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1、介绍一种体外诊断生物制品乙型肝炎病毒表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体、核心抗体检测试剂盒（胶体金法）学生：龚湛武（生科院12级生物技术二班，学号：201242146216）【产品名称】通用名称：乙型肝炎病毒表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体、核心抗体检测试剂盒（胶体金法）英文名称：HBV Hepatitis B Virus Combo Rapid Test【临床意义】乙型肝炎病毒表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体、核心抗体检测试剂盒（胶体金法）适用于检测血清/血浆中的乙型肝炎病毒表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体、核心抗体。乙型肝炎一般临床主要表现为乏力、食欲减退、恶心、呕吐、肝肿大及肝功能
2、异常，部分病人可有黄疸和发热。有些患者出现荨麻疹、关节痛或上呼吸道症状，部分病人有皮肤黝黑，进行性脾肿大、蜘蛛痣、肝掌等表现。但部分慢性乙肝无明显症状，但在病理上会出现肝小叶内炎症和肝细胞变性及坏死，严重者会发生纤维化，甚至肝硬化。【检验原理】乙型肝炎病毒表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体、核心抗体检测试剂盒（胶体金法）采用高度特异性的抗体抗原反应及免疫层析分析技术。HBsAg检测试剂采用双抗体夹心法，试剂含有被事先固定于膜上测试区（T）的抗体。检测时，标本滴入试剂加样处，标本与预包被的胶体金颗粒结合的抗HBsAg抗体反应。然后，混合物随之在毛细效应下向上层析。如是阳性，胶体金抗体在层析过程中
3、先与标本中的HBsAg结合，随后结合物会被固定在膜上的抗HBsAg抗体结合，在测试区内（T）会出现一条紫红色条带。这条带是HBsAg抗体-HBsAg-HBsAg抗体金标粒子的复合物在膜上结合形成的。如是阴性，测试区内（T）将没有紫红色条带。无论HBsAg是否存在与标本中，一条紫红色条带都会出现在质控区内（C）。质控区内（C）所显现的紫红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。HBsAb检测试剂采用双抗原夹心法，试剂含有被事先固定于膜上测试区（T）的乙肝表面抗原。测试时，标本滴入试剂加样处，标本与预包被的胶体金颗粒结合的HBsAg反应。然后，混合物随之在毛细
4、效应下向上层析。如是阳性，胶体金抗原在层析过程中先与标本中的HBsAb结合，随后结合物会被固定在膜上的HBsAg结合，在测试区内（T）会出现一条紫红色条带。这条带是HBsAg-HBsAb-HBsAg金标粒子的复合物在膜上结合形成的。如是阴性，则测试区内（T）将没有紫红色条带。无论HBsAb是否存在于标本中，一条紫红色条带都会出现在质控区内（C）。质控区内（C）所显现的紫红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。HBeAg检测试剂采用双抗体夹心法，试剂含有被事先固定于膜上测试区（T）的乙肝e抗体。测试时，标本滴入试剂加样处，标本与预包被的胶体金颗粒结合的HB
5、eAg反应。然后，混合物随之在毛细效应下向上层析。如是阳性，胶体金抗体在层析过程中先与标本中的HBeAg结合，随后结合物会被固定在膜上的抗HBeAg抗体结合，在测试区内（T）会出现一条紫红色条带。这条带是HBeAg抗体-HBeAg-HBeAg抗体金标粒子的复合物在膜上结合形成的。如是阴性，测试区内（T）将没有紫红色条带。无论HBeAg是否存在与标本中，一条紫红色条带都会出现在质控区内（C）。质控区内（C）所显现的紫红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。HBeAb，HBcAb检测试剂采用竞争抑制法，试剂含有被事先固定于膜上测试区（T）的抗体。测试时，血清
6、/血浆标本滴入试剂加样处，随之标本在毛细效应下向上层析。如标本中含有相应的抗体，则同膜上测试区（T）的抗体竞争与预包被在金标粒子的相应抗原反应。如标本中没有相应的抗体，预包被在金宝李子的复合物的相应抗原则同膜上测试区（T）的抗体全部结合。阳性标本，测试区内（T）将没有紫红色条带，阴性标本，测试区内（T）将会出现明显的紫红色条带。无论相应的抗体是否存在于标本中，一条紫红色条带都会出现在质控区内（C）。质控区内（C）所显现的紫红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。【主要组成成份】试剂盒的主要成分 试剂盒主要由乙肝表面抗原试纸条、乙肝表面抗体试纸条、乙肝e抗
