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1、样品采集和处理操作规程1目的为了做到安全、规范地进行样品采集和处理，保证合格的样品质量。2职责检验人员应严格执行本规定，质量监督员对执行情况进行监督。3适用范围适用于艾滋病抗体和CD4+T淋巴细胞的检测工作。4样品的采集和处理操作程序：艾滋病最常用的样品是血液，包括血清、血浆和全血。唾液或尿液有时也可作为测试样品。常用的血液样品的采集和处理方法如下。4.1血清样品采集和处理：（1）用一次性注射器（或真空采血管）抽取3-5ml静脉血，室温下自然放置1-2h，待血液自然凝固、血块收缩后再用3000r/min离心15min，吸出血清备用。（2）对所有采集的样品及样品送检单进行现场统一编号，并注明采样
2、日期，一周内检测的样品置2-8保存，对需长期保存的样品置-20冷冻保存。4.2抗凝血样品采集和处理：（1）用加有抗凝剂的真空采血管（或一次性注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管）抽取3-5ml静脉血，立即握住试管两端，颠倒混匀数次，将血液与抗凝剂充分混匀，室温下自然放置1-2h，分离出血浆和血细胞备用。（2）对做 CD4+/CD8+T淋巴细胞测定的样品，选用加有K3EDTA或肝素或枸椽酸钠的抗凝管。采血后立即握住试管两端，颠倒混匀数次，将血液与抗凝剂混匀，以防止凝固，收集样品在24小时以内，送检至省确认实验室或中心筛查实验室。（3）对所有样品及样品送检单进行现场统一对应编号，并写明日期和收
3、集时间。4.3采集样品注意事项：（1）采集样品原则上按临床采血技术规范操作（按试剂盒说明书,有特殊要求除外）。（2）采集样品时应注意安全，建议采用真空采血管及蝶形针具，以避免直接接触血液；直接接触HIV感染者或艾滋病（AIDS）病人血液、体液的操作，应戴双层手套。（3）对采集样品时产生的废弃物，严格按照感染性医疗废物处理要求进行处理。4.4采样器具的处理：（1）为防止疾病的传播和造成不必要的事故，必须以安全为原则实行“一人一针一管一消毒”制度。（2）使用一次性注射器要选择经国家审批合格，具有“三证”的生产厂家生产的注射器。注：三证指：a、生产许可证国家医药局签发；b、推销员证省级医药总公司签发
4、；c、卫生许可证省级卫生行政部门签发。（3） 使用一次性注射器前要检查包装是否完整。如包装有破损和裂开的注射器不能使用。禁止随意打开注射器包装。使用前注意检查有效期，禁止使用过期注射器。（4）一次性注射器不能重复使用，为避免交叉感染和疾病传播，对使用过的一次性注射器进行销毁、毁形、焚烧等形式处理，并做有记录。（5）外出现场采样时，收集所有使用过的废弃物（一次性注射器、一次性手套、消毒棉签等），进行现场焚烧处理，并做好记录。附表： 采样器具现场焚烧登记表采样时间焚烧时间焚烧地点执行人监督人样品保存和运送操作规程1目的为了做到安全、规范地进行样品的保存和运送，保证合格的样品质量。2职责检验人员应严
5、格执行本规定，质量监督员对执行情况进行监督。3适用范围适用于艾滋病抗体和CD4+T淋巴细胞检测工作。4样品的保存操作程序（1）用于抗体检测的血清或血浆样品，存放于-20以下，短期（1周）内进行检测的样品可存放于2-8。（2）用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品冻存于-20以下，进行病毒RNA检测的样品如需保存3个月以上置于-80。（3）用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定的样品不能长期保存，样品采集时间超过48小时后不予检测。5样品的运送操作程序5.1实验室间传递的样品通常是血清或血浆，除特殊情况外一般不运送全血。5.2样品运送过程一般采用WHO提出的三级包装系统。（1）第一层容器：装样品，要
6、求防渗漏。样品置于带盖的试管内，试管上有明显的标记，标明样品的编号或受检者姓名、种类和采集时间。随样品附送检单，送检单与样品分开放置。（2） 第二层容器：要求耐受性好、防渗漏、容纳并保护第一层容器，可以装若干个第一层容器。将试管装入专用带盖的容器内，容器的材料要易于消毒处理。（3） 第三层容器：放在一个运输用外层包装内，并易于消毒。在第三层容器外面要贴标签（数量，收、发件人）。5.3血清和血浆样品在2-8条件下由专人运送。用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定的样品在室温下18-23运送。每一包装的体积以不超过50ml为宜。5.4运送感染性材料必须有记录。5.5特殊情况下如需对个别样品进行复测，
