薄层色谱法原理

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1、薄层色谱法,thin layer chromatography,TLC,第一节 薄层色谱法的基本原理,定义:薄层色谱法是将被分离的试样溶液点在薄层板的一端,再用溶剂把试样展开,从而使试样组分分离。 分型:吸附薄层色谱、分配薄层色谱法、离子交换薄层色谱法、凝胶色谱等。,(一)薄层色谱法的原理,将一定粒度的吸附剂均匀地涂铺在表面光洁的玻璃板或塑料平板上,制成薄层板。,把待分析试样的溶液滴加在薄层板的起始线上(点样),把薄层板放入层析缸中,底端浸入适当溶剂。,展开过程中,组分在两相之间发生多次吸附解吸平衡,吸附牢的组分随展开剂移动慢,吸附弱的组分随展开剂移动快,一段时后,组分被分离,各组分在薄层板上

2、形成不同距离的斑点。,前沿,原点,A,B,比移值Rf,A,B,Rf值相差越大,分离越好。一般要求分离后组分的Rf值在0.20.8之间,各组分的Rf值之差应大于0.05,以防斑点重叠。,(二)固定相和流动相,1、固定相(吸附剂) 常用的吸附剂:硅胶、氧化铝、聚酰胺、活性炭和大孔吸附树脂等。 吸附剂的选择要合适,与流动相、被分离化合物不反应,2、流动相(展开剂) 薄层色谱法中采用单一溶剂或多元混合溶剂作流动相,称为展开剂。 与吸附柱色谱法中选择流动相的一般规则相同,展开剂的选用要从被分离试样组分极性、吸附剂活性和展开剂的极性三个因素综合考虑。,吸附剂和展开剂的选择,对于极性较小的被分离试样组分,应

3、选用活性较强的吸附剂,极性较小的展开剂; 对于极性较大的被分离试样组分,应选用活性较弱的吸附剂,极性较大的展开剂。,被分离试样组分极性、吸附剂活性和展开剂极性之间的关系,展开剂成分的选择:,对于容易分离的化合物,用单一溶剂展开 优点:溶剂简单,分离重现性好。 对于难分离组分,则选用二元、三元、甚至多元溶剂 Rf太小加入强极性展开剂 Rf过大降低展开剂的极性,优化 1.占比例较大的溶剂为主要溶剂,可使试样组分溶解并基本分离。 占比例较小的溶剂可进一步调整各组分Rf值,改善分离效果。 2.分离酸性或碱性组分时,往往在展开剂中加入少量酸或碱,以防这些组分离解,使这些组分的斑点更加集中和清晰,从而提高分离度。 3.当展开剂的粘度太大时,可在展开剂中加入粘度小的溶剂,以降低展开剂粘度,从而提高展开速度。,谢谢 thank you,谢谢观赏,WPS Office,Make Presentation much more fun,WPS官方微博 kingsoftwps,

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