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常用染色液配制

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常用染色液配制_第1页
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1.草酸铵结晶紫染色液A液:结晶紫2.5g,95%乙醇25mLB液:草酸铵1.0g,蒸馏水1000mL制备时,将结晶紫研细,加入95%乙醇溶解,配成A液将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液两液混合静止48h后,过滤后使用2.鲁格尔氏(路戈氏)碘液碘1.0g,KI 2.0g,蒸馏水300mL先用3~5 mL蒸馏水溶解KI,再加入碘片,稍加热溶解,加足水过滤后使用3.脱色液:95%乙醇;或丙酮乙醇溶液:95%乙醇70mL,丙酮30mL4.沙黄(番红)染色液2.5%沙黄(番红)乙醇溶液:沙黄(番红)2.5g,95%乙醇100mL此母液存放于不透气的棕色瓶中,使用时取20mL母液加80mL蒸馏水使用5.0.1%美兰染色液0.1g溶解于100mL蒸馏水中6.吕氏碱性美蓝色染色液A液:美蓝0.3g,95%乙醇30mLB液:KOH 0.01g,蒸馏水100mL,分别配制A液和B液,混合即可7.瑞氏染色液瑞氏染料粉未0.3g,甘油3mL,甲醇97mL将染料放乳钵内研磨,先加甘油,后加甲醇,过夜后过滤即可8.5%孔雀绿水溶液(芽孢染色用)孔雀绿5.0g,蒸馏水100mL先将孔雀绿放乳钵内研磨,加少许95%乙醇溶解,再加蒸馏水。

9.黑色素水溶液(荚膜负染色用)黑色素10g,蒸馏水100mL,40%甲醛(福尔马林)0.5mL将黑色素溶于蒸馏水中,煮沸5min,再加福尔马林作防腐剂,用玻璃棉过滤10.硝酸银鞭毛染色液A液:单宁酸5.0g,FeCL3 1.5g,福尔马林(15%) 2.0mL,1%NaOH 1.0mL,蒸馏水100mLB液:AgNO3 2.0g,蒸馏水100mL将AgNO3溶解后,取出10mL备用,向其它的90mL硝酸银液中加浓氢氧化铵,则形成很厚的沉淀,再继续滴加氢氧化铵到刚刚溶解沉淀成为澄清溶液为之再将备用的硝酸银慢慢滴入,则出现薄雾,但轻轻摇动后,薄雾状的沉淀又消失,再滴入硝酸银,直到摇动后,仍呈现轻微而稳定的薄雾状沉淀为之如雾重,则银盐沉淀出,不宜使用11.改良利夫森(Leifson’s)鞭毛染色液A:20%单宁(鞣酸)2.0mL;B:饱和钾明矾液(20%) 2.0mL;C:5%石炭酸2.0mL;D:碱性复红酒精(95%)饱和液1.5mL将以上各液于染色前1~3d,按B加到A中,C加到A、B混合液中,D加到A、B、C混合液中的顺序,混合均匀,马上过滤15~20次,2~3d内使用效果较好12.石炭酸复红染色液A液:碱性复红0.3g,95%乙醇10mL;B液:石炭酸(苯酚 )5g,蒸馏水95mL。

先将染料溶解于乙醇,将苯酚溶于水,AB两液混合即可13.乳酸石炭酸棉蓝染色液石炭酸(苯酚)10g,乳酸(比重1.21)10mL,甘油20mL,棉蓝(苯胺蓝)0.21g,蒸馏水10mL将石炭酸加入蒸馏水中,加热溶解,再加入乳酸和甘油,最后加棉蓝附录Ⅴ:常用缓冲液的配制1.pH7.0磷酸盐缓冲液(PBS)(20℃ pH值7.0~7.1)甲液:KH2PO4 34.0g,蒸馏水1000mL;乙液:K2HPO4 43.6g,蒸馏水1000mL甲液二份和乙液三份混合即可2.0.2mol/l醋酸缓冲液(pH7.0)甲液:醋酸34.0mL,蒸馏水1000mL;乙液:醋酸钠43.6g,蒸馏水1000mL甲液72mL,乙液28mL,NaCL 0.58g,配毕测pH值,以121℃,30min灭菌后备用3.明胶磷酸盐缓冲液成分:明胶2g,磷酸氢二钠4g,蒸馏水1000mL,pH6.2制法:加热溶解,校正pH,121℃高压灭菌15min4.包被缓冲液(pH9.6碳酸盐缓冲液)的制备Na2CO3 1.59g,NaHCO3 2.93g,加蒸馏水至1000mL也可用pH9.6的磷酸盐缓冲液代替5.洗液(PBS-T)的制备PBS加0.05%(V/V)吐温-20。

6.抗体稀释液的制备BSA 1.0g加PBS-T至1000mL;封闭液的制备同抗体稀释液7.底物缓冲液的制备A液(0.1mol/L柠檬酸水溶液):柠檬酸(C6H8O7·H2O) 21.01g,加蒸馏水至1000mLB液(0.2mol/L磷酸氢二钠水溶液):Na2HPO4·12H2O 71.6g,加蒸馏水至1000mL。

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