7、可以用特快专递形式投寄，但必须按三级包装系统将盛样品的试管包扎好，避免使用玻璃容器，以保证不会破碎和溢漏。HIV抗体筛查标准操作程序1目的为了规范HIV抗体筛查标准操作程序，特制定本规定。2职责检验人员应严格执行本规定，质量监督员对执行情况进行监督。3适用范围适用于本单位HIV抗体初筛检测点胶体金法实验的检测工作程序。4 HIV抗体筛查操作程序：HIV抗体筛查检测流程样 品筛查试剂初筛检测阳性反应阴性反应原有试剂+另外一种筛查试剂报告阴性重复检测均阴性反应一阴一阳均阳性反应送筛查中心实验室检测报告阴性第4页/共20页5原理、检验方法及程序要求5.1原理本法采用胶体金免疫层析技术，在玻璃纤维膜上
8、预包被金标记HIVgp160和gp36抗原，在硝酸纤维膜检测线和质控线上分别包被HIVgp41、gp36混合和抗HIVgp41抗体，当检测进行时，样品中HIV抗体可与金标记HIV抗原结合形成复合物，由于层析作用复合纸向前移动。若样品中含有可被检测的HIV抗体，则与检测线预包被的HIV抗原结合形成“金标记HIV抗原HIV抗体HIV包被抗原”复合物而凝聚显色；若样品中没有HIV抗体或HIV抗体的含量低于检测限时，则不形成复合物而不显色；5.2操作步骤（北京金豪）（1）将密封袋打开，取出所需检测卡。（2）样本检测：在检测卡的加样孔中加50l待检样品，再加二滴缓冲液。（3） 15-20min内观察并记
9、录实验结果。5.3结果判断阳性结果：在试纸板的检测线和质控线位置上各出现一条红线。阴性结果：在试纸板的质控线位置上出现一条红线。无效结果：在试纸板的检测线的质控线位置上均未出现红线。5.4注意事项（1）被检测样品应为新鲜样品。如发现试纸板破损需废弃。（2）溶血样品对检测结果有影响，高血脂和高胆红素样品对检测结果无显著影响。（3）当检测线和质控线上均不出现红线时，应重新测试，如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品。（4）当样品中抗体含量极高时，质控线条带有所减弱，此结果仍视为有效结果。（5） 30分钟后观察结果无效。HIV抗体初筛原始记录检测日期 年 月 日检测目的HIV抗体监测检测项目 H
10、IV1+2抗体 室温（）实验温度样品种类样品数送检单位试剂种类胶体金批 号生产厂家有 效 期一 检测依据：全国艾滋病检测技术规范二 实验方法：PA 金标（双抗原夹心法） 硒标三实验方法：(按说明书操作)（一）操作步骤1 将密封袋打开，取出所需检测卡。2 样本检测：在检测卡的加样孔中加50l待检样品，再加二滴缓冲液。3 15-20min内观察并记录实验结果。（二）结果判断阳性结果：在试纸板的检测线和质控线位置上各出现一条红线。阴性结果：在试纸板的质控线位置上出现一条红线。无效结果：在试纸板的检测线的质控线位置上均未出现红线。12345678910ABCDEFGH移液器操作规程1目的：为了做到安全
11、、正确地操作，维持移液器正常工作，保证移液器的准确使用。2授权操作人与职责：本仪器授权经过考核合格持证人员进行操作,仪器操作人员须严格按照此规程执行。3适用范围：适用于艾滋病抗体检测工作。4操作规程：（1）根据所需移液量，选择相应规格的移液器。（2）将移液器调节至所需的移液量。5移液器的校对5.1核校方法蒸馏水称量法。5.2核校步骤（1） 在室温22无风实验室中，在万分之一级别天平上放置一个小烧杯。（2） 用待校准的移液器吸取存放过夜的蒸馏水加入烧杯底部，称量并计算蒸馏水重量，连续称重10次。（3）加蒸馏水的量根据待校准移液器的规格而不同，10次校准称量均在要求的重量范围内为合格，贴上合格标签
12、，注明校准日期，填写和保存校准记录。称重法校准移液器方案移液器规格标定使用蒸馏水量要求重量范围0.5 - 10 ml2 ml1.75 - 2.25 mg5 - 40 ml10 ml9.8 - 10.2 mg40 - 200 ml70 ml69.4 - 70.6 mg200 - 1000 ml300 ml298.0 - 302.0 mg1 - 5 ml2000 ml1990.0 - 2010.0 mg2 - 10 ml3500 ml3485.0 - 3515.0 mg5.3称重校准记录见附表第20页/共20页附表不同温度时水的密度t（）0510111213141516171819d(gcm-3)
13、0.999870.999990.999730.999630.999520.999400.999270.999130.998970.998800.998620.99843t（）2021222324252627282930d(gcm-3)0.998230.998020.997800.997560.997320.997070.996810.996540.996260.995970.99567微量移液器标定记录移液器规格使用蒸馏水量第1次称量（mg）第2次称量（mg）第3次称量（mg）第4次称量（mg）第5次称量（mg）第6次称量（mg）第7次称量（mg）第8次称量（mg）第9次称量（mg）第10次称量（mg）标定日
