肝炎病毒n-(1)

《肝炎病毒n-(1)》由会员分享，可在线阅读，更多相关《肝炎病毒n-(1)（81页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。

1、肝炎病毒 hepatitis viruses,病原生物学教研室,肝炎病毒hepatitis viruses,指以损害肝脏为主，引起病毒性肝炎的病原体,肝炎病毒的类型,病毒 病毒科 核酸类型 传播方式 HAV 小RNA病毒 正单链RNA 粪-口 HBV 嗜肝DNA病毒 双链DNA 输血 HCV 黄病毒 正单链RNA 输血 HDV 负单链RNA 输血 HEV 杯状病毒 正单链RNA 粪-口,甲型肝炎病毒,甲型肝炎病毒（hepatitis A virus，HAV）首先是Feinstone于1973年应用免疫电镜技术在急性期肝炎患者粪便中发现的。 1982年国际病毒命名委员会将其分类为小RNA病毒科肠

2、道病毒属72型。1993年又被单列为肠道病毒科的嗜肝RNA病毒属（heparnavirus）。,形态与结构,基因组:线状+ssRNA，稳定性高。 衣壳:20面体立体对称，由VP1VP4等4种多肽组成，其中VP1是主要的衣壳蛋白。,易感动物和细胞培养 黑猩猩、狨猴、红面猴对HAV易感。 HAV可在非洲绿猴肾细胞、人胚肾细胞、传代猴肾细胞、人胚肺2倍体成纤维细胞和人肝癌细胞株等细胞中增殖。,生物学性状,抵抗力 HAV对乙醚、酸、热 (604h) 稳定，在20贮存数年仍保持感染性。 HAV经高压、煮沸5min、UV、甲醛以及氯等处理均可使之灭活。 鉴于HAV有相当大的抵抗力，因此对肝炎患者及其排泄物

3、处理应特别小心。,生物学性状,传染源与传播途径 传染源：多为患者和隐性感染者。患者潜伏期后期及 急性期的血液和粪便均有传染性。 传播途径：主要通过粪-口途径传播。,致病性与免疫性,致病机制 HAV主要侵犯儿童和青年，且多为隐性感染: HAV 口 小肠淋巴结内增殖 血（病毒血症） 肝细胞内增殖 致病（出现临床症状）。 机体的免疫应答也参与了肝脏的损伤，即抗HAV在肝脏与HAV结合形成免疫复合物，或Tc(CTL)对感染病毒肝细胞的攻击所致。,致病性与免疫性,(潜伏期 排毒高峰),(急性期 排毒量 Ab ),临床表现,1.黄疸前期 2.黄疸期 3.恢复期,免疫性 感染后可产生持久免疫力。 早期：Ig

4、M；同时，从粪便中检出sIgA抗体。 恢复期：IgG，并可持续多年； 特异细胞免疫应答。,致病性与免疫性,实验室诊断不依靠分离病毒，而采用下述方法： (一)血清学检查：检测抗HAV IgM有助于早期诊断；抗HAV IgG有助于流行病学调查；测粪便中抗HAV IgA也有助于诊断。 (二) 病毒检测：免疫电镜检测HAV颗粒 (三) 病毒核酸检测：应用PCR技术检测HAV的RNA,微生物学检查法,HAV感染后以隐性感染和无黄疽型病例占多数，因此传染源较难控制。 预防：一般性预防：搞好卫生。 特异性预防：我国试用减毒甲型肝炎活疫苗(H2 株和L1株)；国外已生产灭活疫苗。 丙种球蛋白可应急预防。 治疗

5、：甲型肝炎为自限性疾病，经治疗可痊愈，不转慢 性亦不留后遗症。 用药宜简。,防治原则,乙型肝炎病毒,1. HBV形态结构,大球形颗粒（Dane颗粒）,小球形颗粒,管形颗粒,Dane颗粒形态 （完整的病毒，具有传染性）,HBsAg,HBcAg,HBV DNA,DNAP,（外膜蛋白）,（核衣壳蛋白）,大球形颗粒（Dane）：直径42 nm,Dane颗粒,双层外壳,核 心,外衣壳：相当于一般病毒包膜,内衣壳：相当于一般病毒核衣壳,双股未闭合DNA,DNA多聚酶,HBV的小球形颗粒,主要存在形式,HBV的管形颗粒,串联的小球形颗粒,HBV的小球形颗粒,HBV的管形颗粒,空心汤团,2、HBV的基因组结构

