模块5 组培培养物的不良表现及改进措施1

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1、组培培养物的不良表现及改进措施,初始培养阶段,1.培养物水浸状、变色、坏死、茎断面附近干枯 可能原因:表面杀菌剂过量,消毒时间过长,外植体选用不当(部位或时期)。,改进措施:,调换其他杀菌剂或降低浓度,缩短消毒时间,试用其他部位,生长初期取材。,2.培养物长期培养几乎无反应 可能原因:基本培养基不适宜,生长素不当或用量不足,温度不适宜。,改进措施:,更换基本培养基或调整培养基成分,尤其是调整盐离子浓度,增加生长素用量,试用2,4-D,调整培养温度。,3.愈伤组织生长过旺、疏松,后期水浸状,可能原因:激素过量,温度偏高,无机盐含量不当。,改进措施:,减少激素用量,适当降低培养温度,调整无机盐(尤

2、其是铵盐)含量,适当提高琼脂用量增加培养基硬度。,4.愈伤组织太紧密、平滑或突起,粗厚,生长缓慢,可能原因: 细胞分裂素用量过多; 糖浓度过高; 生长素过量。,改进措施:,减少细胞分裂素用量; 调整细胞分裂素与生长素比例; 降低糖浓度。,5.侧芽不萌发,皮层过于膨大,皮孔长出愈伤组织,可能原因:枝条过嫩,生长素、细胞分裂素用量过多。 +改进措施:减少激素用量,采用较老化枝条。,继代培养阶段,1.苗分化数量少、速度慢、分枝少、个别苗生长细高 可能原因:细胞分裂素用量不足,温度偏高,光照不足。,改进措施:,增加细胞分裂素用量; 适当降低温度; 改善光照; 改单芽继代为团块(丛芽)继代。,2.苗分化

3、过多,生长慢,有畸形苗,节间极短,苗丛密集,微型化,可能原因:细胞分裂素用量过多,温度不适宜。,改进措施:,减少或停用细胞分裂素一段时间; 调节温度。,3.分化率低,畸形,培养时间长时苗再次愈伤组织化,可能原因: 生长素用量偏高,温度偏高。,改进措施:,减少生长素用量; 适当降温。,4.叶粗厚变脆,可能原因: 生长素用量偏高,或兼有细胞分裂素用量偏高。 改进措施: 适当减少激素用量,避免叶片接触培养基。,5.再生苗的叶缘、叶面等处偶有不定芽分化出来,可能原因:细胞分裂素用量偏高,或表明该种植物适于该种再生方式。 改进措施:适当减少细胞分裂素用量,或分阶段地利用这一再生方式。,6.丛生苗过于细弱

4、,不适于生根或移栽,可能原因: 细胞分裂素浓度过高或赤霉素使用不当,温度过高,光照短,光强不足,久不转移,生长空间窄。,改进措施:,减少细胞分裂素用量;免用赤霉素;延长光照时间;增强光照;及时转接;降低接种密度;更换封瓶纸的种类。,7.幼苗淡绿,部分失绿,可能原因: 无机盐含量不足,PH值不适宜,铁、锰、镁等缺少或比例失调,光照、温度不适。 改进措施:针对营养元素亏缺情况调整培养基,调好PH值,调控温度、光照。,8.幼苗生长无力、发黄落叶、有黄叶、死苗夹于丛生苗中,可能原因:瓶内气体状况恶化,PH值变化过大,久不转接导致糖已耗尽,营养元素亏缺失调,温度不适,激素配比不当。,改进措施:,及时转接

5、;降低接种密度;调整激素配比和营养元素浓度;改善瓶内气体状况;控制温度。,生根阶段,1.培养物久不生根,基部切口没有适宜的愈伤组织 可能原因:生长素种类、用量不适宜;生根部位勇气不良;生根程序不当;PH值不适,无机盐浓度及配比不当。,改进措施:,改进培养程序,选用适宜的生长素或增加生长素用量,适当降低无机盐浓度,改用滤纸桥液培养生根等。,2.愈伤组织生长过快、过大,根茎部肿胀或畸形,几条根并联或愈合。,可能原因: 生长素种类不适,用量过高,或伴有细胞分裂素用量过高,生根诱导培养程序不对。,改进措施:,调换生长素种类或几种生长素配合使用;降低使用浓度;附加VB2或PG等减少愈伤,改变生根培养程序等。,

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