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1、厌氧性细菌,（anaerobic bacteria）,概述,必须在无氧环境下，才能生长繁殖 根据能否形成芽胞，可分为 厌氧芽胞梭菌属 无芽胞厌氧菌,第一节 厌氧芽胞梭菌属,(Clostridium),概述,大多为严格厌氧菌，革兰染色阳性 芽胞直径比菌体粗，使菌体膨大呈梭状，对热、干燥和消毒剂均有强大的抵抗力 除产气荚膜梭菌等极少数例外，均有周鞭毛，无荚膜 多数为腐生菌 少数为致病菌,一、破伤风梭菌,（Ctetani）,概述,破伤风（tetanus）的病原菌 发病后机体呈强直性痉挛、抽搐、可因窒息或呼吸衰竭死亡,生物学性状,形态与染色 菌体细长，有周身鞭毛、无荚膜 形成芽胞后，使细菌呈鼓槌状 革
2、兰染色阳性 培养特性和生化反应 严格厌氧 血平板上，有溶血 不发酵糖类，不分解蛋白质,生物学性状,抵抗力 芽胞抵抗力很强 7580C 10min仍保持活力 100C1小时可完全被破坏 在干燥的土壤和尘埃中可存活数年,致病性与免疫性,致病条件,该菌无侵袭力，仅在局部繁殖，其致病作用完全有赖于病菌所产生的毒素 伤口需形成厌氧微环境 伤口窄而深（如刺伤） 有泥土或异物污染 大面积创伤、烧伤，坏死组织多，局部组织缺血 同时有需氧菌或兼性厌氧菌混合感染的伤口,致病因子,对氧敏感的破伤风溶血毒素(tetanolysin) 质粒编码的破伤风痉挛毒素(tetanospasmin) 引起破伤风的主要致病物质 属
3、神经毒(neurotoxin)，毒性极强(小鼠LD50为0.015ng，对人致死量1g) 为蛋白质，不耐热；可被蛋白酶破坏,破伤风痉挛毒素,结构 菌体内时为一条分子量约150 000的多肽 释出菌体时，即被裂解为一条分子量约50 000的轻链（A链）和一条100 000的重链（B链），但其间仍由二硫键连结在一起 B链是与神经节苷脂结合的单位 A链则具有毒性作用,破伤风痉挛毒素作用机制,与神经系统的结合： 重链识别运动神经元上的受体并与之结合，促使毒素进入细胞内形成小泡 内在化作用 小泡从外周神经末稍沿神经轴突逆行向上，到达运动神经元胞体，进入传入神经末稍，最终进入中枢神经系统,破伤风痉挛毒素作
4、用机制,膜的转位 通过重链N端的介导产生膜的转位使轻链进入胞质溶胶 胞质溶胶中作用靶的改变 轻链发挥毒性作用，阻止抑制性神经介质-氨基丁酸的释放，使肌肉活动的兴奋与抑制失调，造成麻痹性痉挛,破伤风痉挛毒素作用机制,对脑干神经和脊髓前角神经细胞有高度的亲和力 毒素与中枢神经组织结合非常牢固，一旦结合即非抗毒素所能中和,所致疾病,潜伏期 可从几天至几周 典型的症状 苦笑面容 角弓反张 其它,免疫性,破伤风免疫属外毒素免疫，主要是抗毒素发挥中和作用 一般病后不会获得牢固免疫力 获得有效抗毒素的途径是人工免疫,微生物学检查法,一般不进行涂片镜检和分离培养 典型的症状和病史即可作出诊断,防治原则,防止创
