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1、实验六,一、束臂试验（毛细血管抵抗力试验） 二、出血时间 三、血小板计数,一、束臂试验,(毛细血管脆性试验) （capillary fragility test ） （毛细血管抵抗力试验 ） (capillary resistance Test, CRT),目的,掌握束臂试验方法，参考范围及临床意义。,原理,束臂试验又称毛细血管脆性试验，也称毛细血管抵抗力试验。通过给手臂局部加压（标准压力），使静脉血流受阻，给毛细血管以负荷，检查一定范围内皮肤新出现的出血点的数目来估算血管壁的完整性及脆性。,器械与仪器,血压计 纸圆圈,操作,体位：病人取坐位或仰卧位，上肢伸直、肌肉放松。 画圈：在前臂屈曲肘弯
2、下4cm处划一直径5cm之圆圈，在此圈内计算出血点的数目。,加压：用血压计的袖带束于该侧上臂，测血压后，将缚带打入空气，当水银柱上升到病人收缩压与舒张压的中点时便关紧活塞，不使水银柱下降，一般不超过90mmHg，持续8分钟后，放松袖带，将手举起。 计算出血点：在血循环恢复2min后，再检查圆圈内的出血点。,注意事项,试验前的出血点需要标记。 观察出血点时应选择好适宜的光线和角度。避免遗漏。 40岁以上的女性、病毒感染、服用阿司匹林等药物时，可出现假阳性结果。,参考范围,圆圈中的出血点：男性少于5个，女性及儿童少于10个。,临床意义（1）,新出血点的数目超过正常称为毛细血管脆性增加或束臂试验阳性
3、。 1、血管壁的结构和（或）功能缺陷，如遗传性出血性毛细血管扩张症、过敏性紫癜、单纯性紫癜以及其他血管性紫癜。 2 、血小板的量和（或）质的异常，如原发性或继发性血小板减少症、血小板增多症、先天性（遗传性）或获得性血小板功能缺陷症。,临床意义（2）,3.血管性血友病 4.其他如高血压、糖尿病、维生素C缺乏症、肝胆疾病、败血症、亚急性感染性心内膜炎、尿毒症等。 5.少数正常人可呈阳性，尤其是妇女。,二、出血时间（bleeding time,BT）,一期止血的筛查试验,实验目的,了解出血时间测定器法 测定出血时间的方法，掌握其参考范围及临床意义。,原 理,用出血时间测定器在前臂皮肤上造成一个“标准
4、”创口，记录出血自然停止所需要的时间。此过程反映了皮肤毛细血管与血小板之间的相互作用，包括血小板粘附、激活、释放以及血小板聚集等反应，当血管和（或）血小板功能有异常时，出血时间可出现变化。,器材与仪器,秒表 血压计 消毒滤纸 酒精拭子 蝶形胶布、纱布和长胶布 剃刀（必要时在前臂试验部位剃去皮肤表面的体毛）,方 法,BT是筛检实验中唯一的体内试验，TBT法是目前推荐方法，由于使用标准的测定器，因此皮肤切口的长度、宽度和深度恒定，达到切口标准化。,操作,加压 将血压计袖带缚于上臂，加压并维持成人40mmHg，儿童在20mmHg. 消毒 在肘前凹窝下约2cm处用碘酊在直径5cm范围内消毒，使皮肤碘酊
5、干后，再用乙醇棉球拭去碘酊待干。,切口计时 轻轻绷紧消毒处，将出血时间测定器贴与皮肤表面并按动按钮，使刀片由出血时间测定器内弹出并刺入皮肤（成人的切口约5mm，深1mm），待自然出血后开动秒表计时。,试血计时 每隔0.5分钟用干净滤纸吸干流出的血液（滤纸不要接触皮肤），直到出血自然停止，秒表停止计时。记录在皮肤上作切口直至出血停止的时间即为出血时间。,注意事项,试验前一周停止服用阿司匹林等抗血小板的药物。 当出血时间测定器法出血时间大于20分钟时应立即停止测定，并用消毒棉球压迫止血。 采血部位应保暖，穿刺部位皮肤应正常。血液应自动流出。 滤纸吸干滴出血液时，应避免与伤口接触。,参考范围,BT测
6、定器法 6.92.1min 9min为延长,临床意义,出血时间延长：见于血小板数量异常，如血小板减少症；血小板质量缺陷，如先天性和获得性血小板病和血小板无力症等，也见于某些凝血因子缺乏，如血管性血友病（vWD）、低（无）纤维蛋白原和弥散性血管内凝血（DIC）等，还见于血管疾病，如遗传性出血性毛细血管扩张症。 出血时间缩短：见于某些严重的高凝状态和血栓形成。,三、血小板计数（Platelet count）,测定全血中血小板的浓度 血细胞分析仪法 流式细胞仪法 相差显微镜直接计数法 普通光学显微镜法,普通光学显微镜法,稀释液不同，有多种计数方法 破坏红细胞的溶血法：草酸铵稀释液、 复方尿素稀释液
7、不破坏红细胞的方法：复方碘稀释液,血小板计数（手工法）,原理 将血液用适当的稀释液作一定量稀释后，混匀注入计数池内计数，再算出每升血液中血小板数。,操作,1、在清洁试管中加入稀释液0.38ml。 2、准确吸取血液20l，擦去管尖外附着血液， 置于血小板稀释液内，立即充分混匀。待完全 溶血后再次混匀1min。 3、取上述均匀血小板悬液1滴，注入计数池内， 静置10-15min，使血小板下沉。 4、用高倍镜计数每升血液内血小板数。,2019/7/25,29,W,W,W,W,R,R,R,R,R,Plt,计算,PLT/L= 5个中方格内PLT数5102010 6 109/L,参考值： （100-300）109/L,注意事项,1、血小板稀释液要清洁，配成后应过滤，防止微粒和细菌污染，试管及吸管也应清洁、干净。 2、针刺应稍深，使血流通畅，拭去第一滴血后，操作应迅速，防止血小板聚集和破坏，采取标本后应尽快计数，以免影响结果。 3、血液加入稀释液内要充分混匀，滴入计数池后一定要静置10-15min。 4、计数时光线要适中，不可太强，应注意有折光性的血小板和杂质、灰尘相区别，附在血细胞旁边的血小板也要注意，不要漏数 。,
