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1、CFX96 Real-Time PCR 检测系统快速操作指南1. 确认系统数据线和电源线连接正常后，打开CFX96电源开关，系统进入自检。2. 自检完成后启动CFX96 Manager，软件将自动搜索设备，完成连接后“Detected Instruments”列表出现设备名称，PCR仪器屏幕显示红色“Under remote control”文字。3. 点击“Experiment setup ”弹出实验设置选项。4. 标签下，“Create New”可新建热循环程序，“Select Existing”可调用已有热循环程序，“Express load”下拉菜单中可选择各种标准热循环程序，“Edi
2、t Selected”可对选中的热循环程序进行编辑。4.1新建或编辑热循环程序时，可在图形或文字区域输入各步骤设定温度、时间值。4.2：插入一个普通温控步骤；4.3：插入温度梯度步骤；4.4 ：插入热循环范围，须在插入后输入循环起始步骤和循环次数；4.5 ：插入熔解曲线分析步骤；4.6 ：插入荧光采集步骤；4.7 ：对当前温控步骤的变温速率及方式进行调节；4.8 ：删除当前温控步骤；4.9 里应输入PCR反应液体积（此例为25微升）4.10 编辑好热循环程序后点击OK保存。5. 确定热循环程序后点击“Next”或标签进入样品位置及类型设定。“Create New”可新建样品设置，“Select
3、”可调用已有样品设置，“Express load”下拉菜单可选择各种标准样品设置，“Edit Selected”可对选中的热循环程序进行编辑。新建和编辑按下面步骤进行：5.1 从里选择荧光扫描模式，“SYBR/FAM Only”为单通道快速扫描模式，适用于仅使用核酸染料或/和FAM标定探针的情况。“All Channels”为全通道扫描模式，适用于任何检测情况。“FRET”模式使用于特殊的FRET探针的情况。5.2 点击，可在弹出的对话框里选择与检测方法一致的荧光素。注意“SYBR/FAM only”模式下只有FAM/SYBR可用。5.3 选择欲使用的样品孔位置后，在下拉菜单里指定样品类型，此
4、例为standard标准品。5.4 在打勾，为所选样品指定荧光类型（此例为SYBR），根据实验需要，还可在后面的输入扩增基因名称。5.5 根据需要可在为输入所选样品孔位的样品名称。5.6 如果样品设置有重复，可在里逐一指定，或者点击快速设置重复。中分别填入重复的数量以及起始重复编号，可指定重复放置的方向，点击即可。5.7 如果设置了标准品，需要为标准品赋值，可在中逐一输入，或者点击快速设定。5.8 可为相对定量数据分析时指定内参基因的名称。5.9 可解除所选样品的重复设置状态。5.10 可删除当前选定的样品孔设置。5.11 有疑问可点击，参考在线帮助。5.12 编辑好板位文件后，点OK保存。6
5、. 确定样品设置后点击“Next”或者准备运行系统。点击设备自动打开样品槽，按照设置好的样品位置放置好样品，然后点击关闭样品槽。热盖闭合后点击，设备询问数据存放的位置，确定后开始运行。7. 程序运行时可对PCR程序循环数、样品类型进行实施再编辑，也可编辑新的实验方案或者分析数据。注意事项：1. 设备长时间不使用时请勿将热盖打开，以免灰尘在block上长期积累，影响热传递。2. 热盖开闭时让设备自由运行，不得强行掰开或压合。3. 不要同时使用不同规格的耗材。4. 避免意外断电，建议为设备配置在线式UPS系统。5. 程序未结束前不得关闭系统电源，不得带电扳动设备背后的锁定杆。6. PCR运行时不要搬动设备，若需要长途运输务必先将设备设置为运输状态，合理打包（请BIO-RAD工程师）7. 系统电脑专人管理，制定仪器的合理管理制度严防电脑病毒感染，保证电脑系统的正常运行。