5、口厌氧微环境的形成 注射类毒素以进行特异性预防 对可疑外伤病人，可立即注射破伤风抗毒素（tetanus antitoxin，TAT）以获得被动免疫作紧急预防 对已发病者，特异性治疗包括早期足量使用抗毒素及抗生素两方面,二、 产气荚膜梭菌,(Cperfringens ),生物学性状,形态与染色,两端几乎平切的革兰阳性粗大杆菌 芽胞位于次极端，呈椭圆形，不大于菌体 无鞭毛 在体内有明显的荚膜,培养特性,厌氧。其最适生长温度45C，繁殖周期为8分钟 血琼脂平板上，双层溶血环 蛋黄琼脂平板上，有Nagler反应现象 代谢活跃 牛奶培养基中，可出现“汹涌发酵”（stormy fermentation）,
6、分型,根据4种主要毒素（、）的产生情况，可分为5个毒素型 对人致病的主要为A型,致病性,致病物质,产气荚膜梭菌能产生10余种外毒素，有些外毒素即为胞外酶,产气荚膜梭菌主要和次要毒素及其分型,致病物质,毒素 以A型产生量最大 分解细胞膜上磷脂和蛋白形成的复合物，造成细胞溶解，引起血管通透性增加伴大量溶血、组织坏死、肝脏、心功能受损 在气性坏疽的形成中起主要作用 、毒素 引起坏死损伤和血管通透性增加,致病物质,肠毒素 不耐热的蛋白质，100C瞬时被破坏 在结肠经胰酶作用后，其毒力能增加3倍 整段肽链嵌入细胞膜，破坏膜离子运输功能 可作为超抗原,所致疾病,气性坏疽 由A型产气荚膜梭菌及其他梭菌引起
7、气性坏疽潜伏期短，发展迅速，病情险恶 卵磷脂酶、胶原酶、透明质酸酶、DNA酶等毒素的分解破坏作用，造成气肿及组织坏死 局部表现 全身状况 内源性感染,所致疾病,食物中毒 感染方式 腹痛、腹胀、水样腹泻；无热、无恶心呕吐，可自愈,微生物学检查法,直接涂片镜检 深部创口取材涂片 革兰阳性大杆菌 白细胞甚少且形态不典型 伴有其它杂菌 早期诊断能避免病人最终截肢或死亡,微生物学检查法,分离培养及动物实验 接种血平板或庖肉培养基，镜检及生化反应鉴定 取细菌培养液0.51ml静脉注射小鼠，进行动物实验 如怀疑产气荚膜梭菌性食物中毒，在发病后一日内，检出大于105病菌/克食品或106病菌/克粪便可确立诊断,
8、防治原则,预防 及时处理伤口，破坏和消除厌氧微环境 预防性的使用抗生素 治疗 局部感染控制 抗生素 抗毒素 高压氧舱法,三、肉毒梭菌,（Cbotulinum）,生物学特性,革兰阳性粗短杆菌 芽胞呈椭圆形，粗于菌体，位于次极端，使细胞呈汤匙状或网球拍状 有鞭毛，无荚膜。厌氧，营养要求不高 根据神经毒素的抗原性分AG 7个型，各型毒素只能被同型抗毒素中和 肉毒毒素不耐热，煮沸1分钟即可被破坏,致病性,致病物质 肉毒毒素(对人致死量为0.1g) 功能和致病机制与破伤风外毒素相似,作用机制,肉毒毒素作用于外周胆碱能神经，抑制神经肌肉接点处神经介质乙酰胆碱的释放，导致弛缓性麻痹 毒素经内化作用进入细胞内
9、由细胞膜形成的小泡中，不象破伤风毒素从外周神经末稍沿神经轴突上行，而是留在神经肌肉接点处,作用机制,肉毒毒素前体分子在原始状态时是与一些非毒性蛋白形成一种大小不等的复合物，复合物中的毒性分子可稳定存在于外环境和胃肠道。复合物进入小肠后，在碱性情况下介离，被吸收进入血循环 只有C型和D型毒素是由噬菌体编码，其他型毒素均由染色体决定,所致疾病,食物中毒 该病是单纯性毒素中毒，而非细菌感染 分布情况 临床表现与其它食物中毒不同，主要为神经末稍麻痹,所致疾病,婴儿肉毒病 感染者以6个月以内的小婴儿居多，为细菌芽胞直接感染 症状与肉毒毒素食物中毒类似，最先引人注意的症状是便闭，吸乳、啼哭无力。婴儿肉毒病
