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1、梯度稀释涂平板制单菌落,主讲:刘保平(副教授) 单位:东北农业大学 生命学院 年月:2014年9月 地点:中国 哈尔滨,梯度稀释涂平板,分离微生物,画线分离,梯度稀释倒平板,改进的十倍梯度稀释涂平板制单菌落,菌液稀释过程,菌液浓度=3000 (活菌细胞/ml),管1中平均有300活菌细胞,容积V=1.5毫升,无菌水,管2中平均有30活菌细胞,菌液稀释过程图解,未知浓度菌悬液十倍梯度稀释,10-1 M0,10-2 M0,10-3 M0,10-4 M0,10-5 M0,10-6 M0,10-7 M0,10-8 M0,菌液接入平板,-8,-8,菌液浓度=M0,10-1 M0,10-2 M0,10-3
2、 M0,10-4 M0,10-5 M0,10-6 M0,10-7 M0,10-8 M0,-8,-8,-7,-7,-7,-7,-6,-6,-6,-6,-5,-5,-5,-5,初始菌液,-5,-5,-5,-5,-6,-6,-6,-6,-7,-7,-7,-7,-8,-8,-8,-8,-5,-5,-5,-5,-6,-6,-6,-6,-7,-7,-7,-7,-8,-8,-8,-8,倒置培养 经常观察,-5,-5,-5,-5,-6,-6,-6,-6,-7,-7,-7,-7,-8,-8,-8,-8,0,0,0,0,1,2,1,2,8,11,10,11,105,107,111,121,M02=10(1+2+1
3、+2)4107=1.5108,M03=10(8+11+10+11)4106=1.0108,M01=10(0+0+0+0)4108=0 (),M04=10(121+111+107+105)4105=1.1108,M02=10(1+2+1+2)4107=1.5108,M03=10(8+11+10+11)4106=1.0108,M04=10(121+111+107+105)4105=1.1108,M0=(M02+M03+M04)3 =(1.5+1.0+1.1)3108 =1.2108,10,接入平板的菌液是0.1ml, 对应的浓度就要乘以10,M0=(M02+M03+M04)3 =(1.5+1.0+1.1)3108 =1.2108,(单位?),(CFU/ml),初始菌液,CFU=Colony Form Unit,其他如:菌丝片段、芽孢、孢子囊、,单细胞+如上可能性单菌落,单位统称为菌落形成单位,英文名称为:Colony Form Unit,简称为CFU,改进的十倍梯度稀释涂平板制单菌落,菌液稀释过程,CFU概念,涂布平板及培养,数据处理,1、分离纯化微生物,2、测定活菌数浓度,