武汉大学微生物期末题库(陈向东班).pdf

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1、题题型型一一:问问答答题题 1 1. . 试试对对光光学学显显微微镜镜、透透射射电电镜镜、扫扫描描显显镜镜、扫扫描描隧隧道道显显微微镜镜在在原原理理、样样品品制制备备和和观观察察方方面面 的的异异、同同进进行行分分析析、比比较较。 答: 基基本本原原理理 :光学显微镜和透射电镜都是将光光源源透过样品后会会聚聚成成像像,其中光学显微镜使用 可见光, 而透射电镜使用电子束作为光源; 扫描电镜和扫描隧道显微镜是通过对样样品品表表面面进进 行行扫扫描描后后成成像像, 其中扫描电子显微镜使用电子书轰击样品表面并激发出产生二次电子, 二次 电子的信息被收集、处理后形成物象;而扫描隧道显微镜是用很细的针尖在

2、样品表面扫描, 收集处理和整理和针尖间的隧隧道道效效应应电电流流信信息息后形成物象。 观观察察 : 光学显微镜可以用肉眼从目镜中直接观察; 而电子显微镜和扫描隧道显微镜都只能 是通过荧光显微屏观察形成的物象,无法直接观察。 2 2. . 希希望望从从环环境境中中分分离离中中分分离离到到厌厌氧氧固固氮氮菌菌,你你该该如如何何设设计计实实验验? 答: (1)根据选择分离的原理设计不不含含氮氮的培养基,在这种培养基上生长的细菌,其氮素应 来自固氮作用。 (2)将环境样品(例如土样)稀释涂布到选择平板上,放置于厌厌氧氧罐罐中。对厌氧罐采用物 理、化学方法去去除除氧氧气气,保保留留氮氮气气。培养后在平板

3、上生长出来的细菌应是厌厌氧氧固固氮氮菌菌。 (3)挑取一定数量的菌落,对应点种到两块缺缺氮氮的的选选择择平平板板上,分别置于厌厌氧氧罐罐内内、外外保 温培养。在厌氧罐内外均能生长的为兼性厌氧固氮菌,而在厌氧罐外的平板上不生长,在厌 氧罐内的平板上生长的即为可能的厌氧固氮菌。 (4)对分离得到的厌氧固氮菌菌落样品进行系列稀释,涂布于相应的选择平板,重复上述 步骤直到获得厌氧固氮菌的纯纯培培养养。 3 3. . 为为什什么么说说巴巴斯斯德德和和柯柯赫赫是是微微生生物物学学的的奠奠基基人人? 答: 巴斯德和柯赫不仅是使微生学成为一门独立的学科的人, 也是在微生物学科研究发展中 起到重要推动的人。 巴

4、斯德的曲颈瓶实验彻底否定了“自生说” ,证明了环境微生物的客观存在;发现将病原 菌减毒后可诱发免疫性,首制狂犬病疫苗,预防接种;证实发酵由微生物引起;创立巴氏消 毒法。 柯赫证实了炭疽病菌是炭疽病的病原体;发现肺结核病的病原菌;提出柯赫原则;创建 了分离纯化微生物的技术。 综上所述,巴斯德与柯赫是微生物学的奠基人。 4. 为为什什么么使使用用1 10 00 0物物镜镜时时需需要要在在镜镜头头和和载载玻玻片片间间滴滴加 加香香柏柏油油? 答:在使用油镜时加香柏油具有以下两个作用: (1)由显显微微镜镜分分辨辨率率与与介介质质折折射射率率的关系可知,较高的折射率有益于分辨率的提高。香柏 油的折射率

5、是1.52,明显高于空气(1.0) ,因而使用香柏油可以提高分辨率,利于观察。 (2)香香柏柏油油的的折折射射率率与与玻玻璃璃的的折折射射率率(1.54)非非常常接接近近,滴加香柏油后原本在透镜和玻片 表面反射和折射的光线可以进入物镜中,从而提提高高了了亮亮度度,利利于于观观察察。 0.5 分辨率(最小可分辨距离)= n sin 5 5. . L Li is st te er r是是从从哪哪里里得得到到启启发发而而建建立立消消毒毒外外科科术术的的?从从微微生生物物学学角角度度来来对对该该技技术术进进行行分分析析和和 讨讨论论。其其理理论论和和实实践践在在哪哪里里行行业业也也可可得得到到应应用用

