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1、第七章 体液检验,医学检验 杨海霞,浆膜腔积液检查,2,本章内容,掌握脑脊液一般性状检查、脑脊液常用化学检查中的蛋白质检查、葡萄糖定量测定和氯化物定量测定、脑脊液显微镜检查的原理、方法和临床意义。,第一节 脑脊液检查,一、标本采集和处理 （一）标本采集 （二）标本转运 （三）标本保存和接收 二、一般检查 （一）理学检查 （二）化学检查 （三）显微镜检查 三、临床应用,本节内容,第一节 脑脊液检查,脑脊液（CSF）：存在于脑室和蛛网膜下腔的无色透明液体。,1.易通过的物质:氯,钠,镁等离子; 2.较易通过的物质: 白蛋白, 葡萄糖, 钙离子, 乳酸, 氨基酸, 尿素和肌酐; 3.极难或不能通过的
2、物质: 纤维蛋白原, 补体, 抗体, 毒素和药物, 及胆红素, 胆固醇.,血脑屏障的通透性,第一节 脑脊液检查,脑脊液的功能：保护脑脊髓及神经，并通过血管周围间隙供给脑部营养，维持神经细胞的渗透压，酸碱平衡和输出代谢产物。 脑脊液检查对中枢神经系统疾病的诊断和预后观察有重要意义,适应症,有脑膜刺激症状时，如脑膜感染性疾病。疑有颅内出血，如蛛网脑膜下腔出血。中枢神经系统肿瘤。不明原因的剧烈头痛、昏迷、抽搐或瘫痪。中枢神经系统疾病需椎管内给药治疗及手术前麻醉、造影等,禁忌症,对疑有颅内压升高者，为避免因腰穿诱发脑疝，应先作眼底检查，如有明显视乳头水肿，忌作腰椎穿刺。休克、衰竭或濒危状态的病人。穿刺
3、置局部皮肤有炎症的病人。颅后窝有占位性病变或伴有脑干症状的病人。,第一节 脑脊液检查,第一节 脑脊液检查,一、标本采集和处理,腰椎穿刺法,二、一般检查,第一节 脑脊液检查,第一节 脑脊液检查,二、一般检查：理学检查,颜色,正常：无色或淡黄色 红色-出血（损伤、病变） 黄色-陈旧性出血、黄疸 白色-化脓性脑膜炎 黑色-脑膜黑色素瘤,脑脊液新鲜性出血与陈旧性出血鉴别,第一节 脑脊液检查,二、一般检查：理学检查,透明度：正常-透明。,第一节 脑脊液检查,二、一般检查：理学检查,凝固性：正常无凝块。,1、脑脊液呈毛玻璃样混浊见于：（） A、化脓性脑膜炎 B、结核性脑膜炎 C、病毒性脑膜炎 D、神经梅毒
4、 E、隐球菌性脑膜炎 2、脑脊液黄色见于 （） A、流行性脑膜炎 B、化脓性脑膜炎 C、蛛网膜下腔出血 D、结核性脑膜炎 E、脑肿瘤 3、脑脊液呈黄色胶冻样见于（ ） A、化脓性脑膜炎 B、结核性脑膜炎 C、病毒性脑膜炎D、隐球菌性脑膜炎 E、蛛网膜下腔梗阻 4、脑脊液呈现小絮状凝块见于（） A、化脓性脑膜炎 B、结核性脑膜炎 C、病毒性脑膜炎 D、神经梅毒 E、蛛网膜下腔梗阻,练习题,B,C,E,D,二、一般检查,第一节 脑脊液检查,第一节 脑脊液检查,二、一般检查：化学检查,球蛋白,苯酚,蛋白盐（白色混浊）,原理,结果,：,白色云雾状混浊,：,白色云雾状,：,：,正常：,阴性,白色絮状沉淀
5、,立即形成白色凝块状,第一节 脑脊液检查,二、一般检查：化学检查,注意事项,红细胞过多时，须先离心使细胞沉淀，吸取上清液进行试验 试验中所用试管应十分洁净，否则易出现假阳性结果。 所用试剂苯酚如不纯，亦可引起假阳性反应；室温低于10，酚饱和度低，亦可引起假阳性结果。,第一节 脑脊液检查,二、一般检查：化学检查,蛋白质定量试验磺基水杨酸-硫酸钠试验,2,蛋白质,磺基水杨酸-硫酸钠,A530,原理,结果,腰池0.20.4g/L ； 小脑延髓池0.10.25 g/L； 侧脑室池：0.050.15 g/L,正常：,与标准蛋白比较,第一节 脑脊液检查,二、一般检查：化学检查,注意事项,脑脊液如有多量细胞
