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1、斐林试剂,苏丹,橘黄色,红色,砖红色沉淀,紫色,苏丹,双缩脲试剂,鉴定物质,试剂,实验现象,还原性糖,脂肪,蛋白质,淀粉,碘,蓝色,必修1第1819页,生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,实验原理,方法步骤： 1实验材料、仪器和试剂的选择 2设计记录表格，记录预测结果 3检测的方法步骤 (1)还原糖的检测和观察; (2)脂肪的检测和观察; (3)蛋白质的检测和观察;,4,1、实验原理：,还原性糖+斐林试剂砖红色沉淀 还原性糖：葡萄糖、麦芽糖、果糖 非还原性糖：蔗糖、淀粉等,+,2、配制斐林试剂：,实验一：还原性糖的鉴定,5,3、材料用具：,如果植物组织中积累的成分是淀粉和蔗糖，那就无法
2、检测到还原性糖。有些植物尽管含有较多的还原性糖，但如果本身含有叶绿素或其他色素，这些色素就会影响实验现象起到遮盖作用。这些都不适宜做实验材料。,苹果和梨是比较理想的实验材料。,6,苹果、研钵、小刀,斐林试剂A液、斐林试剂B液、二氧化硅,量筒、试管架、吸管、试管夹、试管、滴管,漏斗、纱布,火柴、酒精灯、三脚架、石棉网、烧杯,7,4、实验步骤：,取一个洗净的苹果切下一块，去皮，然后切成小块，取一部分切成小块的苹果放在研钵中，加入少许二氧化硅（石英砂），然后研磨，将研钵中加入少量水继续研磨。,将玻璃漏斗插入试管中，在漏斗上垫一层纱布，将组织研磨液进行过滤，得到苹果的组织样液。,用量筒取两毫升组织样液
3、，再用量筒取两毫升新配制好的斐林试剂。,8,取一只试管，将量好的苹果组织样液倒入试管中，然后将量好的斐林试剂倒入试管中，震荡试管使溶液混合均匀，我们可以看到此时溶液呈蓝色。,将这只试管放入50-60 水浴锅中加热。,溶液的颜色开始是蓝色，然后慢慢变成砖红色。,选材：含糖量较高的白色或近于白色的植物组织(排除色素对 显色的干扰)，苹果、梨最好 。,实验流程(步骤),1.可溶性还原糖,制备组织样液：,制浆：去皮、切块、研磨，,过滤：（用单层纱布）,取液：（mL）,显色反应,mL组 织样液,刚配制的斐 林试剂mL,现象：,呈现蓝色,变成砖红色,(用前混匀),5065.C水浴 加热2min,还原糖的检
4、测和观察：,还原糖的检测结果,实验一：脂肪的鉴定,1、实验原理：,脂肪+苏丹橘黄色 脂肪+苏丹红色,取少量脂肪样液，加入苏丹，震荡，可看到溶液呈了橘黄色，本实验我们用苏丹做染液。,2、材料用具：,芝麻，脂肪含量丰富，但种子颗粒太小，不利于切片制作。 玉米，脂肪含量较少，种子颗粒也较小，因此也不适合做实验材料。,花生是比较理想的实验材料 我们选用花生,显微镜、镊子、毛笔、吸水纸、刀片、载玻片、盖玻片、培养皿,50%的酒精、苏丹、清水,3、实验步骤：,取一粒浸泡过的花生种子，去皮，分开两片子叶，将子叶切成薄片，然后用毛笔将这些材料放入盛有清水的培养皿中。,取一片载玻片，用纱布擦净，用毛笔取一片最薄
5、的材料，放在载玻片中央。,用滴管在花生种子薄片上滴几滴苏丹染液，染色2至3分钟，用吸水纸吸去花生种子薄片周围的染液。,在薄片上滴1至2滴体积分数为50%的酒精，洗去附色，用吸水纸洗去花生子叶周围的酒精。,在薄片上滴一滴清水，盖上盖玻片，制成临时装片。,在低倍镜下寻找花生种子薄片的最薄处，将这部分移至视野中央。,用显微镜观察花生种子薄片。,我们可以看到细胞中一个个圆形的小颗粒，这就是脂肪颗粒。,低倍镜下观察,高倍镜下观察,2.脂肪的鉴定,取材：花生种子（浸泡h），去皮，将子叶削成薄片,制片：,选取最薄的薄片移至载玻片中央,在薄片上滴加苏丹(或苏丹) 染液2 3滴，染色 min,滴加体积分数为50
6、%的酒精溶液12滴，洗去浮色 (多余的苏丹 ),吸去余液，滴1-2滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成临时装片,显微观察：,先在低倍镜下找到已着色的薄片，后用高倍镜观察,现象：,有被染成橘黄色(或红色)的脂肪微粒,脂肪的检测结果,实验一：蛋白质的鉴定,1、实验原理：,蛋白质+双缩脲试剂紫色络合物,2、材料用具：,豆浆、蛋清、牛奶都是很好的实验材料。,本实验我们用蛋清做实验材料，在用蛋清做实验材料时，要注意将蛋清稀释，如果稀释不够，反应后的产物会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底。,试管架、试管、吸管,蛋清稀释液,双缩脲试剂A液、双缩脲试剂B液、量筒,3、实验步骤：,用量筒量取两毫升的蛋清稀释液。再用脲尿
