《高考高考生物一轮复习_专题二 微生物的培养与应用（第四十四课时）课题1-3 微生物的实验培养、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数、分解纤维素的微生物的分离课件 新人教版选修1》由会员分享，可在线阅读，更多相关《高考高考生物一轮复习_专题二 微生物的培养与应用（第四十四课时）课题1-3 微生物的实验培养、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数、分解纤维素的微生物的分离课件 新人教版选修1（89页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、专题2 微生物的培养与应用,第四十四课时 课题13 微生物的实验培养、 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数、 分解纤维素的微生物的分离,1.微生物的分离和培养 2.培养基对微生物的选择作用 3.利用微生物进行发酵来生产特定的产物,【回扣教材】,考点一 培养基,1培养基的定义：人们按照微生物对 的不同需求，配制出供其 的营养物质。,营养物质,生长繁殖,2类型：培养基按照 可分为液体培养基和固体培养基。在液体培养基中加入凝固剂 后，制成琼脂固体培养基，是实验室最常用的培养基之一。微生物在固体培养基表面生长，可以形成 的 。,物理性质,琼脂,肉眼可见,菌落,3营养物质：各种培养基一般都含有水、 _源、
2、_源和无机盐四种营养物质。满足微生物生长还需要适宜的_(培养霉菌时需要将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至 或 性)、氧气的要求(根据微生物的需求提供有氧或无氧环境)、 物质(如培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加 等)。,碳,氮,中性,微碱,特殊营养,维生素,pH,这种新型抗生素对细菌生长无影响；或这种新型抗生素对细菌的生长有抑制作用,蛋白胨和酵母提取物,bedca,杀死活的微生物,杀死24小时中由细菌芽孢萌发而生长的微生物,将培养基在37 下放置35天,如果无微生物生长,则证明培养基已达到灭菌效果,将圆片在不添加任何抗生素的无菌水中浸泡一段时间,平板划线或稀释涂布平板,不能转动绒布,
3、见下图,考点二 无菌技术 【回扣教材】 获得纯净培养物的关键是防止外来_的入侵，要注意以下几个方面： (1)对实验操作的_、操作者的_和_进行_和_。 (2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行_。 (3)为避免周围环境中微生物的污染，_应在酒精灯_进行。 (4)实验操作时应避免_处理的材料用具与_的物品相接触。,杂菌,空间,衣着,手,清洁,消毒,灭菌,实验操作,火焰附近,已经灭菌,周围,B,考点三 纯化大肠杆菌以及菌种的保藏 【回扣教材】 1制作牛肉膏蛋白胨固体培养基 (1)方法步骤：_、称量、溶化、_、_。 (2)倒平板操作的步骤：,计算,灭菌,倒平板,将灭过菌的培养皿放在_
4、的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞。 右手拿锥形瓶，将_迅速通过火焰。 用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基(约1020 mL)倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖。 等待平板_，大约需510 min。然后，将平板倒过来放置，使培养皿盖在下、皿底在上。,火焰旁,瓶口,冷却凝固,2纯化大肠杆菌 (1)微生物接种的方法最常用的是_法和_法。 (2)平板划线法是通过_在琼脂固体培养基表面_的操作。 (3)稀释涂布平板法是将_进行一系列的_稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到_培养基的表面，进行培养。分为_和_两步。 (4)用平板划线法和稀释涂布平
5、板法接种的目的是：使聚集在一起的微生物_成单个_，从而能在培养基_形成单个的_。,平板划线,稀释涂布平板,接种环,连续划线,菌液,梯度,琼脂固体,系列稀释操作,涂布平板操作,分散,细胞,表面,菌落,(5)平板划线法操作步骤： 将接种环放在火焰上_，直到接种环_。 在火焰旁_接种环，并打开盛有菌液的试管的棉塞。 将_通过火焰。 将_的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液。 将_通过火焰，并塞上棉塞。,灼烧,烧红,冷却,试管口,已冷却,试管口,左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条_，盖上皿盖。注意不要划破_。 灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的_开始往第二区域内划
6、线。重复以上操作，在三、四、五区域内划线。注意_将最后一区的划线与第一区相连。 将平板_放入培养箱中培养。,平行线,培养基,末端,不要,倒置,(6)涂布平板操作的步骤： 将_浸在盛有酒精的烧杯中。 取_菌液(不超过0.1 mL)，滴加到培养基表面。 将沾有少量酒精的涂布器在火焰上_，待酒精_后，_810 s。 用涂布器将菌液_地涂布在培养基表面。,涂布器,少量,引燃,燃尽,冷却,均匀,3菌种的保存 (1)对于频繁使用的菌种，可以采用_保藏的方法。 临时保藏方法 将菌种接种到试管的固体_上，在_的温度下培养。当菌落长成后，将试管放入_的冰箱中保藏。以后每_个月，都要重新将菌种从旧的培养基上_到新