6、,3.2Kb 双股环状未闭合DNA，长链（ L）为负链，短链（S）为正链 负链（ L）含有4个开放读码框架（ORF） 即P、S、C、X,C 区,X 区,S 区,P 区,乙型肝炎病毒基因结构模式,正链,负链,重复序列,S区：有S基因,前S1基因和前S2基因,分别编码HBV的 外衣壳蛋白(HBsAg,Pre S1和Pre S2抗原) C区: 有C基因和前-C基因,分别编码HBV的HBcAg、 HBeAg. P区: 最长,编码DNA多聚酶 X区: 编码HBxAg,可反式激活一些细胞的癌基因及 病毒基因,可能与肝癌的发生发展有关,HBV的复制方式很特殊,在复制过程中有逆转录过程,与逆转录病毒相似,逆转

7、录后的DNA可整合至靶细胞的染色体,HBV的复制,超螺旋DNA,转录,2.1kbRNA,3.5kbRNA,转译外衣壳蛋白,转译内衣壳蛋白 及子代DNA,逆转录,复制,逆转录的DNA可 整合至细胞染色体,HBV复制周期示意图,S基因可通过2.1kbRNA为信使RNA而转译HBsAg,故在部分HBV感染者中,虽无病毒复制,但长期产生HBsAg,3、HBV的抗原组成,表面抗原 HBsAg 外衣壳抗原 前S1抗原 前S2抗原 内衣壳抗原 核心抗原 HBcAg e抗原 HBeAg,（1）表面抗原 HBsAg,存在于三型颗粒中 分亚型（a, d/y, w/r, adr） 是HBV感染的主要标志 具有免疫原

8、性，产生抗-HBs： 中和抗体具有保护力：是乙肝恢复标志 Pre S1、Pre S2及抗- Pre S1和抗- Pre S2,乙 肝,出现时间：HBV感染后26个月（潜伏期）,持续时间：,急性自限性肝炎：6个月内可消失,慢性肝炎或慢性HBsAg携带者：可持续阳性,HBsAg 有抗原性而无传染性,HBV,S 基因,整合,肝细胞 DNA,持续表达,“空心汤团”,HBsAg,乙 肝,HBsAg 的亚型,adr,adw,ayr,ayw,长江以北,长江以南,新疆、西藏、内蒙等,HBsAg,乙 肝,出现时间：急性感染后期或HBsAg 消失后,抗-HBs为保护性抗体（中和抗体）,其出现标志着HBV感染进入恢

9、复期,抗-HBs 对相同 HBsAg亚型的HBV再感染有免 疫力，但对不同亚型的HBV保护力不完全,抗-HBs,（2）e抗原 HBeAg,HBeAg为可溶性蛋白质 由前C和C基因共同编码产生 可游离存在于血液中 为病毒复制及强传染性的指标 产生抗HBe，具有一定保护力 （前C基因变异者除外）,血清HBeAg阳性者中，HBV DNA阳性率 为92%左右,乙 肝,HBeAg是前C和C基因共同编码产物,HBV C基因,前C区,C 区,前C / C 蛋白,HBeAg,HBcAg,表 达,分泌到细胞外,HBeAg只存在于血清中,乙 肝,抗-HBe,出现时间：随着HBeAg的消失而出现,抗-HBe的出现标

10、志着病毒复制减少、传染性降低,抗-HBe阳性者中，16.3%30%左右HBV DNA 仍阳性 可能与前C基因变异有关,易加重病情、易演变为肝硬化,-干扰素疗效亦较差,乙 肝,PreC,C 区,HBcAg,HBeAg,PreC区的变异使不能转译出HBeAg，而出现HBeAg（-），抗-HBe(+)的HBV DNA(+)患者,（3）核心抗原 HBcAg,仅存在于Dane颗粒核心结构的表面 不易在血液中检出 是蛋白质，抗原性强，刺激机体产生抗HBc非中和抗体，无保护力 表明病毒在复制，血清具有传染性,抗-HBc,抗HBc-IgM：是HBV近期感染或慢性感染者病毒活动的标志,抗HBc-IgG：凡“有过

11、” HBV感染者均可阳性,HBcAg的免疫原性最强,持续时间：618个月,HBV DNA,是病毒复制和有传染性的最直接的证据,检测方法：斑点杂交法、PCR法,DNAP（DNA多聚酶）：是逆转录酶,也是直接反应病毒复制的指标之一,乙 肝,HBxAg：也可作为病毒复制的标志,HBxAg具有反向激活作用，可调控病毒基因转录水 平，并对宿主癌基因可能有激活作用。,乙 肝,4. HBV的组织培养和动物模型,HBV人工培养尚未成功 用分子生物学技术的细胞培养成功： HBV DNA导入肝癌细胞 /S基因转染制备疫苗,HBV感染动物模型：黑猩猩、树鼩,其他嗜肝DNA病毒感染的动物模型： 土拨鼠肝炎病毒（WHB

