cck8细胞增殖实验

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CCK8细胞增殖实验1.首先保证细胞消化下来后吹打成单细胞悬液,然后计数准确,接受每个孔前都将细胞悬液充分混匀。接种完成后,整个96孔板按十字形来回充分晃动,保证细胞接种后在每个孔中都平均分布,否则测定OD值时重复孔会出现大幅度波动,影响结果。2. 消化细胞前先用PBS或者生理盐水清洗细胞1-2遍,再加入胰酶,晃动培养瓶/皿使胰酶充分覆盖细胞,然后去除全部的胰酶,将细胞放入培养箱孵育3-5min。待细胞边缘收缩至单个细胞后加入培养液吹打即可,很好吹打成单细胞悬液的。3. 我试着回答下你的问题,CCK-8读值我想是独立于你条件培养之外的,意思就是你按照你的实验设计完成压力培养,比如你要培养48小时,那么你就等48小时结束后再加入CCK-8,那么CCK-8培养就不需要在压力条件下了,普通条件下就可以,贴壁细胞是要14小时,在这个时间段内你选择你认为最好的时间点测量,CCK-8公司技术专员建议CCK-8加入后培养液变黄,颜色变的最深的时间测量!我的做法是:加入CCK-8后14个小时内每隔半小时测下OD值,对比下不同时间的颜色,数值,大概估计下最佳时间点,再做的时候应该就方便了!

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