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1、大孔吸附树脂纯化刺玫果总黄酮工艺研究论文 I 摘摘 要要 刺玫果学名野蔷薇,又名野刺玫果,山刺玫果,系蔷薇科蔷薇属植物山刺玫的成熟果实。 广泛分布于我国的东北地区，尤以黑龙江省贮量最为丰富。现代药理学研究表明：刺玫 果含有丰富的营养成分及生物活性物质，具有健脾理气、养血调经、抗衰老、防治心血 管疾病、增强免疫及促智等功效。刺玫果中所含的总黄酮类物质具有预防和治疗高血脂、 血栓所致的心脑血管疾病的功效，且具有高效、低毒副作用的优势。因此纯化刺玫果中 的总黄酮就具有现实的科研意义。 目前，常见的总黄酮纯化方法有水提醇沉法（水醇法） 、醇提水沉法（醇水法） 、酸 碱法、盐析法、离子交换法和结晶法等。
2、实践表明，这些方法也存在一定的局限性。近 年出现了一些分离和纯化的新方法，如絮凝沉淀法，大孔树脂吸附法、超滤法、高速离 心法等。 本论文采用大孔树脂法纯化刺玫果提取物中的总黄酮。探索洗脱剂、pH值、上样浓 度等因素对纯化过程的影响。采用紫外分光光度计法对总黄酮含量进行了分析，最终确 定了洗脱剂的浓度75%、上样PH为5，上样浓度为原液浓度，吸附速率为2Bv/h，洗脱速率 为1Bv/h。该纯化方法简单，快捷，纯化效率高，进一步拓展了刺玫果的应用领域和范围， 为刺玫果的全面和综合利用提供科学的理论依据。 关键词关键词：刺玫果 总黄酮 大孔树脂法 纯化 大孔吸附树脂纯化刺玫果总黄酮工艺研究论文 II
3、 Abstract Rosa multiflorais is the scientific name of Rosa davurica pall，also known as Wild rosa fruit. Rosa mountain fruit,this fruit is the Rosa mountain fruit of Rosaceae genus Rosa.It is growing in east-north China, especially in province of Heilongjiang. Modern pharmaceutical research shows tha
4、t Rosa davurica Pall contains rich nutrients and bioactive substances, anti-aging, prevention and treatment of cardiovascular disease, enhances immunity and the efficacy of nootropic, etc. Total flavonoids in the Rosa davurica Pall possess the function of prevention and treatment of high blood lipid
5、s, thrombosis dued to cardiovascular and cerebrovascular diseases. It has properties like high-efficiency and the advantages of low toxicity side effects.Thus it is worth in doing research on refining total flavonoids in the fruit. Recently, there are the several common methods in purifying Flavonoi
6、ds such as water- extracting alcohol-precipitating,alcohol-extracting water-precipitating,acid-base method, saltdopositing,io-exchange and crystallization,and so on.In practice, there is the limit in all these method reported.Some new methods are investigated like flocculation precipitation, macropo
7、rous resin absorption,ultrafiltration,high-speed centrifugea- tion, and so on. In this thesis, we report extraction of total flavonoids from Rosa davurica pall by using the method of Macroporous resin.It was investigated basing on how the type of Eluant,PH of solution,concentration of samples influe
8、nces purification.Using Ultraviolet spectrophotometer method to analyze Flavonoids,This method is to know the content of total Flavonoids by measuring Ultraviolet absorption. As a result, it was found that the concentration of Eluant is 75 % ethanol, pH is 5 and the sample concentration is concentra
