tof_qtof常见问题与解答

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1、 安捷伦安捷伦 HPLC-MS6200/6500 系列液质联用仪现场培训手册系列液质联用仪现场培训手册 Page 1 TOF QTOF Q&A： 1.1. 什么是自动调谐（AutoTune）？多长时间进行一次自动调谐？如何判断 TOF 需要自动调谐？ 什么是自动调谐（AutoTune）？多长时间进行一次自动调谐？如何判断 TOF 需要自动调谐？ 简单的说，自动调谐(Autotune)是指仪按照预先编好的软件程序，利用调谐液（Calibrant） 里的离子做标准，对仪器的灵敏度及质量检测精度进行自动优化及校准的过程。调谐时仪器 做的事其实就是优化各级离子透镜的电压以确保离子能够顺利的最大限度的从

2、离子源到达检 测器。通常，对于 TOF/QTOF 来说，仪器的调谐后的相关参数在相当长的时间内(例如 3 个月 或以上)会维持稳定，不会随开关机、或维护与否而发生大的改变，因此我们建议在必要时如 仪器的灵敏度有问题时才进行 Autotune，这个时候仪器会自动的调整仪器的增益以获得最佳 的响应。如果在停机，更换气体，日常维护等之后，在仪器重新开机达到正常的真空度后， 调谐的参数很少会发生改变，因此通常不必做 Autotune。我们建议用户每天或者做样之前进 行一次 Calibration 即可，保证仪器有最佳的精度。如果 Calibration 的结果绝大多数是 pass，则完全不需要进行 A

3、utotune。所以，在进行 Autotune 之前，先做 Calibration 或者 Checktune，根据它们的结果来决定是否进行 Autotune。建议在做 Autotune 之前先给安捷伦 800 响应中心一个电话，咨询一下，要不要做。 2.2. 为什么有时为什么有时 CALIBRATION 时误差很大，怎么办？时误差很大，怎么办？ Calibration 只校正质量轴的偏差，不改变其他任何参数。可以在任何操作模式下进行。建 议每天运行样品前做一次 Calibration。以确保仪器的测量精度。如果仪器受到了污染， Calibration 的结果会给出较大的误差，因为校正时，在 T

4、OF MASS CALIBRATION 标签下有个 Peak Detection Window，缺省值为 1%，即离子检测窗口大小为被测离子质量的 1%，软件在 给出的调谐液里的相关离子的 Peak detection Window 里找到的丰度最大的离子被认为是该 离子，并按照这个结果计算校正值，当仪器污染时，当出现在 Peak detection Window 里的 污染离子丰度值超过调谐液中给出的离子的丰度时，软件会错把污染离子当成是校正的离子， 这时就会得到很大的误差，这时可以把 Peak detection Window 改成 0.1%试试，通常会很有 效果，但最好的办法还是清洗干净

5、仪器的离子源和毛细管。判断是否污染还有一个办法，就 是将 Calibration 结果中误差最大的一个或几个离子在校正离子列表中去掉，然后再做一次 calibration,如果剩下的离子误差都能够在正常范围，就说明确实在误差大的质量范围里有 污染存在，通常 m/z118；322；622 附近是最容易污染的。 3.3. 做 Autotune 需要注意什么问题？如果不能通过怎么办？ 做 Autotune 需要注意什么问题？如果不能通过怎么办？ a. 首先，进行 Atuotune 必须确保仪器已经完成开机过程，TOF 真空达到 1.5e-6 torr 以下， 最好能达到 9e-7torr 以下，并且

6、调谐液（Calibrant）要大于 30ml，调谐液没有过期或 污染。 b. 请确保仪器是没有污染的，最好先做个离子源的维护以防止杂质离子的干扰，很多事实 表明，在仪器有污染的情况下，盲目的 Autotune 导致了更糟糕的结果。 c. 备份原来的调谐参数，这点很重要，因为万一调谐出了问题，我们还可以恢复我们的调 谐文件。 d. 把 LC 的流量增大至 1ml/min 冲洗喷雾针 5 分钟。 e. 在 Instrument state 的标签里选择 Extended Dynamic Rang(2G)，注意 Autotune 一定要 在这个模式下进行。 安捷伦安捷伦 HPLC-MS6200/65

7、00 系列液质联用仪现场培训手册系列液质联用仪现场培训手册 Page 2 f. 任何时候，如果第一次 Autotune 如果不能通过，则可以调用以前成功备份的调谐文件再 做一次,安装时工程师会给你备份一个最早的调谐文件。通常每次做自动调谐只需选择一 种极性（Positive 或 Negative）,如果要做两种极性，也是先做 Postive 后，保存调谐 文件，然后再进行 Negative 的调谐，建议不要选择 Both，注意不同极性的调谐对调谐液 浓度的要求不同。 g. 如果 Autotune 没有完成，离开 Tune 界面时，不要保存调谐文件。如果顺利完成，离开 Tune 界面时，则只需

8、save 调谐文件即可，无需另存调谐文件。 如果以上事项注意后，Autotune 依然有问题，请备好 Checktune 的报告，拨打安捷伦的 800 电话与工程师联系。由于 Autotune 的流程比较复杂，通常 Autotune 不能完成并非表明仪器 需要马上维修，许多时候仪器自身并没有问题，只是 Autotune 的过程出现问题，比如仪器或 调谐液污染等。 4.4. QTOF 什么时候做四级杆调谐？ QTOF 什么时候做四级杆调谐？ 四级杆调谐通常在安装时做一次即可，一般不需要经常做，只有在检测遇到问题时如：MSMS 模式下离子响应变低或者维修过后，才需要做四级杆的调谐。注意：四极杆的调