6、或混浊，应先离心以除去。如蛋白质浓度过高，应先行用生理盐水稀释后重新测定。 加入SS-S试剂的操作手法和速度、室温及比浊前的放置时间都会影响实验结果。故操作时应注意控制加入试剂的方式和比浊时间与标准管一致。应随气温改变，勤作标准曲线。,蛋白质定量试验磺基水杨酸-硫酸钠试验,第一节 脑脊液检查,二、一般检查：化学检查,临床意义,血屏通透性增高：脑膜炎；出血性脑病。 脑脊液循环障碍：脑部肿瘤；椎管梗阻如脊髓肿瘤、蛛网膜下腔粘连脑脊液蛋白质含量增高。 Froin综合征：脑脊液标本外观呈黄色胶冻状，且有蛋白-细胞分离现象，是蛛网膜下腔梗阻的脑脊液特征。,蛋白质定量试验磺基水杨酸-硫酸钠试验,第一节 脑
7、脊液检查,二、一般检查：化学检查,原理,紫红色化合物,酶试剂：葡萄糖氧化酶(glucose oxidase ， GOD)和辣根过氧化物酶(peroxidase ， POD)及4- 氨基安替比林和2-甲基苯胺显色系统,测定管,37水浴30min,葡萄糖O2H2O葡萄糖酸H2O2 （GOD） H2O2还原型显色剂H2O氧化型显色剂 （无色） POD （紫红色）,第一节 脑脊液检查,二、一般检查：化学检查,参考值,成人：2.5-4.4mmol/L,临床意义,减低：中枢神经系统细菌性、真菌性感染中枢神经系统肿瘤 增高：主要见于糖尿病患者。 鉴别细菌性和病毒性脑膜炎：细菌性脑膜炎显著降低。病毒性脑膜炎，
8、脑脊液葡萄糖含量正常。,第一节 脑脊液检查,二、一般检查：化学检查,氯化物测定-葡萄糖氧化酶法,原理,2CL-Hg（CNS）2HgCL2HCNS3 HCNSFe（NO3）3Fe （CNS）33HNO3 （紫红色）,参考值,成人120130mmol/L,第一节 脑脊液检查,二、一般检查：化学检查,氯化物测定-葡萄糖氧化酶法,临床意义,减低：细菌性或真菌性脑膜炎；氯化物测定对化脓性脑膜炎和结核性脑膜炎的鉴别有重要意义，脑脊液氯化物含量减低在结核性脑膜炎时为明显。低氯血症 增高：脑脊液氯化物含量增高见于尿毒症、呼吸性碱中毒等。,第一节 脑脊液检查,二、一般检查：化学检查,酶学检查,5,第一节 脑脊液
9、检查,二、一般检查：化学检查,原理,正电极,负电极,PH8.6缓冲液,2球蛋白,前清蛋白,球蛋白,球蛋白,1球蛋白,清蛋白,第一节 脑脊液检查,第一节 脑脊液检查,二、一般检查：化学检查,参考值,前清蛋白2%6%、 清蛋白55%65%、 1球蛋白3%8%、 2球蛋白4%9%、 球蛋白10%18%、 球蛋白4%13%。,第一节 脑脊液检查,二、一般检查：化学检查,临床意义,前清蛋白增加见于脑萎缩、脑积水及中枢神经变性疾病。清蛋白增加见于脑血管病变、椎管阻塞。和球蛋白增加见于脑膜炎、脑肿瘤。球蛋白增加可见于动脉硬化，脑血栓及脂肪代谢障碍性疾病。球蛋白明显增加见于脑肿瘤。,第一节 脑脊液检查,二、一
10、般检查：化学检查,7,免疫球蛋白质分析,原理,抗原和抗体在凝胶中或特殊缓冲液中特意结合，形成抗原抗体复合物。通过测定凝胶中抗原抗体复合物沉淀环直径或特殊缓冲液中抗原抗体复合物浊度计算出免疫球蛋白的含量。,参考值,IgG：10-40mg/L； IgA：0-6mg/L；IgM：0-13mg/L； IgE：极少量。,脑脊液免疫球蛋白的报告方式及参考值,s:血清 csf:脑脊液 TP:总蛋白 Alb:白蛋白 Ig指数: IgG、IgA、IgM计算公式相同。,第一节 脑脊液检查,二、一般检查：化学检查,7,免疫球蛋白质分析,临床意义,IgG增高：常见于神经梅毒、化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、病毒性脑膜炎、
11、小舞蹈病、神经系统肿瘤。 IgA增高：常见于化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、病毒性脑膜炎、肿瘤等。 IgM增高：常见于化脓性脑膜炎、病毒性脑膜炎、肿瘤、多发性硬化症等。 IgE增高：常见于脑寄生虫病等。,1、脑脊液蛋白质定性的方法有 、 、 、 2、脑脊液蛋白质定量的方法有 、 、 。临床常用的方法是 。 3、脑脊液氯化物检测方法有 、 、 。临床常用方法为 ，其参考方法为 。,练习题,4、结核性脑膜炎病人的脑脊液中 酶增高程度最显著，可用于结核性脑膜炎的诊断与鉴别诊断。 5、化脓性脑膜炎病人的脑脊液典型变化是葡萄糖 ，蛋白质 、氯化物 。 6、病毒性脑膜炎脑脊液中葡萄糖含量通常为 A、减低 B、
