超声 微波 协同萃取 法提取杜梨果实多糖

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1、超声微波协同萃取法提取杜梨果实多糖作者:赵小亮白红进吴翠云王彦芹王星军李雨潇【摘要】目标提取杜梨果实多糖，并测定其含量。方法采取超声?微波协同萃取法和惯例水浴提取杜梨果实多糖，并用蒽酮?硫酸比色法测定多糖含量。结果超声波-微波协同萃取法比拟常规水浴法提取杜梨果实多糖后果更好，两种方法提取多糖的含量分辨是13.91%跟12.74%;葡萄糖浓度在25.15100.6gml-1规模内呈良好的线性关联，均匀回收率为100.5%，RSD1.59%(n=5)。论断超声-微波协同萃取法可作为杜梨果实多糖提取的首选方法，蒽酮?硫酸比色法测定多糖含量的方法精确，反复性好。【要害词】杜梨果实多糖超声微波协同萃取含

2、量测定Abstract:ObjectiveToextractthepolysaccharidefromthefruitsofPyrusbetulaefoliaBunge，andtodetermineitscontent.MethodsUltrasonic-microwavesynergisticandwaterbathwereemployedtoextractthepolysaccharideandanthrone-sulphuricacidcolorimetrywasusedtodetermineitscontent.ResultsThereexistedremarkablydifferen

3、cesbetweenthetwomethods;ultrasonic-microwavesynergisticextractionwastheoptimalmethod.Thepolysaccharidecontentsofthetwomethodswere13.91%and12.74%respectively.Thelinearrangewas25.15100.6gml-1forglucose.Theaveragerecoveryrates100.5%(RSD1.59%，n=5).ConclusionTheultrasonic-microwavesynergisticextractionma

4、ytakethefirstchoicemethod.Themethodofanthrone?sulphuricacidcolorimetryfordeterminationofthepolysaccharidecontentisstableandaccurate.Keywords:ThefruitsofPyrusbetulaefoliaBunge;Polysaccharide;Ultrasonic?microwavesynergisticextraction;Contentdetermination杜梨PyrusbetulaefoliaBunge属蔷薇科Rosaceae梨属(PyrusL.)乔

5、木，在微酸性和碱性泥土中生长良好，尤其能耐盐碱，在贫瘠和干燥土壤中也能生长。其种子发芽率高，能抗病虫害，是防护林及沙荒地造林的可贵树种。杜梨药用称棠梨，主治功能为敛肺涩肠、止咳止痢。常用于久咳、久泻、久痢等1。本草纲目记录棠梨(即杜梨)味酸、甘、涩、寒;无毒。烧熟食用，可治泄泻痢疾2。依据检索，目前杜梨主要作为砧木、园林树种以及主要的木材起源普遍散布在我国的北部、东北部和中部各省(区),阴茎延长手术，以黄河流域分布较多1。对于杜梨的研究重要集中在种子萌生与幼苗生长、幼苗根系成长状态、作为砧木嫁接梨树等方面的研究，对杜梨果实多糖的提取及含量测定方面的研讨未见相干报道,阴茎延长方法。本试验采用超声

6、-微波协同萃取和常规水浴提取杜梨果实多糖，并用蒽酮-硫酸比色法测定多糖的含量，为杜梨资源的进一步开发应用供给实践根据。1器材1.1实验材料实验用杜梨于2005?11采自新疆塔里木盆地，经鉴定为蔷薇科动物杜梨PyrusbetulaefoliaBunge的果实，风干，去除种子及果柄，破碎后过40目筛备用。1.2仪器与试药SartoriusBS210S天平(北京塞多利斯天平有限公司)，T6?紫外可见分光光度计(北京普析通用有限公司)，DZF?6021型真空干燥箱(上海精宏实验仪器装备有限公司)，CW?2000型超声?微波协同萃取仪(上海新拓微波溶样测试有限公司)，RE52?99型旋转蒸发仪(上海亚荣