10、死亡率不高（1%2%） 极少数为成人伤口或手术后继发感染,微生物学检查法,标本 食物中毒患者 婴儿肉毒病患者 粪便、食物等标本可先80C加热10分钟 毒素检查,防治原则,加强食品卫生管理和监督，提高防范意识 尽早根据症状作出诊断，迅速注射A、B、E三型多价抗毒素，同时加强护理和对症治疗,四、 艰难梭菌,（ Cdifficile）,概述,新生儿肠道中正常菌群，可因长期使用抗生素引起的伪膜性肠炎 革兰阳性粗大杆菌，有鞭毛，有芽胞,致病性,产生A、B两种毒素，即肠毒素和细胞毒素 因长期使用抗生素导致菌群失调后可引起内源性感染 临床表现,第二节 无芽胞厌氧菌,概述,属人体内的正常菌群，包括革兰阳性和革
11、兰阴性的球菌和杆菌 在某些特定状态下，这些厌氧菌作为条件致病菌可导致内源性感染,一、主要种类、性状 和在感染中的作用,与人类疾病相关的主要无芽胞厌氧菌,革兰阴性厌氧杆菌,类杆菌属 脆弱类杆菌(Bfragilis)：临床上最常见的无芽胞厌氧菌分离株 呈多型性形态，有荚膜 类杆菌有典型的革兰阴性菌细胞壁，但其脂多糖无内毒素活性,革兰阴性厌氧球菌,有3个属，其中韦荣菌属最重要 咽喉部主要厌氧菌，常为混合感染菌之一,革兰阳性厌氧球菌,消化链球菌属，在临床厌氧菌分离株中，仅次于脆弱类杆菌 主要寄居于阴道 常因女性生殖道感染而引起厌氧菌菌血症，占1%,革兰阳性厌氧杆菌,丙酸杆菌 能发酵糖类产生丙酸 痤疮丙
12、酸杆菌（Pacnes） 双歧杆菌属 正常肠道菌群，在大肠中起重要的调节作用，只有齿双歧杆菌（B.dentium）与龋齿和牙周炎有关 真杆菌属,二、 致病性,致病条件,属正常菌群，在成为条件致病菌后，可引起内源性感染 感染条件 寄居部位改变 宿主免疫力下降 菌群失调 厌氧微环境,细菌毒力,改变其对氧的耐受性 与混合感染的需氧菌或兼性厌氧菌协同作用 通过菌毛、荚膜等表面结构吸附和侵入上皮细胞和各种組织 产生多种毒素，胞外酶和可溶性代谢物,感染特征,内源性感染 无特定病型 分泌物或脓液粘稠，乳白色、粉红色、血色或棕黑色，有恶臭，有时有气体 使用氨基糖苷类抗生素长期无效 分泌物直接涂片可见细菌，但普通培养法无细菌生长,所致疾病,败血症 中枢神经系统感染 脑脓肿 口腔与牙齿感染 齿槽脓肿和下颌骨髓炎 急性坏死性溃疡性齿龈炎（奋森咽峡炎） 约30%的牙周病,所致疾病,呼吸道感染 厌氧菌可感染上下呼吸道的任何部位 腹部和会阴部感染 手术及损伤后感染 女性生殖道感染 其他,三、 微生物学检查法,标本采取 从感染中心处采取 切取或活检得到的组织标本 从感染深部吸取的渗出物或浓汁 采取后立刻放入厌氧标本瓶中，迅速送检 直接涂片镜检 分离培养与鉴定,四、防治原则,破坏其成为条件致病菌的条件 合理使用抗生素,
