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1、1千里光总黄酮的抗炎作用研究作者：张文平，陈惠群，张文书，曹镐禄，黄真【摘要】目的探讨千里光总黄酮的抗炎作用。方法通过二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验、腹腔注射醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高实验以及小鼠棉球肉芽肿实验，观察千里光总黄酮的抗炎作用；制作小鼠气囊滑膜炎模型，测定炎症渗出物中白细胞数（WBC）和前列腺素 E2(PGE2)含量。结果千里光总黄酮对二甲苯致小鼠耳廓肿胀、醋酸致小鼠毛细血管通透性的增加以及小鼠棉球肉芽肿的形成均有明显的抑制作用；千里光总黄酮高中低剂量组炎症渗出液中白细胞数和 PGE2含量明显低于空白对照组。结论千里光总黄酮对多种炎症模型均有明显的对抗作用，为千里光抗炎作用的主要有
2、效部位之一，且此作用部分是与炎症因子 PGE2的产生和释放受抑制有关。【关键词】千里光；总黄酮；抗炎作用Abstract:ObjectiveToinvestigatetheanti-inflammatoryeffectofthetotalflavonoidsinSenecioscandensBuch-HamMethodsVariousinflammatorymodels，includingtheswellingofearinducedbyxyleneinmice，thepermeabilityincreaseofbloodcapillarybyaceticacidinmice，andtheco
3、tton-pelletgranulomaofthemicewereusedtoexploretheanti-inflammationofthetotalflavonoidsAirsacmodelsofsynovitisinmiceweresetupandtheamountofwhitebloodcell（WBC）andthecontentofprostaglandinE2(PGE2)weremeasuredininflammatoryexudanResultsThetotalflavonoidshadsignificantinhibitoryactiononaurisswellinducedb
4、yxyleneinmiceandpenetrationofcapillaryvesselinmiceThegeneralflavonoidsalsodecreasedtheproliferationofgranulomacausedbyimplantationcottonpelletinmicesignificantlyTheamountofWBCandcontentofPGE2intheexperimentalgroupswereobviouslylowerthanthoseinthecontrolgroupsConclusionThetotalflavonoidshassignifican
5、tanti-inflammation，whichisrelevanttotheinhibitionoftheproductionandreleaseoftheinflammatoryfactorPGE2Keywords:SenecioscandensBuch-Ham；Totalflavonoids；Anti-inflammatoryeffect千里光又名千里及、九里明等，系多年生菊科植物千里光SenecioscandensBuch-Ham 之全草，我国南方各省均有分布，主要生长于山坡、林缘、灌木丛中。该药性凉味苦，具有清热解毒、消炎凉血、明目止痛、去腐生肌之功效，临床上主要用于治疗上呼吸道感染
6、、急性扁桃体炎、急性菌痢、急性阑尾炎、急性肠炎、眼结膜炎等1 。植物化学研究表明，黄酮类是该药物的主要成分之一2 ，而黄酮类化合物在抗炎、抗变态反应、抗微生物、抗肿瘤等多2方面都有一定的药理作用3 。本研究采用多种炎症模型观察了千里光总黄酮(TotalflavonoidsofSenecioscandensBuch-Ham,TFS)的抗炎作用。现报道如下。1 器材1.1 药物及试剂千里光购于赣南医学院附属医院中药房。千里光全草切成小段，以体积分数为 95%乙醇回流提取 3 次，提取液合并后减压浓缩除去乙醇，水溶液以 50gL-1碳酸钠处理后以氯仿萃取 3 次，碱水层以 1molL-1HCl 酸化
7、至 pH2 后以醋酸乙酯萃取 3 次，水洗至中性，醋酸乙酯层浓缩成浸膏即得千里光总黄酮（totalflavonoids,TF） ，实验时用灭菌生理盐水(NS)溶解成适当浓度的药液供用。醋酸地塞米松，张家口云峰制药厂（批号 20040403） ；伊文思蓝，瑞士Fluka 公司进口分装（批号 20001014） ，其他试剂均为分析纯。1.2 动物昆明种小鼠，体重 2022g，雌雄不限，由江西省实验动物中心提供。1.3 仪器752 紫外光栅光度仪由上海分析仪器总厂生产，高速离心机由上海精密仪器仪表有限公司生产，净化工作台由苏州净化设备厂生产，电子分析天平由上海奇鸿仪器仪表有限公司生产。2 方法与结果
