怎么查找质粒图谱.doc

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1、经常在坛子里看到一些人求助质粒图谱,很多时候我发现其实有些质粒图谱还是很容易找到了,刚开始帮忙查找了下,还公布了一些查找质粒图谱比较好的网站,后来看得多了,很多时候,这样的帖子直接跳过了。今天又看到几个求质粒图谱的帖子,因此决定就查找质粒图谱的方法,写个总结帖子,希望对虫子们有些帮助。这些方法,大部分是自己学习的过程中积累的,也许总结得还不够全面,望其他虫友指正。方法一:安装软件Vector NT 做分子实验,经常和不同的质粒打交道,了解各种质粒的图谱信息是必需的,invitrogen公司的这款软件绝对是分子生物学虫子们的福音,功能强大、界面美观,使用起来很人性化。后面的很多方法都是基于在这款

2、软件的使用之上,因此个人觉得要想对质粒图谱了解更直观,安装这款软件是非常必要的。而且,一旦安装了这款软件,你就发现这款软件的软件包里面会包括invitrogen公司的所有质粒图谱信息和其他比较常见和经典的质粒图谱(不是有虫子求pRS系列质粒吗?帖子链接http:/ 这个之前有人求助质粒图谱时,我在回应求助帖里面公布过几个我经常用的网址,估计不是专题,很多人没看到,现在在此重新总结下1.Vector Database地址:https:/www.lablife.org/g?a=vdb这个网站很页面很人性化,直入主题,也是我经常用到一个网站,比如同样这个帖子求pRS类质粒图谱(注意,是一类质粒图谱,

3、没关系,照样能找到),直接在搜索框输入pRS,可以看到,之类质粒一共有三十多个。找到自己需要的质粒名称,点击进入,就可以看到质粒图谱了拿第一个质粒pRS413举例,如上图,质粒图谱是不是很难看,对,我也觉得很难看,没关系,看见view sequence了吗?点击进入,我们就得到该质粒图谱的序列了。如何得到比较好看的质粒图谱呢,看到GeneBank了吗?对,熟悉vector的虫子们肯定知道该如何做了,对,点击进入,如下图,复制所有的代码部分,新建txt文件,粘贴上代码后,将文件扩展名由txt更改为gb格式,导入vector,你就可以在vector里面看到质粒图谱了。因为这个网站我经常用,并且和N

4、CBI网站的运用方式一样,以及和Vector软件的配合使用,因此讲解比较啰嗦。2.Vector DB网址:http:/genome-www.stanford.edu/vectordb/vector.html这个网站我也用得比较多,总结和分类都比较完整。基本包括了所有表达系统的质粒信息。不过唯一有一点不爽的就是,这个网站竟然没有搜索栏啊,太不人性化了。那如何在那么多质粒信息中查找到我们所需要的质粒的信息呢?没关系,我们有网页字符查找功能,见红色标记部分。方法是:网页工具栏 编辑-在此页上查找,然后输入你的质粒名称,就可以了。比如:我们输入pRS,是不是就和搜索栏一样出现有用信息了?点击我们需要的

5、质粒进入下以页面,以质粒pRS303为例,如下图。有用信息除了对该质粒进行的一些描述性语言外,最重要的要算是红色标记部分了,sequence link进入是该质粒的序列。NCBI link,点击直接进入了NCBI,如何在NCBI中得到质粒图谱,下面将进行详细解释。3NCBI网址:http:/www.ncbi.nlm.nih.gov/真不好意思,这么重要的网站,留到这时候才介绍,NCBI功能很广泛,其他功能我就不介绍了,重点介绍如何用NCBI查找质粒图谱信息。如下图,search下拉框中选中Nucleotide,搜索栏输入质粒名称,拿pRS303举例:search后,得到搜索结果,如下图,点击右

6、边的send to,选中file,genebank等选项,点击Create File选项,得到一个gb格式的文件,导入vector软件中,就得到了我们需要的质粒图谱了。4其他查找质粒图谱的网站:寒梅砺剑阁(不是很全)http:/ 其实也是一些网站,因为这些网站除了得到质粒图谱等信息,还可以得到关于质粒使用方面的信息,因此单独拿出来做一个分类。做分子的虫子都知道,现在很多质粒,特别是应用比较广泛的质粒都一些公司商业化的质粒,基本是由一个质粒你就会联想到一个公司的名字。 比如简单的,克隆载体pMD18-T,TaKaRa,有木有;pGM-T,天根,有木有;一些表达载体,使用最广泛的,pET系列,No

7、vagen公司(默克)的;有双MCS的Duet系列载体,Novagen的;毕赤酵母表达质粒pPIC3.5k,pPIC9k,pPICZA,pPICZaA等等,都是invitrogen的;另外一些pYES酿酒酵母表达系统,也是invitrogen的,因此知道常见的质粒是哪个公司的,去他们公司网站上肯定可以找到该质粒的相关信息。比如:这个虫子求pGM-T载体序列,见帖子http:/ 有些质粒是经过改造的,所以通过上述方法不能查询到相应信息。这时,可以在google scholar中输入质粒名称,可以直观地看哪些学者在何文章中使用了该质粒,从而可了解到质粒的来源;或者籍此向作者咨询或索取。另外介绍下如

8、何通过文献查找经过改造的质粒的图谱信息,Kuhlman, T. E. and E. C. Cox (2010). Site-specific chromosomal integration of large synthetic constructs. Nucleic Acids Res 38(6): e92.这篇文献,介绍了一种大肠杆菌染色体整合的方法,文中介绍了三个质粒,是由作者自己改造了,如何查找到这三个质粒图谱了呢?首先在PubMed中搜索到该文献,如下图。很多人,找到文献,仅仅将文献下载下来就OK了,其实还有很多有用的信息,比如文章的supplementary,还有如上图右边的标记部分,Nucleotide,protein都是一些很重要的信息。点击右边的Nucleotide,进入如下页面,看,文中涉及到的六个质粒序列全都有,点击进入,按照方法二中,NCBI下载质粒图谱的方法就可以得到这几个质粒的图谱,当然,前提是该文章的作者已将将载体信息上传了NCBI。 Last edited by susizheng on 2011-4-20 at 20:06

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