12、V）、鸭肝炎病毒（DHBV）,5、抵抗力,1、100C 10min、0.5%过氧乙酸灭活 2、耐干燥、紫外线、低温,乙型肝炎病毒的致病性与免疫性,一、传播方式 二、所致疾病 三、致病机制 四、免疫性,传播方式,1、输血传播 2、性接触传播 3、垂直传播,医源性传播,输血或注射器、血透机、内窥镜等 消毒不严格,乙 肝,垂直传播,主要途径：围产期（新生儿皮肤、粘膜 有破损而接触母血）和产后密切接触,经胎盘及生殖细胞传播：有可能,垂直传播是我国HBV感染的主要模式,乙 肝,易感人群,（1）感染者年龄高峰：低发病区：2040岁,高发病区：48岁,（2）男女感染率相近，但发病者男多于女,（3）感染时年龄

13、越小，越易形成慢性肝炎、肝硬化 或慢性HBV携带状态（免疫耐受）,（4）感染后对相同HBsAg亚型的HBV再感染有持久 免疫力，但对不同亚型的保护力不完全,所致疾病,急性肝炎 爆发型肝炎 慢性肝炎,HBV的致病机制,病毒致机体免疫应答低下： 易形成HBsAg无症状携带 病毒变异：前C和C基因变异逃逸免疫 细胞介导的免疫损伤：为主 免疫复合物性的免疫损伤： 肝外损伤 自身免疫反应的免疫损伤： 肝特异性脂蛋白抗原诱导,免疫病理损伤,乙 肝,临床特点,1. 潜伏期：26个月,急性感染,慢性乙型肝炎,肝硬化,2. 临床类型：,乙 肝,慢性HBsAg携带者：无临床症状，HBeAg亦可 阳性。大部分肝组织

14、有病理变化,预 后,婴幼儿期感染：近90%转为慢性,成年人感染：85%以上可痊愈，10%左右转为慢性,慢性乙肝,肝硬化,肝 癌,10%,10%,“三部曲”,乙型肝炎的特点,我国约有40%-60%人群曾受到过HBV的感染 表现急性乙肝的仅占0.1%-1%，亚临床30%-75%，慢性乙肝1%-5%，乙肝病毒携带7%-20% 急性乙肝如治疗不彻底，10%患者可转为慢性乙肝,免疫性,1、保护性免疫 抗HBsAg抗体主要中和抗体 针对HBeAg的细胞免疫是清除病毒的主要机制 2、免疫损伤 针对HBsAg、 HBcAg、 HBeAg的细胞免疫造成肝细胞损伤 抗HBsAg抗体可致免疫复合物损伤,HBV与原发

15、性肝癌,流行病学方面：携带者高于正常人217倍 血清学检查：肝癌HBV检出率高 动物模型：土拨鼠 病毒分子结构：肝癌患者有整合DNA,HBV与原发性肝癌有明显相关性,乙型肝炎病毒感染的诊断与防治,一、微生物学检查 二、防治,标本类型：血清 检测方法：血清学诊断：“两对半”测定 病毒核酸测定,微生物学检查,乙肝“二对半”及HBV DNA的 检测及意义,HBsAg、抗HBs HBeAg、抗HBe 抗HBc,乙肝“二对半”,HBV DNA,发现无症状携带者 献血员筛选必检指标,HBsAg,乙型肝炎抗原、抗体检测结果的分析,HBsAg（+）：急、慢性肝炎及无症状携带者，有传染性，如伴有HBeAg（+），表示病毒复制，则有很强传染性,抗-HBs（+）：感染已恢复或痊愈，效价高预后更好， 抗-HBe（+）表机体已获一定的免疫力 抗-HBc IgM常提示HBV处于复制状态,病毒抗原抗体系统检测结果分析,新生儿和儿童接种 高危人群接种 意外受染者接种,防治原则,控制传染源，切断传播途径 加强血制品检测，严格筛选献血员 预防医源性传播 人工自动免疫： 疫苗（血源性、基因工程) 人工被动免疫：紧急预防 高效价人血清免疫球蛋白 （H