探讨白宁对糖尿病肾病模型大鼠肾脏ctgf表达的影响

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1、探讨白宁对糖尿病肾病模型大鼠肾脏CTGF表达的影响摘要: 目的 观察肾白宁对大鼠糖尿病肾病模型CTGF表达的影响,并探讨其作用机制。方法 大鼠腹腔麻醉下进行左侧肾脏切除术,术后2周按照50mg/kg剂量,予以STZ腹腔注射;72h后,尾静脉取血,将空腹血糖/L者随机分为模型组、中药肾白宁组、洛汀新对照组,每组15只,另取15只为假手术组。CTGF检测采用免疫组化的方法。结果 12周后光镜下可见模型组肾小球毛细血管球萎缩、球囊腔略增大、肾小球出入球小动脉有轻度内皮细胞增生及纤维化、基底膜略增厚,远曲小管扩张,肾间质充血、水肿、血细胞浸润,并有轻度间质纤维化。模型组、中药组、对照组肾组织CTGF阳

2、性表达较假手术组高,差异有显著性,中药组、对照组与模型组比较阳性表达低,中药组与对照组差异无显著性。结论 具有滋补肝肾,益气固精,祛瘀化浊解毒之功效的肾白宁通过抑制肾CTGF表达,抑制细胞外基质增加和肾脏纤维化保护了肾功能延缓了DN的发展。关键词: 糖尿病肾病;肾白宁;CTGF糖尿病肾病是糖尿病的主要并发症之一,已经成为终末期肾病的首要病因。早期的病理特征是肾脏肥大,肾小球基底膜增厚和系膜基质进行性积聚。几年来,导师应用肾白宁治疗糖尿病肾病取得了较好的临床疗效,因此我们以糖尿病肾病大鼠模型作为研究对象,探讨肾白宁对糖尿病肾病大鼠肾损害的防治作用机制。1 材料与方法 药物 肾白宁:由哈尔滨世一堂

3、研究所配制成浸膏。洛汀新 。 实验方法 1 实验动物 清洁级健康SD雄性大鼠60只。 糖尿病肾病模型的建立 动物适应性喂养1周后开始实验。随机取15只为假手术组,假手术组大鼠在腹腔麻醉状态下,背部切口,剥离左肾脂肪包膜,关闭缝合切口。其余大鼠腹腔麻醉下进行左侧肾脏切除术,术后恢复2周。将STZ溶于/L柠檬酸缓冲液中,避光条件下迅速配成浓度为1%STZ溶液。动物禁食12h后,按照50mg/kg剂量,予以STZ腹腔注射;72h后,尾静脉取血,测定空腹血糖,空腹血糖/L作为DN大鼠成模标准。 分组与给药 造模成功后大鼠随机分为模型组、中药组、对照组及假手术组各15只,共60只。各组自造模成功第1天起

4、开始给药。假手术组、模型组:给予每日1次蒸馏水1ml灌胃;中药组:将肾白宁浸膏溶于生理盐水,配制成混悬液,以/灌胃,每日1次;对照组:洛汀新溶于生理盐水,配制成混悬液,/灌胃,每日1次。均给药12周,每2周称重调整剂量。给药期间每组大鼠分笼饲养,随意饮水,食用标准动物饲料。 观察指标及检测方法 结缔组织生长因子检测采用免疫组化的方法,并使用图像采集系统测定阳性反应面积,每张切片随机选取5个视野,每组分析15个标本。此项内容由黑龙江中医药大学附属第一医院病理科帮助完成。 统计学处理 所有数据均以xs表示,采用SPSS 软件进行统计学分析。2 结果12周后光镜下可见模型组肾小球毛细血管球萎缩、球囊

5、腔略增大、肾小球出入球小动脉有轻度内皮细胞增生及纤维化、基底膜略增厚,远曲小管扩张,肾间质充血、水肿、血细胞浸润,并有轻度间质纤维化。模型组、中药组、对照组肾组织CTGF阳性表达较假手术组高,差异有显著性,中药组、对照组与模型组比较阳性表达低,中药组与对照组差异无显著性,见表1。表1 各组肾组织CTGF表达情况 注:与假手术组比较,*P;与模型组比较,P3 讨论结缔组织生长因子作为转化生长因子-的下游调节因子以促进细胞外基质增加和肾脏纤维化参与DN的发生发展过程。Roestenberg等1,4报道1型糖尿病肾病患者与正常白蛋白尿的糖尿病患者相比较,血CTGF水平是升高的,并且与白蛋白尿和肌酐清

6、除率相关。同时2,5发现在糖尿病鼠肾病的早期即有血、尿和肾组织中CTGF水平的增加。Riser等3,4研究发现,健康人群、4/6没有肾脏疾病的糖尿病患者,尿CTGF水平是比较低的,而在5/7有肾脏疾病的糖尿病患者,尿CTGF的排泄明显增加。本实验结果显示,中药组CTGF阳性表达明显少于模型组,与对照组比较差异无显著性。具有滋补肝肾,益气固精,祛瘀化浊解毒之功效的肾白宁通过抑制肾CTGF表达,抑制细胞外基质增加和肾脏纤维化,保护了肾功能,延缓了DN的发展。【参考文献】1 Roestenberg P, van Nieuwenhoven FA,Wieten L, et al. Connective

7、tissue growth factor is increased in plasma of type 1 diabetic patients with Care, 20XX, 27: 1164-1170.2 Roestenberg P, van Nieuwenhoven FA, Joles JA, et expression profile and distribution Pattern indicate a role of connective tissue growth factor in diabetic nephropathy J Physiol Renal Physio,20XX, 290:F1344-F1354.3 RiserBL,Cortes P,Denichilo M, et CCN2 as a possible predictorofdiabetic nephropathy: Preliminary International, 20XX, 64: 451-458.4 涂晓文. 结缔组织生长因子:糖尿病肾病治疗的新靶点.国际泌尿系统杂志,20XX,1:126-129.5 董明.结缔组织生长因子:糖尿病肾病治疗的新靶点.国际内科学杂志,20XX,8:456-459.

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