7、鲜的培养基上。 缺点：这种方法保存的时间不长，菌种容易_或产生_。,临时,斜面培养基,合适,4,36,转移,被污染,变异,(2)对于需要_保存的菌种，可以采用_管藏的方法。 在3 mL的甘油瓶中，装入1 mL甘油后_。将1 mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在_的冷冻箱中保存。,长期,甘油,灭菌,20,D,1.17108,多,不能,因为不能排除杂菌来自培养基或来自培养过程,每次划线前要灼烧,冷却后从上一区划线末端开始划,首尾区不重叠,B,考点四 筛选菌株、统计菌落数目、设置对照 【回扣教材】 1筛选菌株 (1)自然界筛选： 实例：DNA多聚酶链式反应(PCR)要求使用_酶。科学
8、家从水生耐热细菌Taq中分离到耐高温的TaqDNA聚合酶。,耐高温的DNA聚合,方法：根据目的菌对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。 (2)实验室中筛选： 人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括_、_、_等)，同时_或_其他微生物生长。 (3)选择培养基 在微生物学中，将允许_种类的微生物生长，同时抑制或阻止_微生物生长的培养基，称作_培养基。,营养,温度,pH,抑制,阻止,特定,其他种类,选择,2统计菌落数目 测定微生物数量的常用方法有_法和_法。 3设置对照 (1)设置对照的主要目的是排除_中_对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。 (2)判断培养基中是否有杂菌污染： _。 (3)判
9、断选择培养基是否具有筛选作用： _。,稀释涂布平板,显微镜直接计数,实验组,非测试因素,将未接种的培养基在相同的条件下进行培养,对照培养基(营养物质齐全)接种后培养观察菌落数目,D,考点五 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 【回扣教材】 1实验设计 实验设计包括_，所需_、_、_，具体的实施步骤以及时间安排等的综合考虑和安排。,实验方案,仪器,材料,用具和药品,2操作提示 (1)无菌操作 取土样用的小铁铲和盛土样的信封在_都需要灭菌。 应在_称取土壤。在_附近将称好的土样_锥形瓶中，塞好棉塞。 在_土壤溶液的过程中，每一步都要在_操作。 (2)做好标记 本实验使用的平板和试管比较多。为避免混淆
10、，最好在_就做好_。例如，在标记培养皿时应注明_、_以及平板上培养样品的_等。,使用前,火焰旁,火焰,倒入,稀释,火焰旁,使用前,标记,培养基种类,培养日期,稀释度,3课题延伸 本课题对能分解尿素的细菌进行了初步的筛选。对分离纯化的菌种作进一步的鉴定，还需要借助_的方法。在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的_将尿素分解成了_，pH_，以尿素为唯一氮源的培养基加入_，如果pH升高，_，可以初步鉴定该种细菌能够分解尿素。,生物化学,脲酶,氨,升高,酚红指示剂,指示剂变红,尿素是唯一的氮源,只有能利用尿素的微生物才能生长,平板划线法或稀释涂布平板法,酚红,红,和,灭菌,考点六 分解纤维素的微生物的
11、分离 【回扣教材】 1纤维素：是一种由_首尾相连而成的高分子化合物，是地球上含量最丰富的_物质。_是自然界中纤维素含量最高的天然产物。有些微生物能分解利用纤维素，因为它们能够产生_。,葡萄糖,多糖类,棉花,纤维素酶,2纤维素酶：是一种复合酶，一般包括_酶、_酶和_酶。前两种酶能使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶能将纤维二糖分解成_。 3筛选纤维素分解菌的方法是_。该方法可以通过_反应直接筛选。 其原理是：刚果红可以与纤维素形成_，当纤维素被_分解后，红色复合物无法形成，出现以_为中心的_，我们可以根据_来筛选纤维素分解菌。,C1,CX,葡萄糖苷,葡萄糖,刚果红染色法,颜色,红色复合物,纤维素酶,
12、纤维素分解菌,透明圈,是否产生透明圈,4纤维素分解菌大多分布在富含_的环境中，也可以将富含纤维素的物质埋在土壤中，经过30天左右，再从已腐烂的物质埋藏处筛选_。 5在将样品稀释涂布到_的培养基上之前，可以用_增加纤维素分解菌的浓度。培养时要在_培养。 6常用的刚果红染色法有两种：一种是_，再加入_；另一种是_。,纤维素,纤维素分解菌,鉴别纤维素分解菌,选择培养基,摇床上振荡,先培养微生物,刚果红染色,在倒平板时就加入刚果红,7为确定得到的是纤维素分解菌，尚需进行_的实验，纤维素酶的发酵方法有_发酵和_发酵两种。纤维素酶的测定方法一般采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的_进行定量测定。,发酵产纤维素酶,液体,固体,葡萄糖,培养基表面的菌悬液会出现积液,导致菌体堆积,影响分离效果,避免培养基污染棉塞,量与活性,J4,发酵过程会产热和产酸,J4菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高,C,C,C,A,C,A,C,D,碳源,酒精灯火焰,稀释涂布平板,敏感,绿脓杆菌对头孢菌素的敏感性比美罗培南弱,杂菌污染,抗比阿培南的绿脓杆菌形成的菌落,
