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1、1不同产地牡丹皮提取物的降血脂作用研究作者：巫志峰，李鹏，许舜军，杨柳【摘要】 目的探讨不同产地牡丹皮（安微铜陵产凤丹皮和云南昆明产滇丹皮）提取物的降血脂药理作用研究并评价其对血液流变学指标的影响，对其药效作用进行比较。方法建立大鼠高脂血症动物模型，同时给予丹皮提取物进行灌胃给药 28 d，末次给药后取血检测血清中血脂水平和血液流变学指标。结果模型组高脂血症大鼠血清甘油三酯（TG） 、总胆固醇（TC） 、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）及血液流变学指标全血粘度（b） 、血浆粘度（p） 、血小板聚集率（PA）及纤维蛋白原（Fib）较正常组明显升高（P0.05） 。与模型组比较，道地药材凤丹皮提取
2、物组 TC,LDL-C,b（50s-1）,p,PA,Fib 明显降低（P0.05） ；滇丹皮提取物组 LDL-C、Fib 明显降低（P0.05） 。结论不同产地牡丹皮降血脂药效不同，在药材选用上，应结合此特点加以区别和质控。 【关键词】 牡丹皮； 降血脂； 血液流变学； 大鼠Abstract：ObjectiveTo study the anti-hyperlipidemia effects of extracts from different species of Cortex Moutan (mainly derived from P. sufruticosa Anhui and Pdela
3、vayi Yunnan) in rats. Methods In this study, the extracts were administered i.g. into fatemulsion-induced hyperlipidemia model rats for 28 daysThe serum TC, TG, LDL-C and hemorheology indices were determined after the last administration. ResultsThe TG, TC, LDL-C, b, p, PA, Fib of the hyperlipidemia
4、 rats in the control group were increased significantly (vs. normal, P0.05). The P. sufruticosa extracts decreased TC, LDL-C, b (50s-1), p, PA and Fib significantly (vs. control, P0.05); Pdelavayi extracts decreased LDL-C and Fib significantly (vs. control, P0.05).ConclusionThe extracts from differe
5、nt species of Cortex Moutan show different anti-hyperlipidemia effects in rats, which should be taken into account in their application and quality control.Key words：Cortex Moutan; Anti-hyperlipidemia; Hemorheology; Rats牡丹皮系毛茛科植物牡丹 Paeonia suffruticosa Andr.的根皮，为常用中药材之一，传统认为其具有清热凉血、活血化瘀的功效。国内外学者已对牡丹
6、皮的化学成分进行了深入的研究，从中分离得到数十种化学成分，主要包括单萜及其苷、酚酮、鞣质等，药材所含有生理活性的化学成分多为次生代谢产物。本研究项目前期已建立牡丹皮液相色谱指纹图谱，并采用液质联用技术对安微铜陵产2凤丹皮的化学成分进行了分析1,2 。本文在此基础上拟对不同产地牡丹皮的药用功效进行比较，即建立高脂血症动物模型，初步评价不同产地牡丹皮提取物对其血脂水平及对血液流变学指标的影响，从而为植物药质量检测和控制提供应用依据。1 材料与仪器1.1 动物大鼠 40 只，合格证号：0008210，购自广州中医药大学实验动物中心。所有动物分笼饲养于我院中心实验室实验动物房，采用标准化光照，自由饮水
7、、进食，定期更换垫料，适应环境 7d 后实验。1.2 试药牡丹皮样品处理：牡丹皮样品购自安徽铜陵凤凰山产凤丹皮（2005-01 收集）和云南昆明官渡药材公司滇丹皮（2004-10 收集，来源于Pdelavayi） 。取牡丹皮粉末适量，置 1 000 ml 圆底烧瓶中，加 10 倍量的蒸馏水，浸泡 30 min，置套式恒温器回流 30 min，4 层纱布滤过，加 10 倍量的蒸馏水再回流提取 2 次。合并滤液，减压浓缩至 0.5 g (生药)/ml，摇匀。即得样品溶液，实验临用前新鲜配制；脱氧胆酸钠，中国医药（集团）上海化学试剂公司生产，批号：F20030714；1，2-丙二醇，广州化学试剂厂生
8、产，批号：200402013。胆固醇，广州器化医疗设备有限公司生产，批号：041118；其他试剂均为市售分析纯试剂。1.3 检测仪器血清血脂检测：取血 2 ml 于无抗凝试管，以 3 000 r/min 离心 10 min 分离血清，采用 Modular-020 全自动生化仪检测。血液流变学指标检测：取血 2 ml（误差0.1 ml）于枸橼酸钠抗凝的试管，以 3 000 r/min 离心10 min 分离血浆，采用日本东亚公司 Sysnex CA-6000 型全自动血凝仪进行分析检测。2 方法2.1 试剂配制脂肪乳剂的制备：参照文献，取猪油 25 g 放在 200 ml 的烧杯里，放在磁力搅拌