9、谐必须是在 TOF 调谐成功完成, 并且 Calibration 正常之后才能进行，Initial Quad Tune 和 Quad Tune 只能在 Extended Dynamic Range 模式下进行。四级杆调谐时必须使用没有稀释的调谐液原液。 5.5. 我怎么确定我要进行那种调谐？ 我怎么确定我要进行那种调谐？ A 如果你只是想检查一下仪器的状态，那么做个 check tune 就可以了，它使用上一次的调 谐参数，只检查仪器的状态，不调任何参数。 B 如果 Check Tune 结果有问题，比如误差较大或者分辨率太低，可以进一步做个 Quick tune，Quick Tune 可以在

10、任何模式下进行，它只对少数影响分辨率的参数进行调谐，同 时会对离子测量精度进行校准。 C 如果 Quick Tune 的结果依旧有问题或者仪器的响应有问题，可以做一个 Standard Autotune，它会对仪器的离子聚焦状态、分辨率、检测器增益等做一个全面的调谐。 Standard Autotune 只能在 Extended Dynamic Rang(2G)模式下进行。 D 一般情况下不需要做 Initial Autotune，只有在仪器做过重大维修或者初次安装的时候 才需要做，Initial Autotune 会调谐更多的仪器参数，并在开始调谐时会把各个参数恢 复到缺省状态，所以会花很长

11、的时间进行调谐。Initial Autotune 同样也只能在 Extended Dynamic Rang(2G)模式下进行 E 还要提一下的就是 Fast Polarity Switching Tune，只有在需要做快速极性切换的检测 时才需要做这个调谐，并使用这个调谐生成的调谐文件用于采样，由于不断的发生极性 切换，质量测定的精度会变差，这个调谐的结果不需要满足仪器的指标。 6.6. 如果在工作站的质谱或 LC 部分出现红色状态应该怎么办？ 如果在工作站的质谱或 LC 部分出现红色状态应该怎么办？ 工作站的状态界面出现红色，则表明 MS 或 LC 部分产生错误，仪器会自动停止运行，等待 人

12、工干预。首先，第一时间打开 Logbook 图标，根据时间顺序找到最近的错误 ，记录下 错误的代码及内容（最好将错误信息进行截屏），联系工程师寻求帮助。请注意：你提供的 错误信息是判断问题的关键。 安捷伦安捷伦 HPLC-MS6200/6500 系列液质联用仪现场培训手册系列液质联用仪现场培训手册 Page 3 7.7. 常见的错误信息有哪些？如何解决？ 常见的错误信息有哪些？如何解决？ LC 部分常见的错误有：漏液（Leak）,超过压力高限（Above upper pressure limit）,流动相低 于低限等。如果提示漏液（Leak）,请根据 Logbook的提示找到漏液的模块，将其漏

13、液传感 器（Leak sensor）用吸水纸擦干净，重新启动 LC 模块，并查找出漏液的起源并纠正，问题就 解决了。如果超出压力高限，请检查 LC 的管路是否阻塞。如果流动相低于低限，请参见前 面关于 Pump 中 Set Solvent Level 的设置。 MS 部分常见的错误有：漏液（1.31 Leak detected around source pump），干燥气无法维持设 定要求（2.6 Drying gas flow controller cannot regulate the requested setting after a fixed amount of time），雾化气

14、无法维持设定要求（2.7 Nebulizer pressure controller cannot regulate the requested setting after a fixed amount of time）等。前者是 MS 的 Leak tray 中的传感器感知到漏 液产生的，后两者通常是液氮罐中的液氮已用完或氮气发生器故障引起的，分别按其原因纠 正后，在重新 on 就可以了。其他的错误信息，请记录好，向工程师寻求帮助。 8.8. 工作站不能联机，如何判断问题及解决？ 工作站不能联机，如何判断问题及解决？ MassHunter 的 Data Acquisition 软件是通过网络

15、的方式与 LC 及 MS TOF/QTOF 进行联机的， 所以，如果无法进入工作站，请注意: a. 确保电脑，LC 的各个模块，MS QQQ，HUB（集线器）的电源都是打开的。并且网线连接是 正常的。 b. 首先启动 Windows 左下角的 StartRun，在对话框中输入 ping 192.168.254.11 t Enter 检查 LC 部分的网络通讯是否正常，再输入 ping 192.168.254.12 -t,检查 MS 部分 的网络通讯，如果都有 Reply from，则说明其网络通讯是好的。如果 LC 及 MS 都无法 ping 通(显示 Request time out)，则检

16、查是否电脑的 IP 地址被改(192.168.254.1)， 网卡问题，HUB 问题等，仪器问题的可能性很小。 c. 如果 LC 及 MS 都能 ping 通，请双击桌面的 Remove MassHunter Process，再试一次。 如果依然无效，重启仪器和电脑，再重新进入试一次。如果依然无效，请拨打 8008203278 寻求帮助。 9.9. 如果 Masshunter 软件出现异常（死机、崩溃等），如何处理？ 如果 Masshunter 软件出现异常（死机、崩溃等），如何处理？ a. MH 软件的正常运行跟许多因素有关，一旦出现问题，很难进行确切的故障诊断。请确保 在随机的 HP 电脑中不要安装其他的应用程序（如 Office，视频播放等），不要轻易更改 任何的 PC 的设置（例如 IP 地址，语言，区域，防火墙，自动更新等），严格控制病毒， 杜绝 U 盘等移动设备。如需 copy 数据，建议使用空白 DVD 进行刻录。 b. 软件的版本随仪器的更新也有很多，如果出现异常，请首先登录安捷伦的官网 http:/