7、试剂A液,将量取的蛋清液和双缩脲试剂A液分别倒入到试管中，震荡均匀，此时可见试管内仍然是透明的。,再向试管中加入1至2滴双缩脲试剂B液。,3.蛋白质的鉴定,选材与制备 组织样液：,黄豆组织样液（或鸡蛋蛋清稀释液）,黄豆浸泡 去皮切片研磨过滤滤液,显色反应,mL组 织样液,双缩脲试剂 mL,现象：,无色,双缩脲试剂 滴,紫色或紫红色,(创设碱性条件),(提供Cu2+),蛋白质的检测结果,蛋白质的鉴定-双缩脲试剂,鸡蛋清溶液,NaOH 溶液,滴加CuSO2 溶液, 每次滴加均需摇匀,结果显示: 紫色,4.淀粉的鉴定,取材：马铃薯匀浆,检测：,mL组 织样液,碘液2滴,现象：,摇匀后变成蓝色,问题探
8、讨: 1、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时，为什么要留出一部分样液？,作对照,2、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加34滴而不能 过量？,过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色。,3、为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？,时间太长，Cu(OH)2悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应。,深化,4、斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同？,新配制的 Cu(OH)2 溶液,在碱性 环境下 的Cu2+,NaOH 浓度为 0.1g/mL CuS04 浓度为0.05g/mL,NaOH 浓度为 0.1g/mL CuS04 浓度为0.01g/mL,先把NaOH 溶液和CuSO4 溶液混合，
9、 而后立即使用。,先加入Na0H 1mL，然后 再加CuS04 4滴，摇匀。 (不能过量),水浴 加热,不 需 要,5、实验的材料的选择和处理有什么要求？,材料的选择,材料的处理,还原性糖的鉴定,脂肪的鉴定,含糖高，颜色为 白色的植物组织， 如苹果和梨,富含脂肪的种子 ，如花生,浸泡34小时,/,蛋白质的鉴定,富含蛋白质的 黄豆或鸡蛋清,黄豆需浸泡1-2天，鸡蛋清要先稀释,淀粉的鉴定,马铃薯,/,其中适合于鉴定可溶性还原糖的是 ，理由是梨的组织细胞 ，你打算用什么试剂鉴定? 。 小麦种子不如花生种子更适合用来鉴定脂肪，这是因为 ，你打算用什么试剂鉴定? .,例 做生物组织中可溶性还原糖、脂肪、
10、蛋白质的鉴定实验时，需要根据实验需要选择不同的实验材料。请根据下表所列各种材料回答问题：,梨,颜色为白色，并且糖含量较高,斐林试剂,脂肪含量不如花生高，也不容易做切片,用苏丹或苏丹试剂,小麦种子中糖类化合物 含量很高，却不适合用 来鉴定 _，这是因为 _。,适合于鉴定蛋白质的是 ，理由是 ，鉴定所用的试剂是 。,蛋白质含量高,黄豆和花生,双缩脲试剂,淀粉,可溶性还原糖,淀粉是非还原糖且不溶于水,知识结构,1、青苹果汁遇碘液显蓝色，熟苹果汁能与斐林试剂 作用产生砖红色沉淀，下列结论中最合理的是 ( ) A青苹果汁中有淀粉，不含还原糖 B熟苹果汁中含还原糖，没有淀粉 C苹果转熟时，大量淀粉水解成还原糖 D苹果转熟时单糖聚合成淀粉,C,例题,、安徽阜阳劣质奶粉事件震惊全国，引起世人注目。鉴定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品，肯定不需要用到的化学试剂是( ) A.斐林试剂 B. 红墨水 C.双缩脲试剂 D.苏丹染液,B,例题,3(2005.广东)生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物的鉴定实验中，以下操作错误的是( ) A、可溶性还原糖的鉴定，可用酒精灯直接加热产生砖红色沉淀 B、只有脂肪的鉴定需要使用显微镜 C、用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热 D、使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用,A,
