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1、生物技术实践微生物的培养与应用21、某同学欲从土壤中筛选能够分解纤维素的细菌，请回答以下问题：（1）在筛选具有分解纤维素能力的细菌时，应将土壤样品用_进行稀释，然后接种到以_为唯一碳源的培养基上。（2）采用_法对初步筛选到的菌株进行纯化。（3）对纯化的菌种再采用_方法进行鉴定。（4）若将稀释105倍的上述纤维素分解菌菌液，用直接计数法和稀铎涂布平板法进行计数。直接计数法：用吸管吸取0.1ml该菌液，滴于血球计数板上的盖玻片边缘，待该细菌全部沉降到计数室底部，用显微镜直接计数，并计算出每升菌液的细菌数目。稀释涂布平板法计数：在五个固体培养基上分别接种O.lmL该细菌菌液，适宜条件下培养一段时间后
2、，培养基上的菌落数分别为：40、152、154、156，则每升菌液中细菌数量为_个。正常操作情况下，上述两种计数法中，_统计获得的细菌数量数目目偏多，原因是_。2、某实验小组欲从豆油污染的土壤中筛选出能髙效降解脂肪的菌株，请回答：(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以_为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲，该培养基属于_培养基。(2)为避兔培养皿污染，需将培养皿呈_状态放置。为避免培养液中菌体浓度过高,需将培养液进行_处理。为了排除培养基被污染,需设置接种_的培养基作为空白对照。(3)为了筛选出菌株，可将适童的_试剂滴加在平板中的菌落周围，洗去浮色后，如果菌落周围出现透明圈，则说明此种
3、菌能够分泌脂肪酶，纯化菌种时，为了对活菌进行计数，可采用_法接种于新的培养基平板上。(4)试验操作应在酒精灯火馅附近进行的原因是_。3、某小组开展“市售鲜猪肉中大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析”的研究，进行了相关实验操作，回答下列问题：（1）菌株的分离纯化:切取鲜猪肉表层样品接入蛋白胨大豆肉汤培养基中，放在37摇床振荡培养18h。取肉汤接种于琼脂平板培养基上，培养后再挑取单菌落，接种培养，培养一段时间后，再次挑取单菌落接种于固体培养基上，多次重复此步骤。菌落是指由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的_；操作过程中液体培养的目的是_，反复接种固体培养基的目的是_。（2）下面是纸片扩散法对猪大肠杆菌的耐药性
4、实验。步骤1:用打孔器制成直径约6 mm的圆形滤纸片，浸入一定浓度的氨苄西林，烘干；步骤2:取含大肠杆菌的菌液均匀涂布于_上；步骤3：在培养基上，每隔一定距离贴一片含药物的圆形滤纸片，培养，观察。分析与评价：观察发现，在每个纸片周围都形成了抑菌圈，其直径的大小表示大肠杆菌对氨苄西林的敏感性。抑菌圈直径越大，敏感性越_（填“高”或“低”）。发现在抑菌圈外长满多种不同形态的菌落，其原因可能是_。欲比较五倍子和黄连提取液对猪大肠杆菌的抑制作用，为治疗提供依据。请写出实验思路:_。4、为调查水质情况，某研究小组对自来水水样中的大肠杆菌数量进行了测定。回答下列问题：（1）用滤膜法进行测定时，滤膜的孔径应
5、_（填“大于”或“小于”）大肠杆菌，将已知体积的水用滤膜过滤，然后将_放在伊红美蓝培养基上培养，大肠杆菌的菌落呈现_色，该培养基属于_（填“液体”或“固体”）培养基，培养基中的蛋白胨为大肠杆菌提供_。（2）该研究小组在统计菌落数目时，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止因_而遗漏菌落的数目。通过统计菌落的数目计算出水样中大肠杆菌的数量，其原理是_，但测定值比实际值_（填“偏高”或“偏低”），原因是_。（3）大肠杆菌与制作果酒用的酵母菌在结构上最主要的区别是_。5、根据所学内容，回答下列问题。（1）研究发现，乳酸菌还可产生乳酸菌素，抑制肉制品中致病菌和腐败菌的生长,起到生物防腐的作用。
6、为探究不同种乳酸菌的抑菌效果，将稀释倍数相同的等量乳酸菌培养液滴加在长满致病菌的平板上，一段时间后，会出现以滴点为中心的抑菌圈，实验结果如下表。三种乳酸菌对各致病菌的抑菌圈直径（mm）菌株编号金黄色葡萄球菌单增李斯特菌阪崎肠杆菌鼠伤寒沙门氏菌大肠杆菌PC316.22.014.413.111.9PC1518.215.312.113.010.5PCS22.59.616.215.313.5实验的因变量是_。（2）纯化乳酸菌时可选用平板划线法或_接种，还需要设置_的培养基作为对照，若对照组培养基表面没有菌落生长，说明培养基没有被杂菌污染。（3）乳酸菌常用于制作酸奶等发酵食品。若牛奶中含有抗生素，会影响
7、酸奶的制作效果，原因是抗生素能_乳酸菌。（4）胡萝卜素的萃取过程应该避免明火加热，采用_加热，其原因是有机溶剂都是易燃物,直接使用明火加热容易引起_。（5）果酒酿造过程中如果果汁灭菌不合格，含有醋酸杆菌，在酒精发酵旺盛时，醋酸杆菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸？说明理由。_。1、【答案】 无菌水 纤维素 稀释涂布平板法或平板划线法 刚果红染色法 1.261011 直接计数法 直接计数法无论菌休死活均被计数，而稀释涂布平板法当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落2、【答案】 豆油 选择 倒置 梯度稀释 等量无菌水 苏丹 稀释涂布平板 避免周围环境中微生物的污染3、【答案】 子细胞群体
8、 获得含有大肠杆菌等菌的菌液 分离纯化菌落 平板培养基 高 操作过程污染了其他微生物 取等量相同浓度的五倍子后黄连提取液，采用纸片扩散法，比较抑菌圈的直径大小，直径越大，抑制作用越强4、【答案】 小于 滤膜 黑 固体 碳源、氮源和维生素 培养时间不足 培养基表面生长的一个菌落来源于样品中的一个活菌 偏低 两个或多个大肠杆菌连在一起时，培养基上只能观察到一个菌落 没有以核膜为界限的细胞核5、【答案】 抑菌圈直径的大小 稀释涂布平板法 未接种乳酸菌 杀死 水浴 燃烧,爆炸 不能，因醋酸杆菌是好氧型细菌，而果酒发酵是无氧环境(或因醋酸杆菌需要在有氧且温度是3035条件下，才能将糖转化为醋酸，而此时发酵罐中的条件是无氧且温度是1825)
