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1、ZW6,主编,3.愈伤组织的筛选 6.5.3 宁夏枸杞离体培养 6.5.4 怀山药离体快繁 6.5.5 石桷离体快繁 6.5.6 贝母离体快繁 6.5.7 云南重楼离体快繁 6.5.8 库拉索芦荟离体快繁 附录A 植物组织培养常见缩写词 附录B 植物组织培养常用基本培养基配方 附录C 常用有机物质的分子量及浓度换算表,附录D 常用无机物质的分子量及浓度换算表,3.愈伤组织的筛选,小贴士.eps,3.愈伤组织的筛选,线.eps,6.5.3 宁夏枸杞离体培养,1.离体快繁 2.离体胚及胚乳培养,1.离体快繁,(1)外植体取材、消毒与接种 选择优良单株的当年生健壮、幼嫩的枝条及顶芽，剪去叶片后用自来
2、水冲洗干净。 (2)初代培养 初代培养诱导腋芽萌发可采用MS6-BA0.51.0m/LNAA0.1mg/L蔗糖2%3%的培养基，培养温度2528，光照时间1012h/d，光照强度20003000lx。 (3)继代增殖扩繁 将初代培养所获得丛生芽切割成小块丛芽，或将其中的较大芽苗分割成单株或切割成带芽茎段接入MS6-BA0.5m/LIAA2.0mg/L蔗糖2%3%的培养基上继代增殖扩繁。 (4)生根培养 选择高1.5cm以上的健壮芽苗，从基部切下转接到生根培养基上诱导生根。 (5)驯化移栽 宁夏枸杞的试管苗在生根培养基上培养15d，根系生长旺盛，根短粗壮，是移栽的适宜时期。,2.离体胚及胚乳培养
3、,(1)离体胚培养 张新宁等通过对枸杞四倍体与二倍体杂交种子中幼胚和胚乳的发育形成研究发现，在授粉914d期间，杂交幼胚的发育形成基本正常，但胚乳却逐渐消失。 (2)胚乳培养 利用胚乳细胞所具有的“全能性”，进行胚乳离体培养诱导三倍体植株，可获得无籽、果大的枸杞新品种。,6.5.4 怀山药离体快繁,1.幼苗离体快繁 2.微型块茎培养,1.幼苗离体快繁,(1)外植体取材、消毒与接种 在怀山药生长季节取幼嫩茎节段，用自来水冲洗干净。,小贴士.eps,1.幼苗离体快繁,线.eps,(2)初代培养 适于幼嫩节间茎段诱导愈伤组织的培养基为MS6-BA2.0mg/LNAA2.0mg/L，培养温度2427，
4、光照强度2000lx，光照时间1014h/d。 (3)继代增殖扩繁 将初代培养形成的愈伤组织转接到MS6-BA2.0mg/LNAAmg/L的培养基中，培养条件与愈伤组织诱导基本相同，但空气相对湿度要求较高，以70%80%为宜。,1.幼苗离体快繁,小贴士.eps,1.幼苗离体快繁,线.eps,(4)生根培养 选取生长至46cm长，具有34片展开叶的健壮小苗，转接到MSNAA0.20.5mg/L，或1/2MSIBA0.51.0mg/L，或1/2MSPPP33324mg/L的培养基中诱导生根。,1.幼苗离体快繁,小贴士.eps,1.幼苗离体快繁,线.eps,(5)驯化移植 选择生长健壮、高6cm左右
5、、已生根的试管苗，打开瓶盖或封口膜炼苗23d。,2.微型块茎培养,6.5.5 石桷离体快繁,1.石斛胚培养 2.石斛营养器官培养 3.石斛试管苗驯化移栽 4.石斛人工种子生产,1.石斛胚培养,小贴士.eps,1.石斛胚培养,线.eps,(1)外植体取材、消毒与接种 取石斛成熟蒴果，在超净工作台上，用70%酒精表面消毒12min，用5%次氯酸钠溶液浸泡810min，无菌水冲洗46次，用无菌滤纸吸干表面水分。 (2)胚生长与分化 石斛离体胚培养成苗途径有两种，一是直接诱导种胚形成胚状体后成苗；二是先通过诱导形成愈伤组织，再经过培育原球茎成苗。,1.石斛胚培养,小贴士.eps,1.石斛胚培养,线.e
6、ps,2.石斛营养器官培养,(1)茎尖或茎段培养 金钗石斛的组织培养以茎尖或茎段作为外植体培养效果较好。 1)外植体取材和消毒。 2)茎尖培养。 3)茎段培养。 4)生根培养。,小贴士.eps,2.石斛营养器官培养,线.eps,(2)幼叶或幼根培养 石斛的离体培养还可用叶片和幼根作为外植体。,3.石斛试管苗驯化移栽,4.石斛人工种子生产,(1)种胚原球茎培养 取铁皮石斛的成熟蒴果经洗洁精洗涤，用75%酒精和5%次氯酸钠消毒，在无菌条件下剥离种胚，置于MS液体培养基中悬浮培养，或接种在添加NAA 0.5mg/L的改良N6固体培养基上，培养温度25、2000lx连续光照下培养30d，然后转入添加A