8、2.1 千里光总黄酮对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响健康小鼠 50 只随机分成 5 组，即 TFS 高、中、低剂量组、阳性对照组和空白对照组，每组 10 只。TFS 高、中、低剂量组，分别灌胃给药200，100，50mg/kg，阳性对照组给地塞米松组 1.8mg/kg，空白对照组给同体积生理盐水，1 次/d，连续 7d，末次给药 1h 后在小鼠右耳用注射器涂 0.02ml 的二甲苯，左耳作为自身对照，涂耳 1h 后处死，沿耳廓基线剪下两耳，用直径为9mm 的打孔器分别在两耳相应部位打孔，电子天平称重，左耳为对照，以两耳重量差为肿胀程度，并求肿胀度抑制率(%)。肿胀度抑制率(%)=(给药组肿胀度对照
9、组肿胀度)/对照组肿胀度。结果显示：与空白对照组相比，TFS 各剂量组(200，100 和 50mgkg-1)对小鼠耳廓肿胀有明显抑制作用，且随剂量增加抑制作用加强，地塞米松阳性对照组(1.8mgkg-1)对小鼠耳廓肿胀亦有极强的抑制作用。结果见表 1。表 1 千里光对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响(略)2.2 千里光总黄酮对冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响取健康小鼠 50 只，分组给药方法同“2.1”项，连续 5d，末次给药 1h 后各鼠均尾静脉注射 0.5%伊文斯兰生理盐水溶液 0.1ml/10g，随即腹腔注射 0.6%冰醋酸溶液 0.1ml/10g，20min 后脱臼处死，腹腔注射 6
10、ml 生理盐水，轻揉小鼠腹3部，剪开腹部，用吸管吸出洗涤液，加入生理盐水 10ml，3000r/min 离心15min，取上清液用紫外分光光度计（590nm）测 OD 值。腹腔注射稀醋酸能引起毛细血管通透性增加，使尾静脉注入的伊文思蓝染色液渗出至腹腔内，测定腹腔炎性渗出液的 OD 值可反映毛细血管通透性情况。结果显示：TFS 高剂量组和阳性对照组动物腹腔炎性渗出液的 OD 值明显低于空白对照组（P0.01） ，中剂量组与空白对照组 OD 值的差异有显著性（P0.05） ，低剂量组毛细血管通透性有降低趋势，但无统计学意义（P0.05） 。结果见表 2。表 2 千里光对醋酸所致小鼠毛细血管通透性的
11、影响(略)2.3 千里光总黄酮对小鼠棉球肉芽肿的影响50 只小鼠随机分 5 组，在乙醚浅麻醉下，左右两侧腋下皮下各埋入一灭菌棉球(重量为 5mg)，缝合皮肤，庆大霉素涂抹表面。4h 后给药，1 次/d，连续7d，剂量同 2.1 项。8d 后脱颈臼处死小鼠，剥离棉球肉芽组织，80烘 2h，称重，减去棉球重量即为肉芽组织重量，按 mg/100g 体重表示。结果显示：阳性对照组和 TFS 高剂量组小鼠棉球肉芽肿重量与空白对照组比较，差异有非常显著意义（P0.01） ，TFS 中剂量组与空白对照组比较，差异亦有显著意义（P0.05） 。表 3 千里光总黄酮对小鼠棉球肉芽肿影响(略)2.4 千里光总黄酮
12、对小鼠气囊滑膜炎的影响小鼠 50 只，于背部皮下注射空气 5ml，第 3d 及第 6d 再次注入空气各 3ml，维持气囊的膨胀。于首次注入空气的当天开始，连续灌胃 7d，剂量同“2.1”项，末次给药后 2h 囊内注射 30%蛋清 1ml，6h 后处死动物，于气囊内注入冰生理盐水(含肝素 50u/ml)2.5ml，轻轻按压，吸出 1ml，1000r/min 离心 10min，计数白细胞数，上清液用紫外分光光度法检测前列腺素 E2 含量，以 OD278 表示。结果显示阳性对照组和千里光总黄酮高中低剂量均能明显减少小鼠气囊中白细胞数量和 PGE2 含量。结果见表 4。表 4 千里光总黄酮对炎症小鼠气
13、囊内白细胞数和PGE2 的影响（略）3 讨论炎症是具有血管系统的活体组织对损伤因子发生的防御反应，是感染及其许多疾病的最基本病理过程。炎症的发生发展过程一般被认为分为 3 期，早期以毛细血管扩张、通透性亢进为主，中期为血小板吸附及白细胞游走，晚期为肉芽组织增生4 。二甲苯致小鼠耳肿胀模型和毛细血管通透性试验属于炎症反应的早期，小鼠气囊滑膜炎模型属炎症反应的中期，棉球肉芽肿试验属于炎症反应的晚期。本实验结果显示，千里光总黄酮既可抑制由于毛细血管扩张造成的肿胀、渗出增加的早期炎症，又可抑制白细胞游走的中期炎症，并对肉芽组织的增生的晚期炎症也有一定抑制作用，即具有明显的抗炎作用，且抗炎作用呈现明显的
14、剂量依赖性。前列腺素 E2 是炎症过程重要的炎症介质，可引起血管扩张，并可加强组胺和缓激肽升高血管通透性的作用。通过本实验研究发现千里光总黄酮可抑制体内炎性介质前列腺素 E2 的合成，因此千里光的抗炎作用机制之一可能是抑制4前列腺素 E2 的合成，使炎症反应减轻。【参考文献】1国家中医药管理局中华本草编委会.中华本草M.上海：上海科技出版社,199：1390.2陈录新,李宁,张勉,等.千里光的研究进展J.海峡药学,2006,18(4)：13.3唐栩,许东晖,梅雪婷,等.26 种黄酮类天然活性成分的药理研究进展J.中药材,2003,26(1)：46.4洪美玲.病理学M.北京：人民卫生出版社,1999：50.
