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1、第十章血浆蛋白质与含氮化合物的代谢紊乱教学目标与要求掌握：血浆中几种重要蛋白质的性质及其临床应用；血清蛋白质电泳组分的临床分析；高尿酸血症和痛风的发生机制；血清总蛋白、清蛋白、蛋白电泳的检测方法。 熟悉：血浆蛋白质的种类及生理功能；原发性和继发性氨基酸代谢紊乱的概念；含硫氨基酸检测的临床意义。了解：苯丙酮酸尿症、酪氨酸血症、嘌呤核苷酸代谢紊乱。第一节 血浆蛋白质及其代谢紊乱蛋白质是人体中含量和种类最多的物质，蛋白质占人体干重的45，种类约有10万之多。几乎在所有的生理过程中蛋白质都起着关键作用。 血浆蛋白质是血浆固体成分中含量最多的一类化合物，目前已有所了解的血浆蛋白质约有500种。 血浆蛋白
2、的IEF/SDS-PAGE电泳图谱取一滴血浆在电泳板的左下角点样。先在水平方向进行等电聚焦电泳（IEF），接着在垂直方向进行SDS-PAGE。一、 血浆蛋白质的种类盐析法:将血浆蛋白质分为清蛋白和球蛋白两大类。通过醋酸纤维膜电泳或琼脂糖凝胶电泳将血浆蛋白质分成清蛋白和1、2、-球蛋白等五个主要区带 。二、血清蛋白质电泳组分的临床分析（一）血清蛋白电泳的正常图谱 血清蛋白电泳（serum protein electrophoresis，SPE）正常图谱，由正极到负极可依次分为清蛋白、1-球蛋白、2-球蛋白、-球蛋白、-球蛋白五个区带。血清蛋白电泳的正常组分各条区带中多个蛋白质组分可有重叠、覆盖；
3、两区带之间也有少量蛋白质；某些蛋白质组份染色很浅。用醋酸纤维素薄膜电泳测得血清各区带蛋白质的参考值： 清蛋白（Alb）： 5768、 3552 g/L 1球蛋白： 1.05.7、 1.04.0 g/L 2球蛋白： 4.911.2、 4.08.0 g/L 球蛋白： 713、 5.010.0 g/L r 球蛋白： 9.818.2 、 6.013.0g/L 。琼脂糖凝胶电泳琼脂糖(agarose)：从琼脂(agar)中去掉杂质和能沉淀脂蛋白的琼脂果胶(agaropectin)后所得，是由半乳糖及其衍生物构成的中性物质。评价：电渗作用小，对蛋白质的吸附极微，分辩率和重现性均较好，电泳图谱清晰。常用的浓
4、度：0.51.0%。商品化的琼脂糖凝胶板透明度好，散热均匀而且快，电泳重现性好，适当的条件可以保存半年。加之结合半干胶技术，电泳时可以不需要缓冲液，是目前自动化电泳系统最佳的介质。（二）血清蛋白电泳的异常图谱血清蛋白电泳异常图谱分型 血清蛋白电泳典型异常图谱 浆细胞病与M蛋白1. 血清蛋白电泳异常图谱分型2. 血清蛋白电泳典型异常图谱3. 浆细胞病与M蛋白正常血清蛋白电泳上显示的宽区带主要成分:免疫球蛋白。发生浆细胞病（plasma cell dyscrasia）时，异常浆细胞克隆增殖，产生大量单克隆免疫球蛋白或其轻链或重链片段，病人血清或尿液中可出现结构单一的M蛋白，在蛋白电泳时呈现一个色泽
5、深染的窄区带，此区带较多出现在或区，偶见于区。三、 血浆蛋白质及其异常分析（一） 前清蛋白 （prealbumin，PA）理化性质： 分子量5.4万，由肝细胞合成，其半衰期很 短，仅约12小时。生理功能： 作为组织修补的材料和一种运载蛋白。 结合T4与T3，而对T3亲和力更大；PA与 视黄醇结合蛋白形成复合物，具有运载维 生素A的作用。前清蛋白的临床评价 作为营养不良的指标，其评价标准是：PA 200mg/L400mg/L为正常，100mg/L150mgL轻度缺乏，50mg/L100mgL中度缺乏，50mgL严重缺乏。作为肝功能不全的指标，在反映肝功能的损害与恢复方面的敏感性优于清蛋白。在急性
