§3.2体外受精和早期胚胎培养2章节

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1、国产奶牛:年均产奶量3000公斤左右 国外良种奶牛:年均产奶量10000公斤左右,引进一头良种成年奶牛需要3万5万元;,牛的生育率低,一头牛一胎只生一只,一生只能生育四五次。,牛的生育率虽然很低,但是牛的卵母细胞却相当的多,其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数多1000倍左右;,公牛产生的精子数目就更多了。,点此播放教学视频,通过 使卵子和精子在 下成熟和受精,并通过培养发育为 后,再经 产生后代的技术。,体外条件,人工操作,早期胚胎,试管动物技术,移植,试管动物技术过程:,第一步:体外受精,第二步:胚胎的早期培养,第三步:胚胎移植,点此播放教学视频,胚胎移植,卵母细胞的采集,卵母细胞的体外培

2、养,精子采集,精子体外获能,体外受精,体外早期胚胎的培养,体内发育,试管动物技术过程,点此播放教学视频,3.2体外受精和早期胚胎培养,点此播放教学视频,一、体外受精,主要包括 、 和 等几个主要步骤 。,卵母细胞的采集,精子的获取,受精,小型动物,大型动物,输卵管,卵巢,卵巢,给供体注射促性腺激素,促进多排卵之后从输卵管中冲取卵子。,摘取刚屠宰动物的卵巢,并从中采集卵母细胞。,借助超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜等工具,直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。,不需要,直接用于受精。,需要,需要,1.卵母细胞的采集和培养,牛卵巢,点此播放教学视频,B超活采仪,点此播放教学视频,借助超声波探头和屏幕的引

3、导,从活母畜卵巢采集卵母细胞。操作员先将带有超声波探头和采卵针的采卵器通过阴道插入子宫,同时通过将卵巢贴在探头上。根据B超屏幕所显示的卵泡位置,利用采卵针穿刺卵泡并同时抽吸卵母细胞。,B超引导法,点此播放教学视频,点此播放教学视频,点此播放教学视频,点此播放教学视频,活体采集的牛卵母细胞,点此播放教学视频,卵母细胞的成熟培养,选择卵丘细胞完整,形态良好的卵母细胞进行成熟培养。培养条件是39,5%CO2,卵母细胞在培养皿液滴内培养约24h。,点此播放教学视频,2.精子的收集和获能,假阴道法,手握法,电刺激法,收集精子的方法有:,点此播放教学视频,对于 、 和 的精子,一般采用培养法;对于 、 等

4、家畜的精子常用化学法。,在体外受精前,要对精子进行获能处理。通常采用的体外获能方法有 和 两种。,培养法,化学诱导法,啮齿动物,家兔,猪,牛,羊,培养法:,化学诱导法:,精子在 中获能。,获能液,肝素,钙离子载体,A23187溶液,精子的体外获能,3.受精,获能的精子和培养成熟的卵子,一般情况下在 或 中完成受精过程。,获能溶液,专用受精溶液,点此播放教学视频,是应用人工创造条件,对获取的 进行体外培养。,二、胚胎的早期培养,概念:,早期胚胎,水、无机盐、糖类、维生素、氨基酸、激素、核苷酸、血清等,培养液成分:,不同动物胚胎移植时间是否相同?,胚胎培养发育到适宜阶段时,可将其取出向受体移植或冷冻保存。,点此播放教学视频,为充分利用屠宰母牛卵巢中的卵母细胞,不妨将屠宰场和“试管牛”工厂合建,请画出合建后生产的技术流程图,点此播放教学视频,胚胎移植,采集良种母牛的卵母细胞,卵母细胞的体外培养,采集良种公牛精子,精子体外获能,体外受精,良种牛体外受精胚胎,受体牛,良种犊牛,成熟牛,屠宰加工厂,市场,采集卵巢中的卵母细胞,“试管牛”工厂化生产的技术流程图,点此播放教学视频,

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