9、器上加热，待温度升到 100时，加入 10 g 胆固醇，溶化，再加入 1 g 丙赛优，充分搅匀，然后加入 25 ml 吐温 80，制成油相。同时在另一烧杯中加入 30 ml 蒸馏水和 1，2-丙二醇 20 ml。放在电炉上加热至 60，然后加入 2 g 脱氧胆酸钠，充分搅拌直到完全溶解，制成水相。然后将水相加入油相，充分混匀，即制成脂肪乳剂。2.2 动物分组实验分为正常对照组 10 只、阴性对照组 8 只，凤丹皮提取物组 12 只，滇丹皮提取物组 12 只。2.3 给药方法建立大鼠高脂血症动物模型，正常对照组不给予任何灌胃，阴性对照组只给予脂肪乳剂灌胃(10 mlkg-1 )，凤丹皮提取物组和
10、滇丹皮提取物组每天上午给予脂肪乳剂灌胃(10 mlkg-1 )，同时给予丹皮提取物灌胃(10mlkg-1 )，给药 28 d。33 结果数据使用 PEMS 统计包 3.0 及 SPSS 15.0 进行处理，计量资料比较用 ANOVA 和 LSD-t 检验。其中，实验过程灌胃失误，造成动物死亡 2 只及未能取到血的 2只，其余均为末次给药后取血，检测生化指标：血清甘油三酯（TG） 、总胆固醇（TC） 、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C） 、低切全血黏度（b10s-1） 、中切全血粘度（b50s-1） 、高切全血黏度（b200s-1） 、血浆粘度（p） 、血小板聚集率（PA）及纤维蛋白原（Fib）
11、。3.1 不同产地牡丹皮提取物对高脂血症大鼠血清血脂的影响 结果见表 1。造模后，阴性对照组（模型组）的 TC，TG，LDL-C均明显高于正常对照组（P0.05） ，表明高脂血症动物模型造模成功。与模型组比较，凤丹皮提取物组 TC 和 LDL-C 明显降低（均 P0.05） ；滇丹皮提取物组亦有降脂作用，其中LDL-C 明显降低（P0.05） 。表 1 不同产地牡丹皮提取物对高脂血症大鼠血清血脂的影响（略）与模型组比较, *P0.053.2 不同产地牡丹皮提取物对高脂血症大鼠血液流变学指标的影响 结果见表 2。造模后，模型组 b（10 s-1） ，b（50 s-1） ，p， PA，Fib 均明
12、显高于正常对照组（P005） 。与模型组比较，凤丹皮提取物组的 b（50 s-1） ，p，PA，Fib 明显降低（P0.05） ；滇丹皮提取物组亦有降低作用，其中 Fib明显降低（P0.05） 。表 2 不同产地牡丹皮提取物对高脂血症大鼠血液流变学指标的影响（略）与模型组比较, *P0.054 讨论如前所述，传统认为牡丹皮具有清热凉血，活血化瘀的功效，而据现代药理实验研究报道35 ，牡丹皮的药理作用主要体现在抗动脉粥样硬化、降血压、降血糖、镇静、抗惊厥、保肝等作用已被实验研究所证实，其中牡丹皮的心血管系统作用尤为突出，即其主要活性成分丹皮酚等具有抗动脉粥样硬化、降血压、心肌细胞保护、血液流变性
13、加快局部的微循环、降血糖等多方面的作用，有鉴于此，本文复制了大鼠高脂血症模型来比较不同产地丹皮提取物的降血脂药理作用，并试图从该角度说明不同产地丹皮的药效特点，以初步提供药材丹皮的质量检测与控制的依据。高脂血症又称脂质代谢紊乱或异常，是导致脂肪肝、动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）等多种疾病的因素。高脂血症的病因学、预防和治疗已经成为目前的研究热点，但至今药物治疗尚未明显突破，本研究中采用的大鼠高脂血症模型通过增加脂肪乳剂中猪油的含量，调整了脂肪乳的比例，经消化道4给予，形成时间也相对较长，与人类因膳食结构改变而形成的高脂血症相似，可研究环境因素对高脂血症形成的影响，并明确评
14、价调血脂药物的药理作用6 。本实验血脂检测结果显示，凤丹皮提取物明显降低高脂血症大鼠模型的TC，TG 和 LDL-C，滇丹皮提取物虽亦有降脂作用，可明显降低 LDL-C，对 TC 和TG 亦有降低趋势，但无显著性差异，表明凤丹皮提取物作为道地药材对血脂增高有较好的干预作用。通过降低血脂特别是降低 LDL-C，减少脂质在细胞内的沉积。血液流变学检测结果表明，凤丹皮提取物能够显著降低 b，p 及 Fib，但对 PA 的影响不明显，滇丹皮提取物只显著降低 Fib。以上实验结果提示：凤丹皮提取物对高脂血症大鼠的血脂水平和血液流变学指标的影响均比滇丹皮提取物显著，其作用机制可能与减低血液中 Fib 的含
15、量有关。结合前期建立牡丹皮指纹图谱对商品药材进行质量评价的结果6 ，即大多数药材样品所含成分基本一致，但各成分比例不尽相同。特别是滇丹皮（来源于Pdelavayi）与指纹图谱共有模式差异较大。滇丹皮从化学成分的种类、含量及含量比例上与牡丹皮有本质的区别。因此，在药材选用上，应结合上述药效特点加以区别应用，而药效其他方面及作用机制具体还有何不同尚待进一步的研究。【参考文献】1 许舜军，杨 柳，张 勉，等. 牡丹皮化学成分的液相色谱-飞行时间串联质谱分析J.药学学报，2006,41(9)：852.2 许舜军, 李 鹏, 杨 柳，等. 牡丹皮高效液相色谱指纹图谱研究J. 中国中药杂志, 2006, 31 (20): 1677.3 戴 敏，李后开. 丹皮酚对动脉粥样硬化家兔血管平滑肌细胞增殖的影响J.中国药理学通报，2006,22(5)：587. 4 范俊安，夏永鹏，申明亮，等. 近 15 年牡丹皮研究文献分析J.中国中医药信息杂志，2006,13(6)：103.5 张健萍，李连珍，赵红江，等. 牡丹皮的化