6、炎症、恶性肿瘤、创伤等任何急需合成蛋白质的情况下，血清PA均迅速下降，PA是负性急性时相反应蛋白。（二） 清蛋白 （albumin，Alb）585个氨基酸残基组成分子量66.2kD含17个二硫键，是唯一不含糖的血浆蛋白质?！肝实质细胞合成半寿期19d！血浆中含量最多的蛋白质清蛋白的功能（1）血浆中主要的载体蛋白：许多水溶性差的物质与清蛋白的结合而被运输，包括胆红素、长链脂肪酸、胆汁酸盐、前列腺素、类固醇激素、金属离子（如Cu2+、Ni2+、Ca2+）、药物（如阿司匹林、青霉素等）。（2）维持血浆胶体渗透压：血浆清蛋白丢失或浓度过低时，可引起水肿、腹水等症状。（3）具有缓冲酸碱的能力（4）重要的
7、营养蛋白：清蛋白可以在不同组织中被细胞内吞而摄取，其氨基酸用于组织修补。因疾病等食物摄入不足或手术后病人常给予静脉清蛋白注射液。 血浆Alb作为营养指标的评价标准35g/L 正常28g/L34g/L 轻度缺乏21g/L27g/L 中度缺乏21g/L 严重缺乏清蛋白的临床评价低清蛋白血症： Alb合成不足、 Alb的分布异常、 Alb过度丢失、 Alb分解代谢增加、 无清蛋白血症(analbuminaemia) 。血浆Alb增高：少见Alb的遗传性变异由Alb含量估计其配体的存在形式和作用（三） 1-抗胰蛋白酶（1-antitrypsin，1-AT或AAT）394个氨基酸残基组成；分子量51kD
8、；pI为4.8。含糖10%12%。在醋纤膜电泳中位于1区带。主要由肝细胞合成，单核细胞、肺泡巨噬细胞和上皮细胞也能合成。1-抗胰蛋白酶的生理功能作为蛋白酶的抑制物，作用于胰蛋白酶、糜蛋白酶、尿激酶、肾素、胶原酶、弹性蛋白酶、纤溶酶和凝血酶等，占血清中抑制蛋白酶活力的90%左右。AAT抑制作用具明显的pH依赖性，最大活力处于中性或弱碱性，当pH4.5时活性基本丧失。1-抗胰蛋白酶临床意义：AAT缺陷：ZZ型、SS型甚至MS表型常伴有早年（2030岁）出现的肺气肿。 ZZ表型可引起肝细胞损害。ZZ表型的新生儿中1020在出生数周后易患肝炎，最后因活动性肝硬化致死。 低血浆AAT还可发现于胎儿呼吸窘
9、迫综合征。急性时相反应时AAT增加。（四）1-酸性糖蛋白（ 1- acid glycoprotein，AAG）181个氨基酸残基组成分子量约40kD ；pI为2.73.5血浆中含糖量最高（达45%）、酸性最强的糖蛋白典型的急性时相反应蛋白主要在肝脏产生, 某些肿瘤组织也可产生1-酸性糖蛋白（AAG）的的生理功能（1）AAG是主要的急性时相反应蛋白，在急性炎症时增高，与免疫防御功能有关。（2）AAG可以结合利多卡因和心得安，在急性心肌梗塞时AAG升高，而干扰药物剂量的有效浓度。 1-酸性糖蛋白（AAG）的临床评价主要作为急性时相反应的指标风湿病、恶性肿瘤及心肌梗死等一般增加34倍，35天时出现浓
10、度高峰，AAG增高是活动性溃疡性结肠炎最可靠的指标之一。 糖皮质激素增加，包括内源性的库欣综合征和外源性强的松、地塞米松等药物治疗时，可引起AAG升高。 在营养不良、严重肝损害、肾病综合征以及胃肠道疾病致蛋白严重丢失等情况下，AAG降低。 雌激素使AAG降低。（五）结合珠蛋白 （haptoglobin，Hp）一种急性时相蛋白和转运蛋白。在电泳中位于2区带。由与链形成22四聚体，链有1及2两种，而1又有1F及1S两种遗传变异体，两种变异体仅为一个氨基酸残基不同。结合珠蛋白的遗传表型结合珠蛋白的功能与红细胞中释出的自由形式存在的血红蛋白结合，运输血管内游离的血红蛋白(Hb)到网状内皮细胞降解，防止