12、增高 C、正常 D、明显增高 E、明显减低 7、脑脊液蛋白质增高最明显的疾病是 A、化脓性脑膜炎 B、结核性脑膜炎 、病毒性脑膜炎 D、脊髓肿瘤 E、脑动脉硬化,练习题,练习题,8、脑脊液葡萄糖减低最明显的疾病是（ ） A、化脓性脑膜炎 B、真菌性脑膜炎 C、结核性脑膜炎 D、脑囊虫病 E、神经梅毒 9、 CSF氯化物明显降低见于（ ） A、化脓性脑膜炎 B、结核性脑膜炎 C、病毒性脑膜炎 D、乙型脑炎E、新型隐球菌性脑膜炎 10、引起CSF中葡萄糖浓度减低的疾病除外( ) A、结核性脑膜炎 B、隐球菌性脑膜炎 C、病毒性脑膜炎 D、化脓性脑膜炎 E脑膜瘤,二、一般检查,第一节 脑脊液检查,第
13、一节 脑脊液检查,二、一般检查：显微镜检查,红细胞：无；白细胞：成人（0-8）106/L；儿童为（0-15）106/L，新生儿为（0-30）106/L。白细胞分类以单个核细胞为主，多为淋巴细胞和单核细胞。,细胞计数,第一节 脑脊液检查,二、一般检查：显微镜检查,细胞检查,方法学评价 一般用脑脊液离心沉渣涂片，经瑞特染色后用油镜分类，但细胞形态常受影响。为了尽可能多地收集细胞和保持完好的细胞结构，国内一些单位已将细胞玻片离心沉淀仪运用于细胞学检查，提高了癌细胞的检出率，在细胞染色技术上也采用了多种方法。,二、一般检查：显微镜检查,第一节 脑脊液检查,细胞检查临床意义,红细胞增多 见于脑出血、蛛网
14、膜下腔出血、脑脊髓外伤、肿瘤、脑膜炎等。 白细胞增多 见于中枢神经系统感染、肿瘤、脑膜白血病等。病毒性脑(膜)炎、脊髓灰质炎等轻度增加（数十1000106/L），结核性脑膜炎中度增加（500106/L，以混合性细胞为主，中性粒细胞、淋巴细胞、浆细胞同时存在），化脓性脑膜炎显著增加（1000106/L，以中性粒细胞为主）。 中性粒细胞增多：见于化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎破溃期、乙型脑炎早期、脑出血等。,二、一般检查：显微镜检查,第一节 脑脊液检查,淋巴细胞增多：见于各种病毒性脑膜炎、真菌性脑膜炎（新型隐球菌性脑膜炎白细胞数可达数百106/L，以淋巴细胞为主）结核性脑膜炎早期及恢复期等。 嗜酸性粒
15、细胞增多：见于脑部寄生虫感染(如脑囊虫病)、变态反应等。 肿瘤细胞和白血病细胞 用细胞浓集法制备涂片，染色后查肿瘤细胞和白血病细胞，对 中枢神经系统恶性肿瘤和脑膜白血病的诊断具有重要价值。,细胞检查临床意义,二、一般检查：显微镜检查,第一节 脑脊液检查,细菌检查,正常脑脊液无细菌。脑膜炎症时，可直接涂片染色查细菌，或将标本离心后，取沉淀物涂片，提高阳性检出率。常规情况下，需涂片三四张，用于革兰染色、抗酸染色和特殊染色(如果标本蛋白含量太低，可在沉淀物中加少量血清以利固定)。,三、一般检查：显微镜检查,第一节 脑脊液检查,第一节 脑脊液检查,肺炎链球菌,第一节 脑脊液检查,金黄色葡萄球菌,第一节 脑脊液检查,脑膜炎双球菌,第一节 脑脊液检查,结核分枝杆菌,二、一般检查：显微镜检查,第一节 脑脊液检查,寄生虫检查,正常脑脊液无病原体。,第一节 脑脊液检查,三、临床应用,小 结 1 、一般性状检查：颜色，透明度，凝块或薄膜以及比密。 2、 化学检查：PH，蛋白质（定性，定量，电泳，免疫球蛋白）葡萄糖（定量分析），氯化物，酶学等。 3 、显微镜检查：细胞总数及细胞分类，细胞学检查（肿瘤细胞，特殊染色），寄生虫学检查。 4 、微生物检查：三大染色及细菌培养（脑膜炎奈瑟菌，链球菌，葡萄球菌等等）。,1、正常脑脊