7、生化仪器厂)，1?15K型高速冷冻离神思(德国Sigma公司)，HH?S型恒温水浴锅(江苏省金坛市医疗仪器厂)，索氏提取器，其余常规玻璃仪器。所用试剂葡萄糖，蒽酮，95%乙醇，无水乙醇，丙酮，乙醚，浓硫酸等均为剖析纯。2方法与结果2.1多糖的提取与精制2.1.1常规水浴提取称取过40目筛杜梨果实干燥粉末一定量，置于索氏提取器中，加入95%乙醇回流提取，去除色素及脂溶性物资，残渣室温挥干溶剂。取此干粉10g，3份，加入蒸馏水100ml，在80水浴中提取30min，滤过，滤渣采用同法再提取一次，合并两次滤液及洗涤液，定容至200ml容量瓶中。所得提取液，一部门作为供试样品，用于含量测定，其余减压稀

8、释到约50ml，冷却后搅拌下加入4倍体积的95%乙醇，静置过夜，4000r/min前提下离心20min，收集沉淀，积淀经无水乙醇、丙酮及乙醚屡次洗涤,早泄治疗需要多长时间，后在60真空干燥箱中干燥，得精制杜梨果实多糖。2.1.2超声-微波协同萃取法提取依照2.1.1项下方式处置杜梨果实，称取处理过的资料10g，3份，参加蒸馏水100ml，用超声?微波协同萃取法提取，超声功率50W，频率40kHz，微波频率2450MHz，温度80。提取两次，所得提取液，一局部作为供试样品，用于含量测定，其余照2.1.1项下办法操作，得精制杜梨果实多糖。2.2多糖含量的测定2.2.1蒽酮-硫酸溶液的配制精细称取0

9、.3007g蒽酮，迟缓加入浓硫酸完整溶解后转移至100ml棕色容量瓶中定容，得3.007mgml-1蒽酮?硫酸溶液，现配现用。2.2.2最大吸收波长的抉择精密汲取必定浓度的样品溶液1ml加入具塞试管，加入4.00ml蒽酮?硫酸溶液，摇匀后敏捷浸于冰水浴中冷却，后浸于沸水浴中，盖上塞，自水浴从新煮沸起，正确煮沸7min后即时掏出，用自来水冷却10min后于520720nm波长范畴内测定吸光度3，断定了其最大接收波长为620nm,白茅根多糖超声提取的优化。2.2.3标准曲线的制备精密称取105干燥至恒重的葡萄糖对比品100.6mg，置100ml容量瓶中，加蒸馏水溶解，定容，得1.006mgml-1

10、葡萄糖标准溶液。分别移取2.50，5.00，7.50，10.00ml的标准溶液置于100ml容量瓶中定容。量取1ml系列标准溶液于具塞试管中，以1ml蒸馏水作空缺，分离加入4ml蒽酮?硫酸溶液，立刻摇匀，置于冰水中，冷却后一起置于沸水，盖上塞，自再次沸腾加热7min，之后在流水放置10min冷至室温后，于620nm处测定吸光度值4，以葡萄糖浓度(C)对其吸光度(A)作回归处理，得回归方程:A=0.006C+0.0054，r=0.9996(n=4)。葡萄糖浓度在25.15100.6gml-1范围内与吸光度呈良好的线性关系。2.2.4显色时光的考核取1.006mgml-1葡萄糖标准溶液及样品溶液按标准曲线制备项下的方法测定其吸光度，每隔20min测定1次，成果表明，尺度溶液及样品溶液显色时间一致，且在2h内稳固。2.2.5换算因子的测定精密称取干燥恒重的杜梨果实多糖精制品13.2，23.4mg两份，置于100ml容量瓶中，加蒸馏水溶解定容，摇匀。精密量取1ml，照标准曲线的制备项下的方法操作，测定在620nm处的吸光度，根据线性回归曲线方程求出品质浓度，代入下式换算因子5，求得f分别为0.5200,滋阴潜阳解毒通络饮对SHR左心室肥厚及心肌、型胶原的影响，0.5243，取其平均值0.5222。