比细菌大几倍甚至十几倍，在高倍镜下即可观察到。而一般细菌必须在油镜下才能观察到。,上次试验习题解答,如何区别酵母菌的营养细胞和释放出子囊外的子囊孢子？p44，2,酵母菌的营养细胞呈红色，而释放出子囊外的子囊孢子呈绿色。由此可加以区别。,请确保镜头擦拭 干净！ 请第三排同学留下下周再见！,