7、BA0.5mg/L的MS培养液中振荡培养(100r/min)，每10d更换培养液一次。 (2)原球茎包埋 取黏土100目过筛，蛭石自然风干、粉碎，8目网筛过筛，得0.151.00mm蛭石粉。,6.5.6 贝母离体快繁,1.外植体取材、消毒与接种 2.愈伤组织诱导与继代增殖扩繁 3.鳞茎分化与植株形成 4.生根培养与驯化移栽,1.外植体取材、消毒与接种,小贴士.eps,1.外植体取材、消毒与接种,线.eps,2.愈伤组织诱导与继代增殖扩繁,小贴士.eps,2.愈伤组织诱导与继代增殖扩繁,线.eps,3.鳞茎分化与植株形成,4.生根培养与驯化移栽,小贴士.eps,4.生根培养与驯化移栽,线.eps
8、,6.5.7 云南重楼离体快繁,1.外植体取材、消毒与接种 2.愈伤组织诱导 3.愈伤组织的增殖和分化 4.生根培养 5.驯化移栽,1.外植体取材、消毒与接种,2.愈伤组织诱导,3.愈伤组织的增殖和分化,4.生根培养,5.驯化移栽,6.5.8 库拉索芦荟离体快繁,1.外植体取材、消毒与接种 2.初代培养 3.继代培养 4.生根培养 5.驯化移栽,1.外植体取材、消毒与接种,2.初代培养,3.继代培养,小贴士.eps,3.继代培养,线.eps,4.生根培养,5.驯化移栽,小贴士.eps,5.驯化移栽,线.eps,1.材料与试剂 2.培养基 3.仪器与用具 1.外植体取材和消毒 2.接种 3.愈伤
9、组织诱导 4.愈伤组织继代增殖扩繁,5.驯化移栽,注意事项.eps,5.驯化移栽,表6-12 人参愈伤组织的诱导和培养实训考核方案,1.材料与试剂 2.培养基 3.仪器与用具 1.愈伤组织继代驯化培养,5.驯化移栽,2.愈伤组织转接 3.细胞悬浮培养,注意事项.eps,5.驯化移栽,表6-13 人参悬浮细胞系建立实训考核方案,1.材料与试剂 2.仪器与用具 1.细胞培养物的准备 2.粗提物的制备 3.萃取分离,5.驯化移栽,4.纯化浓缩 5.分光光度计比色分析 6.提取物中单一皂苷含量分析 7.单一皂苷成分的分离,知识链接.eps,5.驯化移栽,图6-7 植物生物反应器示意图 a)机械搅拌式反
10、应器 b)气升式反应器 c)鼓泡式反应器 d)填充床式反应器 e)流化床式反应器 f)中空纤维反应器 1搅拌器 2进气口 3空气分布器 4出气口 5气流循环方向 6气流方向 7进液口 8排液口 9固定化细胞 10流体进口 11液体出口 12细胞团或固定化细胞 13气泡 14外壳 15中空纤维,5.驯化移栽,线.eps,5.驯化移栽,P210.TIF,1.兰科花卉组织培养成苗途径有哪些？,5.驯化移栽,影响兰科花卉组织培养的主要因素有哪些？ 2.非洲菊组织培养如何选择外植体？ 3.红掌、唐菖蒲、百合、郁金香组培快繁有哪些技术要点？ 4.如何进行香石竹脱毒及快繁？ 5.蕨类植物组织培养有哪些特点？
11、 6.杨柳科植物组培快繁有哪些技术要点？ 7.针叶树组培快繁有哪些特点？ 8.红叶石楠组培快繁有哪些技术要点？ 9.云南拟单性木兰组培快繁有哪些特点？ 10.柑橘脱毒方法有哪些？各有什么特点？ 11.柑橘微茎尖嫁接有哪些方法？有哪些操作技术要点？ 12.葡萄、苹果、枇杷脱毒与快繁有哪些技术要点？,5.驯化移栽,13.草莓、树莓离体快繁有哪些技术要点？ 14.甘蔗热处理结合茎尖培养脱毒有哪些技术要点？ 15.如何进行马铃薯脱毒微型薯生产？ 16.如何进行甘薯脱毒苗扩繁及种薯生产？ 17.大蒜脱毒方法有哪些？如何进行大蒜脱毒苗的扩繁？ 18.生姜脱毒方法有哪些？如何进行生姜脱毒苗的扩繁及种姜生产？ 19.无籽西瓜离体培养有何生产意义？有哪些技术要点？ 20.药用植物愈伤组织、细胞培养及次生代谢产物生产有何意义？ 21.人参、银杏愈伤组织及细胞培养有哪些技术要点？ 22.人参毛状根培养有何意义？有哪些技术要点？ 23.怀山药离体快繁有哪些技术要点？,5.驯化移栽,24.石桷离体快繁有哪些方法？如何进行石桷人工种子生产？ 25.贝母、云南重楼、库拉索芦荟离体快繁有哪些技术要点？ 26.简述植物次生代谢产物含量分析与分离纯化的原理及方法。,
