asodn转染骨肉瘤细胞对survivin及vegf表达的影响

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1、重庆医科大学硕士研究生学位论文 T H EE F F E C To NT H EE X P R E S S I O NO FS U R V I V I NA N D V E G FI No S T E O S A R C o M AC E L L SA F T E RT H E T R A N S F E C T I O No FA S O D N A B S T R A C T O b j e c t i v e :T os t u d yt h ee x p r e s s i o na n di t sr e l a t i o n s h i po fS u r v i v i n g

2、 e n ea n dV E G Fg e n ei nt h eo s t e o s a r c o m ac e l l ( 9 6 0 7c e l ll i n e ) ,a sw e l la s t h ec e l lp r o l i f e r a t i o na f t e rt h ei n t e r f e r e n c eo fA S O D N S oa st oa p p r o a c h t h ei n t e r a c t i o no fS u r v i v i ng e n ea n dV E G Fg e n ei no s t e o

3、s a r c o m ac e l l , w h i c hw i l lp r o v i d es o m ec l u e sf o rt h eo c c u r r e n c e ,d e v e l o p m e n t ,m e t a s t a s i s o ft h eo s t e o s a r c o m a M e t h o d :T h eo s t e o s a r c o m ac e l l s ( 9 6 0 7c e l l l i n e ) w e r ec u l t u r e da n d d i v i d e di n t o

4、e x p e r i m e n t a lg r o u pa n dc o n t r o lg r o u p S u r v i v i na n dV E G F p h o s p h o r o t h i o a t eA S O D N w a st r a n s f e c t e di n t o9 6 0 7c e l l sb yl i p o f e c t a m i n e 2 0 0 0r e s p e c t i v e l yi ne x p e r i m e n t a lg r o u p ,m e a n w h i l e9 6 0 7c

5、e l l si nc o n t r o l g r o u pw a st r e a t e db ys i m p l el i p o f e c t a m i n e T h ei n h i b i t i o nr a t i oo f9 6 0 7 c e l l si nd i f f e r e n tg r o u p sw e r ed e t e r m i n e db yM T T ,t h ee x p r e s s i o no f S u r v i v i nm R N Aa n dV E G Fm R N Aw e r ed e t e r m i

6、 n e db yR T P C R ,t h e e x p r e s s i o no fS u r v i v i np r o t e i na n dV E G Fp r o t e i nw e r ed e t e r m i n e db y i m m u n o c y t o c h e m i s t r y R e s u l t s :( 1 ) A f t e rt h et r a n s f e c t i o no fS u r v i v i n A S O D N ,t h ei n h i b i t i o n 5 重庆医科大学硕士研究生学位论文

7、r a t i oo f9 6 0 7c e l l sa t2 4h o u r s ,4 8h o u r sa n d7 2h o u r sw a s( 31 4 0 0 O 6 9 1 ) ,( 5 2 5 1 5 O 8 7 0 ) ,( 7 8 4 7 3 1 0 2 5 ) r e s p e c t i v e l y A f t e rt h e t r a n s f e c t i o no fV E G F A S O D N ,t h ei n h i b i t i o nr a t i oo f9 6 0 7c e l l sa t2 4 h o u r s ,

8、4 8h o u r sa n d7 2h o u r sW a s ( 2 8 511 0 8 2 5 ) ,( 4 9 2 9 2 0 9 0 0 ) ,( 71 34 9 - 1 - 1 2 2 3 ) r e s p e c t i v e l y T h ei n h i b i t i o nr a t i oo f9 6 0 7c e l l si n S u r v i v i n A S O D Ng r o u pa n dV E G F - - A S O D Ng r o u pw e r eh i g h e rt h a nt h a t i nc o n t r

9、o lg r o u pi nd i f f e r e n tt i m ep o i n t s ,P 0 0 5 ( 2 ) T h ee x p r e s s i o no f S u r v i v i nm R N Ai n9 6 0 7c e l l so fS u r v i v i n A S O D N g r o u p a n d V E G F A S O D Ng r o u pw a s( 1 5 1 9 8 士0 0 8 4 ) a n d ( 1 6 2 6 1 士0 0 9 1 ) r e s p e c t i v e l y ,w h i c hw e

10、 r el o w e rt h a nt h a to fc o n t r o lg r o u p ( 1 9 6 10 士0 0 9 4 ) , P 0 0 5T h e e x p r e s s i o n o fV E G Fm R N Ai n9 6 0 7c e l l so f S u r v i v i n A S O D Ng r o u pa n dV E G F A S O D N g r o u pw a s ( 1 7 4 8 9 1 0 0 6 5 ) a n d ( 1 5 4 2 9 土0 0 6 4 ) r e s p e c t i v e l y ,

11、 w h i c hw a sl o w e rt h a nt h a to fc o n t r o l g r o u p ( 2 0 4 5 3 士0 0 8 2 ) ,P 0 0 5 T h ee x p r e s s i o no fS u r v i v i nm R N A a n d V E G Fm R N Aw e r eb o t hd e c r e a s e di nS u r v i v i n A S O D Ng r o u pa n d V E G F A S O D Ng r o u p T h ei n h i b i t i o nr a t i

12、oo ft h ee x p r e s s i o no fS u r v i v i n a n dV E G Fm R N Aw a s p o s i t i v e l y c o r r e l a t e di nS u r v i v i n A S O D N g r o u p ( r = O 6 0 2 ) a n dV E G F - A S O D Ng r o u p ( r = 0 7 0 2 ) ( 3 ) T h ea p p e a r a n c eo f c e l l si nc o n t r o lg r o u pw a sj u s t o 、

13、g r o w t h p r o s p e r i t y ;t h ea p p e a r a n c eo fc e l l s i nA S O D N g r o u pw a sd e f o r mi nm i c r o s c o p e ( 4 ) B o t ht h ee x p r e s s i o no f S u r v i v i np r o t e i na n dV E G Fp r o t e i nw e r ed e c r e a s e di ne x p e r i m e n tg r o u p c o m p a r e dt ot

14、 h ec o n t r o lg r o u p ,P 0 0 5 6 重庆医科大学硕士研究生学位论文 C o n c l u s i o n :( 1 ) T h ee x p r e s s i o no fS u r v i v i ng e n ea n dV E G Fg e n e w e r ef o u n di nt h e9 6 0 7c e l l s ( 2 ) T h ep r o l i f e r a t i o no f9 6 0 7c e l l sw e r e i n h i b i t e da f t e rA S O D No fS u r v

15、i v i n g e n ea n dV E G Fg e n ew e r et r a n s f e c t e d , w h i c hi n d i c a t et h eA S O D Nc o u l db l o c k t a r g e tg e n ew i t hat i m ed e p e n d e n t f o r m ( 3 ) T h ee x p r e s s i o no fS u r v i v i ng e n ew a sd e c r e a s e dw i t ht h e d o w n r e g u l a t i o no

16、fV E G Fg e n e ,m e a n w h i l et h ee x p r e s s i o no fV E G Fg e n e w a sd e c r e a s e dw i t ht h ed o w n r e g u l a t i o no fS u r v i v i ng e n e S ot h e r em a yb e am u t u a le f f e c tb e t w e e nt h ee x p r e s s i o no ft h et w og e n e s F u r t h e rs t u d yo n t h er e g u l a t i o nm e c h a n i s mo ft h et w og e n e sc a np r o v i d es o m ee v i d e n c ef o r t h eg r o w t ho f

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