7、原试纸条、乙肝e抗体试纸条、乙肝核心抗体试纸条以及外面的塑料盒组成。检测需要但未提供的材料1、 标本收集容器2、 离心机3、 计时器【储存条件及有效期】原包装应储于4-30，阴凉避光干燥处，有效期24个月。切忌冷冻或在已过有效期后使用。（有效期间包装袋）【样本要求】标本收集后应尽快分离出血清或血浆以避免溶血。血清由静脉采血后离心获得和血浆标本由静脉采血到抗凝管后离心获得，检测时，应尽量使用新鲜的标本。标本若不能及时送检，可在2-8冷藏3天。长期保存需冷冻于-20，忌反复冻融。发臭或溶血标本请勿使用。【检验方法】1、 在进行测试前必须先完整阅读使用说明书，使用前将试剂和标本恢复至室温（20-30
8、）。2、 从原本包装铝箔袋中取出试剂板，在一小时内应尽快地使用。3、 用吸管吸取标本，逐滴（每孔2-3滴）加入试剂板的五个加样孔中。4、 等待紫红色条带的出现，测试结果应在测定开始后15分钟开始读取。30分钟后判定无效。【检验结果的解释】阳性（+）：两条紫红色条带出现，一条位于检测区（T）内，另一条位于质控区（C）。阳性结果表明：标本中含有待测物质。阴性（-）：仅质控区（C）出现一条紫红色条带，在测试区（T）内无紫红色条带出现。阴性结果表明：标本中检测不出待测物质。无效：质控区（C）未出现紫红色条带，表明不正确的操作过程或试剂已变质损坏。在任何情况下，应重新测试。如果问题仍然存在，应立即停止使
9、用此批号产品，并与当地供应商联系。注意：测试区（T）内的紫红色条带可显现出颜色深浅的现象。但是，在规定的观察时间内，无论该色带颜色深浅，即使只有非常弱的色带也应判为阳性结果。强阳性（+）：仅质控区（C）出现一条紫红色条带，在测试区（T）内无紫红色条带出现。阳性结果表明：标本中含有待测抗体。弱阳性（）：质控区（C）出现一条紫红色条带，在测试区（T）内有L4的紫红色色卡条带出现*。弱阳性结果表明：标本中含有少量待测抗体。*：此色卡为非随产品附件，如客户有需要，请和本公司联系索取。阴性（-）：两条紫红色条带出现，一条位于测试区（T）内，另一条位于质控区（C）。阴性结果表明：标本中检测不出待测抗体。无
10、效：质控区（C）未出现紫红色条带，表明不正确的操作过程或试剂已变质损坏。在任何情况下，应重新测试。如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品，并与当地供应商联系。【检验方法的局限性】1、 乙型肝炎病毒表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体、核心抗体检测试剂盒（胶体金法）是用于测试血清/血浆标本。2、 由于在技术上和操作上可能出现的失误，同时也由于标本中存在干扰物质，实际结果有可能错误。对可疑结果应作相应的进一步检测。3、 乙型肝炎病毒表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体、核心抗体检测试剂盒（胶体金法）只是定性检测血清/血浆中乙肝病毒标志物的存在，但不能确定其在标本中的含量。4、 测试结果应在测定开始
11、后15分钟开始读取，30分钟后判定无效。【产品性能指标】HBsAg试剂10分钟可检测出2.5ng/ml的HBsAg，30分钟可检出1.0ng/ml的HBsAg。 HBsAb试剂可检测出30mIu/ml的HBsAb。用本试剂测试1192份临床标本，并与ELISA试剂比较，艾康试剂相比对照试剂：HBsAg灵敏度为99.23%、特异性为100%；HBsAb灵敏度为99.45%、特异性为99.64%；HBeAg灵敏度为97.14%、特异性为100%；HBeAb灵敏度为98.23%、特异性为99.67%；HBcAb灵敏度为98.03%、特异性为99.85%。20mg/dl抗坏血酸、1000mg/dl血色
12、素、60mg/dl胆红素、1000mg/dl草酸、2000mg/dl人血清白蛋白、500mg/dl甘油三酯对本试剂不产生干扰。 本试剂在检测甲肝阳性、丙肝阳性、戊肝阳性、艾滋阳性、梅毒抗体阳性、和类风湿因子阳性血清标本时，结果没有交叉反应。【注意事项】1、 乙型肝炎病毒表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体、核心抗体检测试剂盒（胶体金法）只用于测试血清/血浆标本，用其他标本或溶液进行检测可能出现异常结果。2、 由于在技术上和操作上可能出现的失误，同时也由于标本中存在干扰物质，检测结果有可能错误。3、 请保证适量的标本用于检测，过多或过少的标本量都有可能导致结果出现偏差。4、 测试结果应在测定开始后15分钟开始读取，30分钟后判定无效。5、 本产品为目视读取结果，为保证判读结果的正确，请勿在光线昏暗出对结果进行判读。【参考文献】1、 侯方德、金冬雁主编现代分子病毒选论第一版，北京，科学出版社 19942、 黄祯祥主编医学病毒学基础及实验技术科学出版社3、 林京香、祁自柏我国乙型肝炎诊断试剂的质量现状4、 俞海燕、陶义训免疫层析试验的临床应用进展临床检验信息 1985，5：118120