9、tion of original solutionl, Adsorption rate is 2Bv / h, Elution rate is 1Bv/h. This method is simple, rapid and high-efficient. This research have obtained some scientific results which will board the application of Rosa davurica pall . Keywords：Rosa davurica pall Total Flavonol Macroporous resin pu
10、rification 大孔吸附树脂纯化刺玫果总黄酮工艺研究论文 I 目目 录录 摘 要I ABSTRACT .II 1 绪 论1 1.1 课题背景1 1.2 项目的目的意义1 1.3 有关刺玫果的介绍2 1.3.1 药材来源及植物特征2 1.3.2 刺玫果的化学成分2 1.3.3 刺玫果的药理作用3 1.3.4 刺玫果的营养价值4 1.3.5 刺玫果的生物学特性5 1.3.6 刺玫果的开发前景5 1.4 黄酮类化合物的研究6 1.4.1 黄酮类化合物的文献综述6 1.4.2 黄酮类化合物的分类6 1.5 黄酮类化合物的国内外研究进展7 1.5.1 提取工艺的研究进展7 1.5.2 精制工艺的研
11、究进展8 1.5.3 总黄酮的含量测定方法10 1.5.4 分离方法研究进展12 1.5.5 分析鉴定的研究进展13 2 实验部分15 大孔吸附树脂纯化刺玫果总黄酮工艺研究论文 II 2.1 实验仪器和设备 .15 2.2 实验药品与试剂 .15 2.3 实验原理和方法 .15 2.3.1 实验原理15 2.3.2 实验方法.16 2.4 实验步骤及实验流程图 .16 2.4.1 实验步骤.16 2.4.2 实验技术路线.16 2.5 实验操作部分 .17 2.5.1 方法学研究17 2.5.2 大孔树脂法纯化刺玫果总黄酮的工艺研究21 2.5.3 大孔树脂的静态吸附及解吸21 2.5.4 大
12、孔树脂的动态吸附及解吸23 2.5.5 大孔树脂工艺优化研究24 2.5.6 树脂的重复性使用33 3 结果与讨论33 3.1 大孔吸附树脂纯化方法的讨论33 3.1.1 大孔吸附树脂法 33 3.1.2 上样浓度的讨论34 3.1.3 吸附速率考察34 3.1.4 解吸乙醇浓度的考察35 3.1.5 洗脱速率考察35 大孔吸附树脂纯化刺玫果总黄酮工艺研究论文 III 3.1.6 洗脱终点考察35 3.1.7 上样液 PH 值的考察.36 参考文献.38 致 谢.39 大孔吸附树脂纯化刺玫果总黄酮工艺研究论文 1 1 1 绪绪 论论 1.11.1 课题背景课题背景 刺玫果学名野蔷薇,又名野刺玫
13、果,山刺玫果,系蔷薇科蔷薇属植物山刺玫的成熟果实。 广泛分布于东北及内蒙、山西、河北等省。该果实酸甜可口，含有丰富的营养成分及生物 活性物质，民间大量采食或用于泡茶、泡酒等。现代研究表明刺玫果具有健脾理气、养血 调经、抗衰老、防治心血管疾病、增强免疫力的功效，刺玫果中所含的总黄酮类物质具有 预防和治疗高血脂、血栓所致的心脑血管疾病的功效，且具有高效、低毒副作用的优势1。 目前刺玫果正在作为一种天然保健药物被日益重视和广泛开发。 医学研究表明：心脑血管疾病已成为中老年人群中发病率较高的一项顽疾。当今社会 人口老龄化已成为很多国家面临的普遍问题，我国人口老龄化的现象也日益突出。因此市 场上对治疗心
14、血管疾病的药品需求量很大。鉴于刺玫果中含有丰富的总黄酮，开发该药物 的社会前景和市场前景就非常可观。为了提高对该药材质量的控制，我们采用大孔吸附树 脂法以芦丁为标准品对刺玫果中总黄酮提取进行研究，为提取刺玫果中有效物质提供一定 参考。 1.21.2 项目的目的意义项目的目的意义 刺玫果具有很高的经济价值和营养价值，根、茎、花、果实都可入药。 中华大辞典 称：刺玫果具有健脾理气,养血调经之功效。前苏联第八、九版药典亦有收载,用于治疗坏 血病。现代医学研究发现，刺玫果具有抗衰老、抗疲劳、耐缺氧，增强人体免疫功能作用， 长期服用能显著提高人体的 SOD 含量 2。 据有关资料记载：天然刺玫果是治维生
15、素缺乏症的良药，各种制剂可用来治疗血压、 动脉粥样硬化、脑溢血、肝、肾、胃溃疡。还具有显著的抗衰老、抗疲劳、抗辐射、耐缺 氧、治血栓、降血压、防癌、治癌、强身壮阳、健脑增智、延年益寿的作用。由此可见， 天然刺玫果是一种不可多得的食、药同源的宝贵资源3。目前刺玫果正在作为一种天然保 健药物被日益重视和广泛开发。市场上已出现有以山刺玫果为主研制的“刺玫果保健茶”等 保健食品及保健饮料, 它又是各类食品不可多得的添加剂，也可直接生产果酱、果冻、果 脯等食品。临床已研制出以刺玫果为原料的“冠心病口服液”等注射液和口服液4。 综上所述，刺玫果具有极高的营养价值和生理活性，具有广阔的市场开发前景。为提 高
16、刺玫果提取工艺的科学性，特以主要成分总黄酮为考察指标，采取大孔吸附树脂纯化刺 玫果中的总黄酮，以多种树脂共同吸附黄酮,考察其吸附率及解析率,寻找最优树脂。并进 一步采用单因素探索实验和正交试验优选其提取工艺的最佳条件。对刺玫果中总黄酮的提 取方法做了进一步探索，通过实验找出最经济实惠，效率较高的方法，能实现实际的工业 生产。为今后刺玫果的综合利用及其相关领域的深入研究提供了新的思路,并为刺玫果的 进一步开发应用奠定了良好的基础。 大孔吸附树脂纯化刺玫果总黄酮工艺研究论文 2 1.31.3 有关刺玫果的介绍有关刺玫果的介绍 1.3.11.3.1 药材来源及植物特征药材来源及植物特征 1形态特征 野生刺玫果为落叶小灌木，茎直立，多皮刺，株高 0.82m。根为木质，粗长，暗褐 色，枝暗紫色，无毛，小枝及叶柄基部有成对的皮刺，刺稍弯曲或直。叶互生，奇数羽毛 状复叶，小叶 57 个，小叶长圆形或阔披针形，长 11.3cm，宽 0.51.5cm，先端尖或 稍钝,基部圆形或楔形，边缘具细锯齿，正面深褐色无毛，背面灰白色有粒状腺点及短柔 毛，叶柄有腺体，托叶宿存。花两
