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1、植物体细胞杂交过程,杂种小植株,杂种植株,温故知新:,回忆已学知识，你是否已经见到过动物细胞融合的实例？,人-鼠(想像图),2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体,鼠细胞,人细胞,人工诱导,一、动物细胞融合,杂交细胞,动物细胞融合（技术）：是指（在一定的条件下）两个或多个细胞融合形成一个细胞的过程。,1、概念：,2、诱导融合的因素 化学法：聚乙二醇(PEG)诱导融合. 物理法：电激融合 生物法：灭活的病毒诱导融合.,病毒颗粒黏 附细胞表面,细胞膜连接,细胞膜被 病毒颗粒穿通,细胞融合、形成杂种细胞,为什么灭活的病毒能作诱导剂？,灭活丧失感染性但保留融合活性,获得杂种植株,去壁原生质体 融合诱导新壁
2、 杂种植株,细胞膜的流动性,细胞膜的流动性,结果,诱导方法,步骤,融合的原理,动物细胞融合,植物体细胞杂交,比较项目,植物、动物细胞融合的比较,获得杂交细胞,小结,3、动物细胞融合技术的意义和应用,问题：抗体由什么细胞产生？其化学本质是什么？与抗原作用的特点？主要分布在哪里？,二、单克隆抗体的制备,抗体的传统生产方法：,从血清中分离抗体,该法制备抗体的特点： 产量低、纯度低，且抗体的特异性差。,多种浆细胞,动物体内,多种抗体,抗原,提示：每一个效应B淋巴细胞只分泌一种化学性质单一，特异性强的抗体。 如果利用单个效应B淋巴细胞进行无性繁殖（克隆），形成细胞群，这样的细胞群就有可能产生出化学性质单
3、一、特异性强的抗体单克隆抗体。,问题： 怎样获得化学性质单一、特异性强的抗体呢？,材料：效应B细胞在体内只能由B淋巴细胞增殖、分化而来,不再进行分裂,在体外培养的条件下，也很难分裂。,思考：用什么方法才能让B淋巴细胞在体外培养时既能产生抗体又能无限增殖?,杂交瘤细胞,动物细胞培养技术,动物细胞融合技术,单克隆抗体,既能产生特异性抗体， 又能大量繁殖的细胞,骨髓瘤细胞能无限增殖,+,一个浆细胞只分泌一种特异性抗体,设计方案：,读下面一段文字资料，找出单克隆抗体的概念,人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性
4、强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。,单克隆抗体的概念,单: 单个细胞 克隆: 无性繁殖 单克隆抗体:单个细胞克隆产生的化学性质单一特异性强的抗体,单克隆抗体的制备,问题思考,Q1,Q2,细胞两两融合后，有哪些类型？,B-B;B-瘤;瘤-瘤,哪种是需要的类型，要筛选吗？,细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。 人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。 鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，可是能不断分裂增殖。 你想到筛选杂交瘤细胞的方案了么？,小资料：,单克隆抗体的制备,问题思考,Question,经过选择培养基筛选的杂
5、交瘤细胞群进行克隆是否就得到产生纯度高的抗体？,还需怎么办？,有限稀释法 稀释多次,稀释,对能产生特异性抗体的单个杂交瘤细胞 进行克隆，即单细胞克隆。 由它产生的抗体，即单克隆抗体。,将培养皿孔内的上清液取出，检测抗体。,多孔细胞培养板,单克隆抗体,杂交 细胞,灭活的病毒等手段,小鼠骨髓瘤细胞,B淋巴细胞,经免疫的小鼠,提取,杂交瘤细胞,第一次筛选,用特定的 选择培养基,第二次筛选,能产生专一抗体的杂交瘤细胞,体外培养,注射到小鼠腹腔,提取单克隆抗体,4.单抗制备过程中应用了那些技术？,动物细胞融合、动物细胞培养,1.此过程中至少进行了几次筛选？目的相同吗？,3.单克隆抗体的优点？,特异性强，
6、灵敏度高，可大量制备。,2.最终从哪儿提取单克隆抗体？,（1）作为诊断试剂最广泛应用 准确、高效、简易、快速,（如同位素标记单克隆抗体，可诊断肿瘤、心血管畸形等）,三、单克隆抗体的应用,（2）治疗疾病和运载药物,生物导弹 = 单克隆抗体 + 药物（治疗肿瘤）,(“生物导弹” 单抗导向，药物为弹头),单克隆抗体的应用,疗效高、副作用小,1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（ ） A.经过免疫的B淋巴细胞 B.没经过免疫的T淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的淋巴细胞,A,巩固练习,2.动物细胞融合与植物体细胞杂
7、交的比较中，正确的是（ ） 诱导融合的方法完全相同 B.所用的技术手段基本相同 C. 操作步骤基本相同 D. 都能形成杂种细胞,D,3. 单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是（ ） A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合 B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成 C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成 D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成,D,4.只能使动物细胞融合的常用诱导方法是（ ） APEG B灭活的病毒 C电刺激 D离心,B,5. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是 （ ） 淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞 B淋巴细胞自身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞 A. B. C. D.,C,6.“生物导弹”是指 （ ） A.单克隆抗体 B.杂交瘤细胞 C.产生特定抗体的B淋巴细胞 D.在单克隆抗体上连接抗癌药物,D,单克隆抗体的制备,有梦想，才会有创造！,已成功的动物细胞融合实例有很多，如人小鼠、人兔、人鸡、鼠兔、鸡鼠等上百种融合细胞。甚至已成功完成了酵母菌鸡 、人胡萝卜 等细胞的融合。,想了解更多信息，可通过网络、电视、杂志等途径关注细胞融合和单克隆抗体的最新信息。,生物种间杂交想像图,