11、Hb从肾脏丢失而为机体有效地保留铁，并能避免Hb对肾脏的损伤。每分子Hp可以结合两分子的Hb，结合后复合物在几分钟之内转运到肝细胞而被降解。结合珠蛋白的临床评价Hp下降： 溶血性疾病，如溶血性贫血、输血反应、疟疾。 血管外溶血不会使Hp发生变化。 严重肝病患者，其Hp合成减少。Hp升高：属急性时相反应蛋白，当烧伤和肾病综合征情况下，血Hp常明显升高。（六）2-巨球蛋白（2-macroglobulin，2-MG或AMG）血浆中分子量最大的糖蛋白，约为725kD，含糖量约8%。由肝细胞、单核细胞和星形细胞合成。半寿期约5d。2-巨球蛋白的功能：能与多种离子和分子结合，特别是能与蛋白水解酶结合而影响
12、这些酶的活性。当酶处于复合物状态时，酶的活性部位没有失活，但不容易作用于大分子底物，分子量小的蛋白质则能被2-MG-蛋白酶复合物所催化水解。2-MG可选择性地保护某些蛋白酶的活性2-巨球蛋白的临床评价不属于急性时相反应蛋白！2-MG增高：低清蛋白血症，尤其是肾病综合征时，显著增高可能是一种代偿机制以保持血浆胶体渗透压。妊娠期及口服避孕药时血浓度亦增高。2-MG降低：严重的急性胰腺炎和进展型前列腺癌治疗前。（七）铜蓝蛋白（ceruloplasmin , Cp ）含铜的2球蛋白，每分子结合6个8个铜原子，由于含铜而呈蓝色由1046个氨基酸残基组成含糖约8%9.5%95%的血清铜存在于Cp中，其余5
13、%呈可扩散状态血循环中的Cp可认为是铜的无毒性代谢库铜蓝蛋白的功能特征：能调节铁的吸收和运输，对多酚及多胺类底物有催化其氧化的能力，具有亚铁氧化酶（可催化Fe2+氧化为Fe3+）及胺氧化酶的活性 。抗氧化作用，可防止组织中脂质过氧化物和自由基的生成，特别在炎症时具有重要意义 。铜蓝蛋白的临床评价：Cp浓度减少：包括Wilson病、营养性铜缺乏和Menkes病（遗传性铜吸收不良）。在营养不良、严重肝病及肾病综合征时往往下降。属于急性时相反应蛋白：在妊娠、感染、创伤和肿瘤时血浆浓度增加。在妇女妊娠期、口服避孕药时其含量有明显增加。Wilson病的诊断标准定义：Wilson病是一种常染色体隐性遗传病
14、，即患者血浆Cp含量明显减少，血浆游离铜增加，铜沉积在肝可引起肝硬化，沉积在脑基底节的豆状核则导致豆状核变性，因而该病又称为肝豆状核变性。 Wilson病诊断标准：Cp下降，血清总铜浓度降低、游离铜增加和尿铜排泄增加，肝中铜的含量升高。（八）转铁蛋白（transferrin， TRF ）分子量约79.5kD；pI 5.55.9；半寿期为7d为单链糖蛋白，含糖量约6%电泳位置在区带主要由肝细胞合成！能可逆地结合多价阳离子，每分子TRF可结合2个Fe3+转铁蛋白的生理功能：负责运载消化管吸收的铁和由红细胞降解释放的铁。以TRF-Fe3+的复合物形式进入骨髓中，供成熟红细胞的生成。转铁蛋白的临床评价：用于贫血的鉴别诊断在缺铁性的低色素贫血时TRF水平增高，但铁的饱和度很低。TRF在急性时相反应中含量往往降低。因此在炎症、恶性病变时常随着清蛋白、前清蛋白同时下降。作为营养状态的一项指标，在营养不良及慢性肝脏疾病时下降。（九）C-反应蛋白（C-reactive protein，CRP）CRP是由肝细胞所合成的急性时相反应蛋白，含5个相同的亚单位，非共价地结合为盘形多聚体。相对分