6、(请请至至少少举举 2 2 例例说说明明)? 答: (受受到到启启发发) :受到巴斯德(Luis Pasteur)“空气中的微生物导致了食物腐败”学说的启发, 李斯特怀疑手术伤口的化脓发炎也是微生物引起的。 进而他尝试将大剂量的饱和石炭酸溶液 注入伤口进行消毒。尤其令他自豪的是,在他坚持定期用石炭酸处理病人伤口后,病人不再 出现坏疽现象。他的研究为细菌致病理论提供了有力的证据,尽管直到十年后,各种疾病与 其致病菌之间的关系才被一一确定。 (从从微微生生物物学学角角度度分分析析、讨讨论论) :消毒外科术就是无菌操作技术。由于自然界中微生物无处 不在, 因此外科手术的创口十分容易受到微生物感染。

7、消毒外科术通过无菌操作技术来避免 微生物的污染,可以大大减少微生物引起伤口感染的几率,提高外科手术成功率。 (拓拓展展的的行行业业) :制药行业、食品行业,发酵工厂,等等 。 6 6. .可可用用哪哪些些方方法法来来获获得得微微生生物物的的纯纯培培养养? 答: 在一定条件下培养、 繁殖得到的微生物群体成为培养物, 只含有一种微生物的称为纯培养物。 通常只有纯培养物才能提供可以重复的结果。 所以纯培养技术是进行微生物研究的基础。 获 得微生物纯培养的方法主要有下列几种: 1).运用固固体体培培养养基基获得纯培养 主要有稀释倒平板法、涂平板法、平板划线法、稀释摇管法(厌氧微生物) ,这些技术都能

8、够对样品进行稀释,对微生物实现分离,从而得到纯培养。是运用最为广泛的方法。 2).用液液体体培培养养基基大量稀释获得纯培养 有些微生物无法在固体培养基上正常生长繁殖, 故可以在液体培养基中培养。 但此法稀释需 要大量平行对照。 3).单单胞胞子子分分离离 在显微镜下, 运用显微操作仪直接挑取单个细胞或个体进行培养, 此法可得到相对较纯净的 纯培养,但是操作技术高。 4).选选择择培培养养 以上方法都很难实现对环境中数量不占优势的微生物的分离和纯培养, 可以利用选择培养技 术获得。 可以抑制大多数微生物的生长或者促进待分离微生物的生长, 再进行稀释纯化得到 纯培养。 5).根据目标微生物的特点进

9、行富富集集培 培养养后再分离。 7 7. . 为为什什么么无无菌菌技技术术和和纯纯培培养养技技术术是是微微生生物物学学建建立立与与发发展展的的基基石石? 答: 微生物个体微小,对微生物的研究和利用多以群体为对象,群群体体需需通通过过培培养养获获得得;通常情况 下微生物纯纯培培养养物物才才能能保保证证结结果果的的可可重重复复性性;自然界中微生物混杂存在,无菌技术才能保 证培养物始始终终是是由由相相同同的的微微生生物物组组成成。 8 8. . 试试分分析析比比较较用用固固体体培培养养基基获获得得微微生生物物纯纯培培养养各各方方法法的的特特点点 答: (1)稀稀释释倒倒平平板板法法,细菌分离效果好,

10、但相对操作麻烦,不利于热敏感菌和好氧菌的生长。 (2)涂涂布布平平板板法法,方便,但有时涂布不均匀。 (3)平平板板划划线线法法,方便,但无法进行计数。 (4)稀稀释释摇摇管管,对厌氧菌进行纯培养分离,操作和观察均相对麻烦。 (5)选选择择平平板板,利用选择性培养条件(例如加抗生素,或用牛奶平板)较快地分离获得目 的菌。 9 9. . 为为什什么么说说微微生生物物是是人人类类的的敌敌人人,更更是是我我们们的的朋朋友友? 答: 朋朋友友: 微生物是自然界物质循环的关键环节; 体内的正常菌群是人及动物健康的基本保证 (帮 助消化、 提供必需的营养物质、 组成生理屏障) ; 微生物可以为我们提供很多

11、有用的物质 (有 机酸、酶、各种药物、疫苗、面包、奶酪、啤酒、酱油等等) ;基因工程为代表的现代生物 技术; 敌敌人人:引起疾病,各种物品的腐烂变质 1 10 0. . 微微生生物物世世界界由由哪哪些些基基本本的的生生物物类类群群构构成成? 答: (1)没有细胞结构的:病毒 (2)原核微生物:细菌、古生菌 (3)真核微生物:真菌(酵母、霉菌、覃菌) 、原生动物、单细胞藻类。 1 11 1. . 试试分分析析大大肠肠杆杆菌菌、粘粘细细菌菌、蛭蛭弧弧菌菌、放放线线菌菌、霉霉菌菌、酵酵母母在在个个体体形形态态、繁繁殖殖方方式式上上各各 有有什什么么特特点点? 答: (1 1)大大肠肠杆杆菌菌:单细胞

