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1、鸡马立克病疫苗研究进展 鸡马立克病（D）是鸡的一种淋巴组织增生性疾病。该病的致病因子为马立克病病毒（属于疱疹病毒属。世界动物卫生组织（将 为动物 B 类传染性疾病。该病是第 1 个能用疫苗预防的肿瘤性疾病，因此受到了医学界、兽医学界、病毒学界的广泛关注。到目前为止,还没有有效的方法来治疗 鸡，仍通过疫苗预防控制该病的发生，所以对 苗的研究一直是国内外众多学者研究的热点。1 常规 苗的类型、型，3 种血清型，利用这 3 种血清型制成疫苗，3 种血清型疫苗即可单独使用，也可混合使用。清型疫苗这类疫苗是用 过细胞培养连续传代而致弱的,疫苗所含病毒是细胞结合性的,只有保证细胞的完整性,疫苗才具有免疫原
2、性。最早的 I 型疫苗是英国的学者 研制出的 苗，随后荷兰学者 将中等毒力的 经鸭胚成纤维细胞（代后获得无毒株，并研制成的苗，广泛应用于荷兰和其他国家。因为该毒株有扩散的特性并略微存在致病性，1990 年以后英国才准许应用该疫苗。同期由 生的疫苗称“克隆 C”，据报道可有效抵抗超强毒 感染，该疫苗只在短时间内在美国上市和应用，不久在该国退出应用。“814”株是我国哈尔滨兽医研究所于20 世纪 80 年代研制的另一种疫苗，它可用代次广，抗母源抗体，性能稳定且安全。目前，常将弱化 I 型强毒株和 组技术结合起来研究新型疫苗。清型疫苗系一类自然筛选的弱毒疫苗，血清型 是天然非致病性的，广泛分布于鸡群
3、中，这种疫苗毒可通过接触传播，感染后第 5 周产生很强的免疫力。1988年江苏农学院的黄仕霞等分离出的型 毒株是国内惟一的型 苗株。这一血清型具有代表性的是 ，制成细胞结合性疫苗，单独使用就能产生广泛的保护力，但对超强毒株抵抗力不太强，可与 苗合用，充分抵抗超强毒株。美国和其他一些国家有商品 苗出售，英国没有，除 ，目前应用的血清型疫苗还有 01B/12。清型疫此类疫苗是火鸡疱疹病毒(苗,其代表毒株 由美国学者士从火鸡群中分离出来的 1 株无毒力品系，对鸡和火鸡均不致病,在鸡群内不传播；接种这种疫苗的鸡体，细胞中的 使机体产生抗体,但不能中和 疫苗具有干扰作用，它先于 入鸡体细胞,能诱发阻止肿
4、瘤形成的抗体，防止肿瘤的形成和发展。这种疫苗广泛应用，可有效抵抗强毒。既有细胞结合性活疫苗，又有易于储存、运输的冻干苗，目前正在使用的疫苗有： 价苗和三价（多价）苗自 20 世纪 80 年代开始，由于 力出现了超强毒，世界某些地区单价苗免疫失败屡屡发生，因此有些学者提出多价苗战略，先后研制出二价苗和三价苗。道了 3 种血清型疫苗单独使用和合用时抵抗强毒和超强毒 感染的试验比较，证实了多价苗的效力。在美国主要使用型和型组成的疫苗，即 301B/12+欧则使用 I 型和型组成的疫苗国使用的二价苗有 814+前，我国使用的三价苗主要由 814+成。利用几种血清型病毒协同保护作用，使 成的损失得以降低
5、，但多价苗只能用液氮保存和运输，成本很高。2因工程疫苗随着生物学技术的发展及其在疫苗研究领域的广泛应用，科学工作者努力研究比天然弱毒组成的常规疫苗免疫效果好，成本低，使用方便的抗 因工程疫苗。痘病毒为载体的 组疫苗禽痘病毒（目前分子量最大的动物病毒，全长约 300极具开发前景的载体系统。科研工作者研究发现 糖蛋白 有良好的免疫原性， 相继克隆并序列分析了 因，发现 码的 100糖蛋白复合物可以激发抗 疫保护反应，已建立表达 重组A 株 白具有很好的免疫保护作用，该重组病毒对 强染发病具有良好的免疫保护作用。利用随机克隆的 段作为体内重组的同源 列,分别在痘苗病毒 7500103工合成的 动子控
6、制下表达了 白和 白，并通过免疫荧光检测筛选出重组 白重组 种雏鸡可使鸡获得抵抗强毒攻击的免疫力，而接种 白重组病毒无保护作用。在 苗研究中，除蛋白还加强 他糖蛋白的研究,寻找更多的疫苗候选分子。陈志琳等首次以 国株为载体，构建表达 因的重组病毒，为研制 苗奠定了基础，也为进一步研制抗 价组合基因工程疫苗提供了有效组分。痘病毒重组表达一些结构性和非结构性 原已建立，但没能产生理想的保护，包括 gC、 种 诱导 制性的细胞免疫反应， 有保护作用。但用 组表达的 原混合接种比起单独 种，产生加强保护作用。利用 达 gE,gI, 用疫鸡时保护率达到 94%。载体的 组疫苗因组可容纳 25外源基因,可
7、以插入一些外源基因。用 组病毒表达 原的优点是二者有交叉抗原反应，从而可以用大量的 白来诱导免疫反应，雏鸡体内维持时间也长，比起 能够长时间的表达 使用 载体，在 因区插入 建基因工程苗,虽然 因的破坏使 细胞内繁殖能力降低，但这种低效价重组病毒比其野毒株的免疫效果好。重组 苗的一个重要特点是可以插入多个外源基因，具有多重保护的潜力，人们对此非常感兴趣制成联苗使用,以预防 其他禽病。将鸡新城疫病毒(融合蛋白(F)基因和血凝素神经氨酸苷酶(因分别插入 必需基因 建了 种重组体，它们能在细胞培养物上和鸡体内稳定而充足的感染，组体接种的鸡可同时抵抗 双重攻击，由此可见，利用 载体结构建多联苗是实际可行的,关键在于插入合适的外源基因。这个重组方法的成功主要依赖于鉴定出了 因的适宜位点，而后插入不削弱鸡体中病毒复制的外源基因，从而产生了理想的表达。迄今为止发现的最适合的插入点是 因片段,它与不知功效的 因同源。又构建了表达 N 抗原, 原的 组疫苗,输卵管免疫接种结果保护了全身性 外，还建立了表达鸡传染性法氏囊病毒（原 组苗，在 点插入 原产生重组疫苗，接种后防止了鸡法氏囊的萎缩。联重组苗的构建成功不仅可以抗时还能对新城疫(产生保护，具有广泛的开发前景。专利查询