12、,杆状(1 分) ,二分裂方式繁殖(1 分) (2 2)粘粘细细菌菌:营养细胞为单细胞杆状(1 分) ,可形成多个细胞聚集成的子实体(1 分) 、其 中有粘胞子,以二分裂方式繁殖(1 分) ,粘胞子只是休眠结构(1 分) ,子实体结构则有利 于粘胞子的传播 (3 3)蛭蛭弧弧菌菌:细胞杆状,呈不足一圈的弯曲(弧状) (1 分) ,鞭毛偏端生,多为单根鞭毛 (偏端单生) ,行寄生生活时以复分裂方式繁殖(1 分) 。 (4 4)放放线线菌菌:单细胞,多油分枝发达的菌丝组成(1 分) ,有基内菌丝(营养菌丝) 、气生 菌丝、孢子丝(繁殖菌丝)三种(1 分) ,以无性孢子和菌丝短片方式繁殖(1 分)

13、(5 5)霉霉菌菌:分枝发达的菌丝组成(1 分) ,有基内菌丝(营养菌丝) 、气生菌丝、孢子丝(繁 殖菌丝)三种(1 分) ,有些霉菌的菌丝会可形成特化结构(1 分) ,以无性孢子、有性孢子、 和菌丝短片方式繁殖(1 分) (6 6)酵酵母母菌菌:单细胞,圆形或椭圆形(1 分) ,也有可形如丝状的酵母(丝状酵母) (1 分) , 以芽殖、裂殖二种方式进行无性繁殖(1 分) ,以形成子囊和子囊孢子的形式进行有性繁殖 (1 分) 1 12 2. . 观观察察、判判断断某某个个细细菌菌是是否否具具有有鞭鞭毛毛有有些些什什么么方方法法?请请设设计计实实验验证证实实鞭鞭毛毛与与细细菌菌运运动动能能 力力

14、以以及及细细菌菌趋趋化化性性之之间间的的关关系系 答: 观观察察、判判断断某某个个细细菌菌是是否否具具有有鞭鞭毛毛的的方方法法: 电子显微镜观察(1 分) 鞭毛染色观察(1 分) 显微镜下观察细菌的运动方式进行判断(1 分) 半固体穿刺观察细菌菌落沿穿刺线分布情况进行判断, 或将菌点种在半固体平板上观察菌落 的扩散情况(2 分) 基因组测序,分析是否存在鞭毛相关基因(1 分) 。 设设计计实实验验证证实实鞭鞭毛毛与与细细菌菌运运动动能能力力以以及及细细菌菌趋趋化化性性之之间间的的关关系系: 将鞭毛相关基因敲除(1 分)分别得到突变株和野生型菌株, 后用上述显微镜和半固体培养基比较突变株和野生菌

15、的运动能力改变(2 分) 用栓菌实验(将鞭毛固定在载玻片)证实鞭毛通过旋转推动细菌前进(1 分) 将鞭毛固定在小球上后观察鞭毛旋转方向对其运动性的影响(1 分) 将分别含有中性物质, 引诱剂、 趋避剂的毛细管插入三个细胞浓度相同的野生型菌株培养液 中,一段时间后比较毛细管中和原培养液中细菌浓度的差异(3 分) 上述实验用鞭毛缺失突变株进行同样实验,比较结果的差异(1 分) 。 1 13 3. . 支支原原体体有有何何基基本本特特点点?为为什什么么对对一一般般细细菌菌无无作作用用的的多多烯烯类类抗抗生生素素却却可可以以选选择择性性地地抑抑制制 支支原原体体?该该如如何何检检测测支支原原体体的的存

16、存在在? 答: 支支原原体体基基本本特特点点:进化中形成没有细胞壁的细菌(1 分) ,形态呈多形态(1 分) ,可以通过 细菌过滤器(1 分) ;营养要求苛刻,但可在人工培养基平板上形成菌落(1 分) ;有些是人、 动植物的致病菌(1 分) ;支原体常造成细胞培养的污染(1 分) 支原体在生长时需要从环境中摄取胆固醇类甾醇(4 C 环) (1 分) ,以稳定细胞膜的结构(1 分) ,而其他细菌细胞膜内起稳定细胞膜结构的多为 hopanoid(藿烷类化合物或类何帕烷, 5C 环 )(1 分) , 而多烯类抗生素的作用靶点是细胞膜中的胆固醇类甾醇 (1 分) , 对 hopanoid 无作用,因此多烯类抗生素可抑制支原体而对一般细菌无作用。 支支原原体体检检测测: (1)将样品通过细菌过滤器后在平板上进行培养,看是否形成支原体特征性的 “油煎荷包蛋”状的微小菌落(2 分) (2)用

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